碱性磷酸酶测定试剂
培训
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材料 天冬氨酸氨基转移酶测定试剂盒培训材料 一 初级部分:(原理、临床意义、规格) 天冬氨酸氨基转移酶(英文名称:Aspartate Aminotransferase)简称AST,本公司生产的天冬氨酸氨基转移酶试剂采用的是IFCC推荐的连续监测法。 临床意义: 天冬氨酸氨基转移酶的测定是医院临床检测人体生化肝功能的主要项目,也是肝炎诊断的重要指标之一,天冬氨酸氨基转移酶的测定对肝脏疾病诊断具有重要的意义。 原理: 本法是以IFCC推荐法为基础。反应原理为: L-天冬氨酸 + α-酮戊二酸 草酰乙酸 + L-谷氨酸 草酰乙酸 + NADH + H+ L-苹果酸 + NAD+ + H2O 上述偶联反应中,NADH的氧化速率与标本中酶活性呈正比,在340nm波长处,NADH呈现特征性吸收峰,而NAD则没有。因此,可在340nm监测吸光度的下降速率(-Δ/min),计算出AST的活性单位。 包装规格及适用仪器: 类型 货号 规格 适用仪器 通用单试剂 AS10911 20ml×5 适用于半自动和全自动生化
分析
定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析
仪 AS10912 75ml×4 日立专用包装 AS10920 R1 60ml×4 R2 60ml×2 日立7170、7080、7180、7600、Olympus AS10930 R1 50ml×4 R2 50ml×2 日立7020 AS10940 R1 80ml×2 R2 40ml×2 日立7060、7150、岛津、Abott2000 贝克曼 (封闭通道) AS10950 200test×2 贝克曼CX系列生化仪 东芝 AS10960 R1 50ml×4 R2 50ml×2 东芝30FR/40FR 二中级部分:(试剂特性、测定参数、常见问题解答) 易出现的问题及解答: 测定参数: 手工法参数: 反应温度 37℃ 反应主波长 340nm 反应副波长 405nm R1∶R2 2∶1 试剂量∶样本量 15∶1 延迟时间 1min 读数时间 1min 比色杯光径 1.0cm 日立7020、7080参数: 双试剂: 主波长 340nm 副波长 405nm R1 200μl R2 100μl 样品量 20μl 测定方法 速率A 反应时间 10min 第一测光点 21 最后一测光点 30 反应方向 下降反应 单试剂: 主波长 340nm 副波长 405nm 试剂量 225μl 样品量 15μl 测定方法 速率A 反应时间 10min 第一测光点 5 最后一测光点 11 反应方向 下降反应 结果计算: ΔA/min=A2-A1 ALP(U/L)= = ΔA/min×K A1 = 第一测光点的吸光度 A2 = 最后一测光点的吸光度 TV= 总反应体积(ml) SV= 样品体积(ml) 6.22= 340nm处NADH毫摩尔消光系数 P= 比色杯光径 理论因子数K=2572 由于各厂家AST试剂配方有所不同,因此在第一次使用时,请先用
标准
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品进行定标,以定标得出的实际因子数K为准。 质量控制: 为保证测试结果可靠,每批样品测试时,同时测定质控血清。 标本的收集与处理: 血清或用EDTA、肝素抗凝的血浆均不应溶血。AST在4℃下至少可稳定7天。 储存血清AST的活性会缓慢增高,建议采血当天测定AST活力。 试剂组成 NADH 0.28mmol/L EDTA 4.0mmol/L L-天冬氨酸 260mmol/L 乳酸脱氢酶 3.0KU/L a-酮戊二酸 14mmol/L MDH 1.0KU/L Tris 100mmol/L 参考值: 温度 37℃(U/L) 37℃(μkat/L)) 女性 0~25 0~0.42 男性 0~30 0~0.50 各实验室应确定自己的正常值参考范围。 主要技术参数: 1. 线性范围:0~1500U/L,r2≥0.990(双试剂) 0~550U/L,r2≥0.990(单试剂) 2. 批内精密度:CV≤5% 3. 批间精密度:CV≤5% 4. 准确度:不准确度≤10% 注:上述指标在日立7020、7080上通过第三方检测。 注意事项: 1.单试剂和双试剂都可直接使用。也可将双试剂的试剂一与试剂二以2:1混合成单试剂在2℃-8℃至少可稳定一周。 2.试剂与样本用量,可根据不同仪器要求按比例改变。新的仪器需要进行技术参数的验证,我公司备有多种仪器的上机参数供参考。 3.当ΔA/min大于0.29时,用生理盐水稀释样品后再测试,结果乘以稀释倍数。 4.浓度换算为U/L×16.67×10-3 =μkat/L。 5.如发现试剂空白吸光度值小于1.0或试剂变混浊,请勿使用。 6.未开启试剂2℃-8℃避光密封条件下保存有效期为12个月;已开启的试剂,如未用完,应在2℃-8℃下保存,请尽快用完。 7.使用血清或肝素化血浆。 8.避免溶血,黄疸,脂血,乳糜血样本。 9.2℃-8℃避光存放,勿冰冻。 10.不可入口,若误服请尽快就医。 产品特征: 1.稳定的液体试剂 2.能有效的消除轻度溶血、脂血。 3.测量范围宽,可达0~1500U/L,r2≥0.995(双试剂) ,0~550U/L,r2≥0.995(单试剂) 4.准确度达到96%以上 5.批内精密度小于5% 6.使用特殊稳定剂,达到较强的稳定性 常见问题分析: 1. 临床测试标本血清不应溶血、黄疸,血浆不能使用草酸盐、柠檬酸盐、和EDTA-Na2做抗凝剂否则会导致测试结果偏低。 2. 在血样采集时,餐后血样由于有多种成分存在,特别是高脂、红细胞增多,导致血样混浊,AST的测定结果偏高。因此检测AST时,最好空腹血样。 3. 严重脂血、黄疸或溶血血清能使AST检测结果偏高。 4. 血清不宜反复冰冻保存,以免影响酶的活性。导致AST检测偏低。 5. 正常新生儿AST水平比成年人约高2倍,出生后约3个月降至成年人水平。新生儿,尤其未成熟儿,肝细胞膜通透性较大,AST从肝细胞渗入血浆,使血清AST水平升高。 6. 在温度逐渐升高时AST会逐渐上升(特别在夏天),应考虑是否血清样本存放时间过长。 7. 有些病人使用的某些药物也会使AST增高。