牛冷冻精液

牛冷冻精液 ICS 65(020(30 B 43 a亘 中华人民共和国国家标准 4143—2008 GB 41431984 代替GB,T 牛冷冻精液 Frozen bovine semen 2009—0卜01实施2008-06-27发布 中华人民共和国国家质量监督检验检疫总局岩赢 中国国家标准化管理委员会厘1” GB 4143—2008 目 次 V前言 ??? ?? 11范围 ?? ?? 1 ? 2规范性引用文件 l3术语和定义 ? ?? 14要求 14(1种公牛 24(2新鲜精液 一 24(3冻精外观 ? 24(4剂型、剂量?? ?? 24(5每剂量冻精解冻后 ? 24(5(1精子活力 ?? ?? 24(5(2前进运动精子数 ? 24(5(3精子畸形率 ? 2 ? 4，5(4细菌数 25抽样 ??? ? 25(1抽样检验 方案 气瓶 现场处置方案 .pdf气瓶 现场处置方案 .doc见习基地管理方案.doc关于群访事件的化解方案建筑工地扬尘治理专项方案下载 ????? -- 2 ? 5(1(1生产方抽样检验 25(1(2质量监督抽样检验 ? 2513?? -- (，复检和仲裁抽样检验 25(2抽样方法 ? 2 ? 6试验方法 26(1外观 ?? ?? 26(2剂量 ? 2 ? 6(3解冻后每剂量精液 26(4检验分类 ? 2 ? 6(4(1常规检验 26(4(2型式检验 ? 36(5检验项目 ??? - 36(5(1常规检验 ?? -- 36(5(2型式检验 ??? ? 37判定规则 - 37(1常规检验 ? 37(2型式检验 ? 3 7(3抽样检验对群体质量水平的评定 37(3(1生产方抽样检验 ???? 37(3(2质量监督抽样检验 ???? 38标志、包装 ? ?? ? 38(1标志 ? ? ?? GB 4143—2008 3 8(1(1品种 38(1(2 内容 ?? ? 38(2包装 ?? ? ? 一 4附录A(规范性附录) 群体公牛冻精质量监督抽样检验程序 4A(1导言 ??? ??? ?? ? 4A(2质量监督抽样检验程序 ???? ? ? 4A(2(1确定监督总体 ???? ?? 4 ?? ? A(2(2确定冻精产品的质量特性 4A(2(3不合格品的分类? ?? 4A(z(4规定监督质量水平 ? ? ? ? ?? 4 A，z(5规定监督检验等级 ???? 一 4A(2(6检索监督抽样方案 ??? 4A(2(7抽取样本 ? ? ? 4A(2(8检验样本 ??? 4 A(2(9判断监督总体该群体公牛(冻精)是否可通过 4 A，2(10应用实例 4A(2(1l监督抽样方案的通过概率与检验功效 5 附录B(规范性附录)牛冷冻精液质量检验方法 5B(1抽样 ? ? ?? - 5B(1(1样品的收集 ?? ? 5B(1(2抽样方案 ? ?? 5B(1(2(1生产方抽样检验 5B，1(2(2质量监督抽样检验? ??- ? 5B，1(2(3抽样方法 5B(1(2(4全部取样 ? ?? 5B(1(3取样方法 ? ?? 5B(1(4样品的保存 ? ?? 5B(2剂量检查 ????- ? 5B(2(1主要器材 ? ?? 5B(2(2检查方法 ? ?? 5B(2(3计算 ? ? ? 6B(3精子活力检查 ? ?? ? 6B(3(1主要器材 ?? ?? 6B(3(2检查方法 ?? ???- 6B(3(3计算? ? ?一 6B(4每剂量前进运动精子数检查 一 6B(4(1主要器材 ? 6B(4(2检查方法 ? 6B(4(3计算 ??? ? 6B(5精子畸形率的检查 ??? ? ? ?? 6B(5(1主要器材 ??? ?? ?? 7B(5(2试剂配制 ???? ? ?? 7B(5(3制片、染色、镜检、计算 ? ? GB 4143—2008 8B(6细菌数的检查 ? ?一 8B(6(1主要器材 ??? ???? (- 8B(6(2培养基的配制 ? ? ? 8B(6(3检查方法 ??? 8B(6(4计算 ? ? ? 9附录c(规范性附录) 种公牛的品种代号 9C(1导言 ???? ?? 9C(2原则和方法 9C(3种公牛品种代号 ? GB 4143—2008 刖 罱 本标准中第4章是强制性的，其余为推荐性。 本标准与GB,T 4143--1984相比主要变化如下: ——增加了适用对象(1984年版的引言;本版的第1章第2段); ——增加了规范性引用文件(见第2章); ——增加了术语和定义，并有中、英文对照(见第3章); ——增加了抽样(见第5章); ——增加了试验方法(见第6章); ——增加了判定规则(见第7章); ——修改了规格与质量(1984年版的第1章;本版的第4章); ——修改了检查方法(1984年版的第3章;本版的附录B); ——修改了种公牛品种代号(1984年版的5(2(2;本版的附录c); ——删除了牛冷冻精液的制作程序和使用方法(1984年版的第2章和第4章); ——增加了规范性附录“群体公牛冻精质量监督抽样检验程序”(见5(1(2和附录A); 15239 ——增加引用了GB,T 1994({孤立批计数抽样检验程序及抽样表》，对于其中Ac——合格 判定数，Re——不合格判定数的表述，现引用GB,T 2828(1—2003《计数抽样检验程序第 l 部分:按接收质量限(AQL)检索的逐批检验抽样 计划 项目进度计划表范例计划下载计划下载计划下载课程教学计划下载 》中的表述，Ac——接收数，Re——拒 收 数，d一一样本中的不合格数(见5(1(1和7(3(1)。 本标准的附录A、附录B和附录C均为规范性附录。 本标准由中华人民共和国农业部提出。 本标准由全国畜牧业标准化技术委员会归口。 本标准起草单 ix,(南京)、全国畜牧兽医总站、农业部牛 位:农业部牛冷冻精液质量监督检验测试中一 冷冻精液质量监督检验测试中一iX,(北京)。 本标准主要起草人:金穗华、徐桂芳、陆汉 本标准委托农业部牛冷冻精液质量监督检希、张晓霞、刘长春、黄文佳、刘桂霞。 ix,(南京)负责解释。 验测试中一 V GB 4143—2008 牛冷冻精液 1范围 本标准规定了牛冷冻精液的命名、技术要求、抽样、试验方法、判定规则和标志及包装。 本标准适用于各品种牛的冷冻精液产品，以下简称冻精。 2规范性引用文件 下列文件中的条款通过本标准的引用而成为本标准的条款。凡是注日期的引用文件，其随后所有 的修改单(不包括勘误的内容)或修订版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成 协议 离婚协议模板下载合伙人协议 下载渠道分销协议免费下载敬业协议下载授课协议下载 的各方研究 是否可使用这些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。 2828(1 GB,T 2003计数抽样检验程序第1部分:按接收质量限(AOL)检索的逐批检验抽 :， 2859—11999IDT)计划(ISO 样 4789(2—2003食品卫生微生物学检验菌落总数测定GB,T 5458 GB,T 1997液氮生物容器 15239 GB,T 1994孤立批计数抽样检验程序及抽样表 15482 GB,T 1995产品质量监督小总体计数一次抽样检验程序及抽样表 3术语和定义 下列术语和定义适用于本标准。 3(1 motility前进运动精子数progressive 每剂量精液中呈前进运动的精子数。 3(2 motility 精子活力sperm 在37?环境下前进运动精子占总精子数的百分率。 3(3 精子畸形率abnormal sperm percentage 畸形精子占总精子数的百分率。 3(4 count细菌数bacteria 每剂量精液经培养后观察到的细菌菌落数。 3(5 semenfrozen 冷冻精液 经特殊方法处理的精液超低温冷冻后在液氮中(一196?)长期保存。 4要求 41 应具有种用价值，外貌评价为特等或一等，体质健康，无遗传病，不允许有已发布的动物防(种公牛 疫法中所 明确的二类疫病中的任何一种病。 1 GB 4143—2008 4(2新鲜精液 色泽乳白色或淡黄色。精子活力?65,，精子密度?6X108个,mL，精子畸形 ?15,。 率 4(3冻精外观 细管无裂痕，两端 封口严密。 4(4剂型、剂量 细管冻精:微型?0(18 mL;中型?o(40 mL。 45 (每剂量冻精解冻后 4(5(1精子活力 ?35,(即?o(35)，水牛?30,(即?O(30)。 4(5(2前进运动精子数 ?800万个，水牛?1 000万个。 4(5(3精子畸形率 ?18,，水牛?20,。 4(5(4细菌数 ?800个。 5抽样 5(1抽样检验方案 5(1(1生产方抽样检验 15239生产方和使用方为质量保证概率把关，按照GB,T 1994中的第5章，采用LQ一8(0、模 A抽样方案检索一次抽样方案，确定抽样公牛样本量。式 5(1(2质量监督抽样检验 质量监督抽样检验按照GB,T 15482--1995中的第5章，该群体公牛为一监督总体，采用Do=10， 选用第二检验等级的抽样方案，确定抽检公牛的样本量，抽样检验程序见附录A。 5(1(3复检和仲裁抽样检验 复检可根据原抽样方案确定，仲裁需抽检按照5(1(2规 7(3(2评定。 定的方案和 抽样方法见B(1(2(35(2抽样方法 和B(1(3。 6试验方法 6(1外观 用目测法，其结果应符合4(3的 规定。 6(2剂量 检验按第B(2章的方法，其结果应符合4(4的规定。 6(3解冻后每剂量精液 解冻方法及精子活力、前进运动精子数、精子畸形率、细菌数的检验按照第 B(3章,第B(6章规定 的方法，其结果应分别符合4(5(1、4(5(2、4(5(3、4(5(4的规定。 6(4检验分类 6(4(1常规检验 对冻精的单项目检验是型式检验的一部分，主要是在生产批入库前和销出 站时的检验。 6(4(2型式检验 对冻精全部项目检验，评定产品质量是否全面符合标准，也是在生产方抽样检验、仲 裁和质量监督 抽样检验时选定项的检验。 2 GB 4143—2008 6(5检验项目 6(5(1常规检验 本标准中4(3和 4(5(1规定。 6(5(2型式检验 本标准中4(3,4(5规定。 7判定规则 71 样品中任何一项目检验未达到本标准中要求的规定，则判(常规检验 为不合格。 7(2型式检验 样品中任何一项目检验未达到本标准中要求的规定，则判 为不合格。 7(3抽样检验对群体质量水平的评定 7(3(1生产方抽样检验 2828(1—2003第3章中Ac——接收数，Re——拒收数，d——不合格品数。 引用GB,T 15239 1994中5(11的规定，通过对样本检验，若样本中不合格品数生产方抽样检验按照GB,T d?Ac，则判可接收，样本中不合格品数d?Re，则判不可接收。 7(3(2质量监督抽样检验 按照GB,T 15482--1995中的规定，在样本中d 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 纯。 2008 B(5(2试剂配制 a)磷酸盐缓冲液 磷酸二氢钠 (NaHzPOt?2HzO)0(55 g 2(25 磷酸氢二钠(Na2HP04?12H20) g mL。双蒸馏水定容至100 b) 中性福尔马林固定液 40,甲醛HcHO(使用前经碳酸镁中和过滤)8(0 mL 磷酸二氢钠(NaH。 PO?2H20)055 磷酸氢二钠(Na:。(g 2(25 HPO。?12Hz0)g mL 中和后的甲醛，再加0(89,氯化钠溶液定容至用0(89,氯化钠约50(0 mL溶解后加入8(0 100(0 mL。 c)姬姆萨原液 1(0 姬姆萨染料 甘g 66(0 [c。H。(oH)3] 油 66(0 mL 甲醇(CH30H) mL 姬姆萨染料放人研钵中加少量甘油充分研磨至无颗粒为止，然后将甘油全部倒入并放人恒温箱中 保温继续溶解4 h，再加甲醇充分溶解混匀，过滤后贮于棕色瓶中待用，贮存时间越久染色效果越好。 d)姬姆萨染液 2(0mL 磷酸盐缓冲液 姬姆萨原液 3(0mL 蒸馏水 现配现用。 B(5(3制片、 染色、镜检、计算 精液解冻见B(3，允许同时使用精子活力检查解冻的样品。 a)抹片:取解冻后精液一滴滴于载玻片一端，用另一边缘光滑的载玻片与有样品的载玻片呈35。 min)，每样品制作两个抹片。夹角，将样品均匀地拖布于载玻片上，自然风干(约5 mL,2(0 b) mL中性福尔马林固定液，固定15 min后用清水固定:在已风干的抹片上滴上1(0 缓缓冲去固定液，吹干或自然风干。 c)染色:将固定好后的抹片反扣在带有平槽的有机玻璃面上，把姬姆萨染液滴于槽和抹片之间， 让其充满平槽并使抹片接触染液，染色1(5 h后用清水缓缓冲去染液，晾干待检。 d)镜检:将制备好的抹片在显微镜(400倍,600倍)下观察，每个抹片观察200个以上的精子 (分左，右两个区)，取两片的平均值，两片的变异系数不得大于20,，若超过应重新制片。 e)精子畸形率按式(B(4)计算: (B(4)A一鲁×100 式中: A——精子畸形率，,; A—— 。畸形精子数，单位为个; s——精子总数，单位为个。 4143—GB 2008 B(6细菌数的检查 B(6(1主要器材 培养箱、超净化工作台、三角烧瓶、烧杯、量筒、玻棒、天平、牛角匙、高压蒸汽灭菌锅(或微波炉)、培 pH(pH559o) 养皿、水浴箱、试纸(,(、棉花、牛皮纸、记号笔、棉绳、纱布、放大镜、牛肉浸膏、蛋白胨、磷酸氢二钾、氯化钠、琼脂粉、1 mol,L氢氧化钠、1 mol,L盐酸、蒸馏水。 B(6(2培养基的配制 普通琼脂的制作: 5(0 牛肉浸膏 g 10(0 蛋白胨 g 1(0 磷酸氢二钾(K。HPO。?3H:0) g 5(0 氯化钠(NaCl) g 000 用蒸馏水1 mL溶解后加琼脂粉20 g，加温融解。 MPa，20 min)。矫正pH至7(4,7(6并用脱脂棉过滤，分装于三角烧瓶中经高压灭菌(o(1 4789(2 也可使用营养琼脂培养基，其质量应符合GB,T 2003。 B(6(3检查方法 灭菌平皿事先标号。细管冻精37?水浴解冻，用酒精棉球消毒以无菌操作，一支直 接注于一个灭 菌平皿内;把已凉至50?左右的普通琼脂以无菌操作倾倒入平皿内，每皿约15 mL，并转动平皿使精液 h取出，计数平皿 混合均匀，同时做空白对照平皿。待琼脂凝固后翻转平皿，置37?恒温箱内培养48 内菌落数。每头公牛样品取两支做两个平皿，取平均值。 B(6(4计算 所检细管样品的细菌数按式 (B(5)计算: B一半 式中: B——细菌数，单位为个; n-——第一平皿菌落数，单位为个; n:——第二平皿菌落数，单位为个。 GB 4143—2008 (规范附录c ) 种公牛的性附录 品种代号 c(1导言 本附录给出了最简称的公牛品种 代号。 C(2原则和方法 以牛品种英译汉的汉语名称第一和第二个字的汉语拼音的第一字母组合，涉及国家为多字的，以该 国的第一字、第二宇和品种第一字的汉语拼音的第一字母组合。 示例1:荷斯坦牛的品种代号以“荷”和“斯”两字汉语拼音第一字母组合为HS。 示例2:“丹麦红牛”以国家第一字、第二字和品种第一字的汉语“丹麦”和“红”的拼音第一字组合为“DMH”。 c(3种公牛品种代号 见表C(1。 表c(1种公牛品种代号 公牛品种 品种代号 公牛品种 品种代号 HS PM 荷斯坦牛 婆罗门 SX DMH 丹麦红牛 沙西瓦 PA娟珊牛 JS 皮埃蒙特 一 XM NY南阳牛 西门达尔 CH JD 秦川牛 QC 草原红牛 兼用短角 YB XH LX 延边牛 新疆褐牛 鲁西黄牛 三 SH 晋南牛 JN河牛 RD FZ XL 肉用短角 复州牛 夏洛来 ML HF NL摩拉水牛 海福特 尼里,拉菲 AG JH 安格斯 金黄阿奎丹 LM BL 利木赞 比利时兰 MH ND 奠累灰 南德丈 KH抗旱王 德国黄牛 DGH XD 辛地红 蒙贝 MB 楼来恩 LL利亚 9