切片制作方法
LB 氯化钠0.5 蛋白胨1 酵母0.5 琼脂1.4
病例切片:
1. 取材，固定
取材---苦味酸固定12h---修改---换固定夜12h---修块---固定6-8h---流水冲洗过夜
小于24h
2.脱水
70%新酒精 2h
80%或85%旧酒精 12h左右 可停
90%新酒精 2h
95%新酒精 0.5h
100%新酒精 3次 0.5h
3.透明
二甲苯新 10-50min 10min一次换液 第二次10min直接取
观察透明即可取出
4.淋蜡
软蜡 3h 52度 可停
液蜡 30min 60度
包埋
5.染色
二甲苯脱蜡 1 2 3 至少20min 复水 100酒精 1 2 3 10min一次 95% 90% 80% 70%酒精10min一次，滴干 苏木精10min
入盆，自来水淋洗3次，入0.5-1.0%的HCLL淋1-2次，自来水清洗
入1的氨水下淋1-2次，自来水淋洗3次，滴干 70% 80% 90%酒精 10min一次
醇伊红 7-10min
95%酒精洗样复色
100%酒精 1 2 3
二甲苯透明 1 2 3 4，0.5-1h，第4次可大于1h 制片，注明标签
6.药品，器具的准备
玻片:新玻片---清洗液(硫酸，高锰酸钾)浸泡24h以上---自来水冲洗干净---95酒精浸泡24h以上---擦干，备用
蜡: 软蜡 46-48度 48-52度 硬蜡 58-62度
反复熬制，加热，快速冷却，5次以上
酒精 二甲苯 木墩 包埋框
蛋白甘油(现配现用):取蛋清充分搅拌20min以上与甘油1:1混合，纱布过滤，4度保存
苏木精:1液:苏木精1g乘2 无水酒精10ml乘2
2液:钾铵明矾20g乘2 蒸馏水200ml乘2
先将1用玻璃棒使苏木精溶解，再将2煮沸溶化去水，再加入1，再去水，即加入氯化汞约0.5g，再煮沸，迅速冷却后加入冰乙酸8ml，过滤使用 醇伊红:95酒精配成1%伊红溶液
1%氨水 0.5-1%HCL
注意事项:
切片4-5nm，玻片干净，不能有纤维
样品太多时，入硬蜡时要有梯度
染色时，切片前中后各一张
酒精脱水时可在80-85%中过夜
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