复方枣仁安神胶囊质量控制研究

复方枣仁安神胶囊质量控制研究 复方枣仁安神胶囊质量控制研究 2010年7月第17卷第7期中国中医药信息杂志 复方枣仁安神胶囊质量控制研究 高家荣,魏良兵,韩燕全,夏伦祝 (安徽中医学院第一附属医院药学部,围家中医药管理局中药制剂三级实验室,安徽合肥230031) 摘要:目的建立复方枣仁安神胶囊的质量控制方法.方法采用薄层色谱法对复方枣仁安神胶囊中远志,当 归,黄连和木香进行定性鉴别,采用高效液相色谱法测定当归中阿魏酸的含量.结果薄层色谱法检测远志,当归, 黄连和木香具有很强的专属;阿魏酸在20.2,404.0ng范围内呈良好的线性关系,r=0.9998,平均回收率为99.12%, RSD=1.45%.结论所建立的鉴别方法专属性强,定量方法简便,准确,可用于复方枣仁安神胶囊的质量控制. 关键词:复方枣仁安神胶囊;薄层色谱法;高效液相色谱法;阿魏酸;含量测定 D0l:10.3969/j.iSSD.1005—5304.2010.07.023 中图分类号:R284.1文献标识码:A文章编号:1005—5304(2010)07—0057—03 StudyonQualityControlofFufangZaorenAnshenCapsuleGAOJia—rong,WEILiang—bing,HANYan—quan, etal(TheFirstAffiliatedHospitalofAnhuiCollegeofTCM,Grade3LaboratoryofTCMPrep aration.StateAdministration ofTCM,Hefei230031,ChinaJ Abstract:ObjectiveToestablishthequalitystandardofFufangZaorenAnshencapsule.Meth odPolygala radix,AngeliaSinensis,CoptischinensisandRadixAucklandiaeinFufangZaorenAnshenc apsulewere identifiesdbyTLC.ThecontentofFerulicacidwasdeterminedbyHPLC.ResultsTheTLCfor identification wasspeci~forPolygalaradix,AngefiaSinensis,CopfischinensisandRadixAucklandiae.Fe rulicacid showedagoodlinearrelationshipintherangeof20.2~404.0ng.r=O.9998.Theaveragerecov erywas 99.12%,andRSDwas1.45%.ConclusionThemethodisconvenient,rapid,accurate,andsuit ableforthe qualitycontrolofFufangZaorenAnshencapsule. Keywords:FufangZaorenAnshencapsule;TLC;HPLC;Feruficacid;contentdeterminatio n 复方枣仁安神胶囊由酸枣仁,柏子仁,远志,当归,黄连, 木香6味中药组成,为本院名老中医的经验方,在临床使用已 经2O余年.该方具有补心养肝,养血安神作用,用于心肝血虚 引起的失眠,多梦,惊悸等症.为了更有效地控制制剂质量, 我们对该制剂中远志,当归,黄连,木香进行了薄层鉴别,采 用高效液相色谱(HPLC)法测定其君药当归中阿魏酸的含量,从 而达到了有效控制其质量的目的.现报道如下. 1仪器与试药 美国Waters高效液相色谱仪,Waters600泵,2487紫外检 测器,Waters—M32色谱工作站,CAMAG层析缸(瑞士CAMAG公 司),CAMAG紫外光灯(瑞士CAMAG公司),NANOMAT4手动点样仪 (瑞士CAMAG公司),CAMAGTLCPLATEHEATERIII型加热板(瑞 士CAMAG公司),定量毛细管(瑞士CAMAG公司),SK3200H超声 仪(工作频率:53kHz,功率:15Ow),硅胶G溥层板(青岛海 洋化工集团),SARTORIUSBP211电子天,CANON数码照相 机. 阿魏酸(批号110773—9910),盐酸小檗碱(批号l10713— 200208),远志对照药材(批号120989—200304),当归对照药 材(批号120927,200411),木香对照药材(批号120921—200405) 均购于中国药品生物制品检定所;复方枣仁安神胶囊(安徽中 医学院第一附属医院制剂中心,批号20081217,20090304, 20090622).所用试剂均为 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 纯. 基金项目:安徽省高等学校省级自然科学基金(KJ2008A41ZC) 2定性鉴别 2.1远志 取本品内容物6g,加盐酸无水乙醇溶液(1O一100)20mL, 超声提取30min,放冷,滤过,滤液加水3OmL,用氯仿振摇提取 2次,每次2OmL,合并氯仿液,蒸干,残渣加乙酸乙酯1mL使溶 解,离心,取上清液作为供试品溶液.另取远忠对照药材1g, 同法制成对照药材溶液.按处方量自制成缺远志的成药,同法 制成阴性对照溶液.照薄层色谱法[2005年版《中华人民共和 国药典》(一部)附录?B]试验,吸取上述溶液各5L,分别点 于同一硅胶G薄层板上,以三氯甲烷一甲醇甲酸(18:2:0.4) 为展开剂,展开,取出,晾干.喷以10%硫酸香草醛溶液,在 105?加热至斑点显色清晰.供试品色谱中,在与对照药材色 谱相应的位置上,显相同颜色的斑点,阴性对照无干扰. 2.2当归 取本品5g,加正己烷3OmL,超声提取3Omin,滤过,滤 液蒸干,残渣加正己烷lmL使溶解,作为供试品溶液.另取当 归对照药材2g,同法制得对照药材溶液.按处方量自制成缺 当归的成药,同法制成阴性对照溶液.照薄层色谱法[2005年 版《中华人民共和国药典》(…部)附录?B]试验,吸取上述供 试品溶液2L,对照药材溶液1tJL,阴性对照品溶液2L, 以石油醚(60~90?)乙酸乙酯(9:1)为展开剂,展开,取出 晾干,置紫外光灯(365nm)下检视.供试品色谱中,在与对照 药材色谱相应的位置上,显相同颜色的荧光斑点,阴性对照无 干扰. ? 58?ChineseJournalofInformationonTCMJu1.2010Vo1.17No.7 2.3黄连 取本品内容物1g,加甲醇2OmL,超声提取30min,滤过, 滤液浓缩至近干,加甲醇10mIJ使溶解,作为供试品溶液.另取 盐酸小檗碱对照品,加甲醇制成每1mL含0.5mg的溶液,作为 对照品溶液.按处方量自制成缺黄连的成药,同法制成阴性对照 溶液.照薄层色谱法[2005年版《中华人民共和国药典》(一部) 附录VIB]试验,分别吸取上述溶液各1pL,分别点于同一硅胶G 薄层板上,以正丁醇一冰醋酸水(10:1:2)为展开剂,展开,取 出,晾干,置紫外灯(365nm)下检视.供试品色谱中,在与对照品 色谱相应的位置上,显相同的黄色荧光斑点,阴性对照无干扰. 2.4木香 取本品内容物5g,加三氯甲烷10mL,超声处理30min, 滤过,滤液作为供试品溶液.另取木香对照药材1g,同法制成 对照药材溶液.按处方量自制缺木香的成药,同法制成阴性对 照溶液.照薄层色谱法[2005年版《中华人民共和国药典》(一 部)附录?B]试验,吸取供试品溶液2L,对照药材溶液0.5L 阴性对照品溶液2LIL,分别点于同一硅胶G薄层板上.以三氯 甲烷正己烷(5:1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸 香草醛溶液.供试品色谱中,在与对照药材色谱相应的位置上, 显相同颜色的斑点,阴性对照无干扰.. 3含量测定 3.1色谱条件与系统适应性试验 色谱柱:KromasilC18(250mm×4.6nlnl,5m).流动相: 乙腈一0.5%冰醋酸(20:80).流速:1.0mL/min.柱温:35?. 检测波长:320rlIn.分别精密吸取对照品溶液,供试品溶液和 阴性对照品溶液各20uL,注入液相色谱仪,阿魏酸色谱峰保 留时间为14min左右,与其他组份峰分离较好,>1.5,理论 板数按阿魏酸峰计算应在4000以上,阴性对照品溶液在阿魏 酸色谱峰相对应的位置上无干扰.色谱图见图l. AB Ct/rain 注:A.供试品;B.对照品;C.阴性对照 图1复方枣仁安神胶囊HPLC图谱 3.2对照品溶液的制备 精密称取阿魏酸对照品,加70%甲醇配成0.202mg/mL的 溶液,作为对照品储备溶液. 3.3供试品溶液的制备 称取本品内容物1g,加1%碳酸钠溶液5OmL,称重,超声 处理30min,放冷,再称定重量,用1%碳酸钠溶液补充减失的重 量,过滤,取续滤液25mL,用稀盐酸调pH2,3,用乙醚萃取2次, 每次2OmI|,合并乙醚液,蒸干,残渣加甲醇定容至25mIJ,摇 匀,0.45Llm微孔滤膜滤过,弃去初滤液,续滤液作为供试品溶液. 3.4阴性对照溶液的制备 根据处方组成,取除当归外的其余药材,按工艺要求制成 缺当归的阴性制剂.按"3.2"项下方法制得阴性对照溶液. 3.5线性范围的考察 分别精密吸取阿魏酸对照品溶液(浓度为0.202mg/mL) 0.5,1,2,3,5,1OmL置50mL量瓶中,用70%甲醇稀释置 刻度.分别进样1OL,按上述色谱条件测定阿魏酸峰面积. 以峰面积积分值为纵坐标,以阿魏酸浓度为横坐标绘制标准曲 线,求得回归方程:A=1.304×10一7.912,,=0.9998.由 方程可知,阿魏酸对照品在20.2~404.0ng之间呈良好的线性 关系. 3.6稳定性试验 取同一份供试品(批号20081217)溶液,每隔lh进样测定 1次,考察6h,测得阿魏酸峰面积,RSD=1.2%.表明供试品溶 液在5h内稳定,稳定性较好,能满足测定要求. 3.7精密度试验 取阿魏酸对照品溶液,重复进样测定6次,RSD=O.83%.相 对标准偏差小于1%,精密度较好. 3.8重复性试验 取同一批样品(批号20081217)6份,按"3.2"项下方法 平行制备供试品溶液,并测定阿魏酸含量,阿魏酸含量平均 值0.2t6mg/g,RSD=l_8%(月=6).表明该方法重复性良好. 3.9加样回收率试验 精密量取已知含量的复方枣仁安神胶囊样品6份(批号 20081217),分别精密加入阿魏酸0.202mg,按"3.2"项下方 法制备供试品溶液,进样20L,测定阿魏酸的含量,计算回收 率.结果平均回收率为99.12%,RSD=1.45%.见表1. 表1阿魏酸加样回收率测定结果(/7=5) 3.10样品含量测定 取样品3批,批号分别为20081217,20090304,20090622, 依法测得阿魏酸的含量分别为0.215,0.227,0.208mg/g. 4讨论 当归的薄层鉴别采用正己烷作为提取溶媒,以石油醚 (60~90?)一乙酸乙酯(9:1)为展开剂,结果斑点清晰,分离 度较好.远志的薄层鉴别采用2005年版《中华人民共和国药 典》的提取方法,以10%硫酸香草醛溶液作为显色剂,比10%的 硫酸乙醇溶液显色剂斑点更为清晰. 2010年7月第17卷第7期中国中医药信息杂志 ?制剂与工艺? 香附油一一环糊精包合物的制备及其理化性质研究 刘春海,刘西京,陈亮 (1.九芝堂股份有限公司,湖南长沙410007;2.深圳中药及天然药物研究中心,广东深圳518057) 摘要:目的制备香附油一p一环糊精(p-CO)包合物并考察其理化性质.方法采用正交试验法优选香附油一 p-CD包合物的制备工艺,采用薄层色谱法,红外光谱法及差示热分析法对包含物 进行物相鉴定,并对其粒径分布和 粉末形态进行考察.结果最佳包合条件为:p—CD与香附油比为8:1,包合温度为 50?,包合时间为3h;香附油 包合前后薄层斑点基本一致;香附油红外特征吸收峰在包合后消失;差示热分析显 示包合物与空白p—CD基本相似; 包合物粒径范围在4,150pm之间,电镜下呈现片状或块状结晶.结论按优选工艺, 香附油与p—CD形成稳定的包 合物,且包合完全,粒径分布均匀,粉末形态好. 关键词:香附油;D一环糊精包合物;理化性质 D0l:10.3969/J.iSsn.1005—5304.2010.07.024 中图分类号:R283.5文献标识码:A文章编号:1005—5304(2010)07—0059—03 PreparationofVolatileOilB-cyciodextrinInclusionComplexofRhizomaCyperiandStudyonIts PhysicochemicalPropertiesLIUChun— hai,LIUXi-jing,CHENLiangr.JiuzhitangCo.gtd,Changsha41000Z China2.ShenzhenTraditionalChineseMedicines&NaturalProductsResearchCente~Shenzhen518057,China) Abstract:ObjectiveTopreparethevolatileoil[3-CDinclusioncomplexofRhizomaCyperiandstudyits physicochemicalproperties.MethodsTheoptimumprocessingconditionsforprepartionvolatileoilof RhizomaCyperi—B— CDwasdeterminedbyorthogonaldesignmethod.Thephysicalproperties,theparticle diameterandappearanceoftheinclusionwereidentifiedandexaminedbyTLC,IR,DTA,laserparticlesize analyzerandscanningelectronmicroscope.ResultsTheoptimumpreparationconditionsforinclusionwere estabfishedasfollows:theproportionofD— CDandvolatileoilswas8:1,theinclusiontemperaturewasat 50?andtheinclusiontimewas3h.TheTLCspotsofB— CDclathrateinclathrationbeforeandafterwere similar.Afterinclusion,thefeatureabsorptionpeakofvolatileoilwasvanished.TheDTAofbl ankB—CD andB— CDclathrateweresimilar.Thediameterrangeofinclusionwas4--150m.Theelectronmicros copy presentedtheinclusionaslamellarorlump.ConclusionThecomplexpreparedundertheopti mized conditionisstableandhasinclusioncompletely,andtheinclusionspossessedauniformpartic lessize distributionandagoodappearance. Keywords:volatileoilofRhizomaCyperi;13-cyclodextrininclusion;physicochemicalpro perties 有学者曾采用薄层扫描法测定阿魏酸含量,但缺点是重复 性差,精密度低,测定结果不准确.我们选用HPLC法测定方 中阿魏酸的含量,以320nm为检测波长,以乙腈0.5%冰醋酸 (20:80)为流动相,结果分离效果较好. 在供试品溶液的制各中,曾采用0.5%碳酸钠溶液,1%碳酸 钠溶液,2%碳酸钠溶液,其含量测定的结果分别为0.193, 0.217,0.219mg/g,考虑到实际情况,我们采用1%碳酸钠溶液 作为提取溶媒. 提取方法的选择采用冷浸过夜,超声15min,超声30min, 超声45min,回流lh,回流2h,回流3h等7种不同的提取 方法进行比较,结果以回流3h提取所测的含量值最高,但回流 3h提取的供试品色谱图基线不稳,而超声30min的供试品的色 谱图基线平稳,阿魏酸的峰形也较好,分离度>1.5,操作也较为 简便,基线稳定,仅所测的含量值略低于回流3h提取所测的含量 值,故综合各因素,选择超声30min为供试品的提取方法. 本试验对远志,当归,黄连,木香进行了溥层鉴别研究, 对阿魏酸进行了含量控制,可对复方枣仁安神胶囊进行有效的 质量监控,为进一步研究提供依据. 参考文献: [1]国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)Es3.北京:化学工业出 版社,2005.108,42. [2]运委,孙仲葆,刘戎.高效液相色谱法测定当归苦参丸中阿魏酸的含 量[J].中国医院药学杂志,2007,27(1O):1477—1478. [3]许英爱,金瑛.薄层扫描法测定逍遥丸中阿魏酸的含量[J].药学实践 杂志,2001,19(3):166一I67. (收稿日期:2009—09—28,编辑:陈静)