常用过敏原检测方法的探讨_张升

常用过敏原检测 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 的探讨_张升 October1，2011，Vol．5，No．19（）201110519ChinJClinicians（ElectronicEdition），·5753· ·综述· 常用过敏原检测方法的探讨 张升朱威 ［1］，又称变态反应，是指机体通过各种途径接受某种抗原刺激并产生初次应答后，再次接触相同变应原刺激时， 发生的组织或器官甚至全身性的强烈反应，从而引起各式各样的生理功能紊乱或特定组织损伤为主的特异性免疫应答。过敏反应1963年，Cooms和Gell依超敏反应发生机制及临床特点将其分为4型，即Ⅰ型（速发型）、Ⅱ（细胞毒型或细胞溶解型）、Ⅲ（免 Ⅳ（迟发型）。其中与过敏性疾病相关的变态反应主要是Ⅰ型变态反应，也包括Ⅳ型变态反应。根疫复合物型或血管炎型）、 据变应原进入人体的途径可以将变应原分为：（1）食入性变应原，如动物蛋白食物（包括牛奶、鸡蛋、鱼、虾、蟹、牛羊肉等），油料作物及坚果类（包括芝麻、花生、核桃、腰果等），水果及蔬菜类（包括桃、梨、苹果、荔枝等），谷类（包括小麦、玉米、荞麦等），食物添加剂（以食用色素、防腐剂为主）；（2）吸入性变应原，如花粉、屋尘、粉尘、真菌、螨、动物毛屑等；（3）药物变应原，如磺 青霉素类、麻醉剂、生物制剂等；（4）接触物变应原，如染发剂的主要成分对苯二胺、金属饰物的成分硫酸镍、汞制剂、塑胺类、 料及橡胶制品、化妆品中的香精及香料等；（5）职业性变应原：制造泡沫塑料、黏合剂、制漆等行业的苯甲二异氰酸酯，塑料行业的增塑剂成分邻苯二甲酸酐，制药行业的乙二胺，有色金素冶炼行业的铂盐。 一、过敏性疾病的特异性诊断 过敏性疾病的诊断包括非特异性诊断和特异性诊断：非特异性诊断即常规的疾病诊断；而特异性诊断是病因诊断，即明确致敏变应原。过敏性疾病特异性诊断的方法包括体内检测方法和体外检测方法：将过敏原（变应原）以注入、吸入、食入或 即无需过敏原进入患者机体的检测方法接触等途径进入患者机体的检测方法称为体内检测方法；而将用血清或分泌物检测， ［2］称为体外检测方法。体内检测方法主要包括皮肤点刺试验、斑贴试验和激发试验三种。体外检测方法一般检测的是血清 ［3］sIgE）和IgG。IgE是Ⅰ型变态反应的主要抗体，78%的患中的IgE、特异性IgE（specificIgE，资料显示在变态反应性疾病中， 而非变态反应性疾病中84%低于25kU/L。但IgE升高还可见于其他疾病如寄生虫感染、肝脏疾病等。者IgE高于110kU/L， CAP系统、Mediwiss敏筛定量检测系统、特定的sIgE只能与特定的过敏原特异性结合。体外检测方法主要包括Uni-食物过敏 CAP和敏筛定量检测系统最有代表性。原IgG抗体检测和嗜酸粒细胞阳离子蛋白的测定，其中以Uni- 二、体内检测方法 1.皮肤点刺试验（skinpricktest，SPT）：SPT检测方法是先将点刺液滴注在皮试处，点刺部位一般选择前臂曲侧，然后用电磁针穿入滴液，刺入皮肤，观察可能的风团和红晕反应。操作方法比较简单，对皮肤的刺激比较轻。以磷酸组胺作为阳性对照，通过与阳性对照相比判断反应程度。具体分级 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 为：（－）：无风团反应；（+）：风团反应为阳性对照的1/3；（++）：风团反应为阳性对照的2/3；（+++）：风团反应与阳性对照相同；（++++）：风团反应大于阳性对照。 SPT常用作检测吸入性过敏原，对于过敏性鼻炎患者，且被认为是检测吸入性过敏原引起的过敏反应的首选检测方法并 ［4］SPT的敏感性并不高。王玥等［5］对908例哮喘儿童进行皮成为过敏性疾病的主要的诊断工具。而在食物过敏原检测方面， 肤点刺试验研究，结果表明阳性率为77.4%，吸入过敏原总阳性率为76.9%，其中以粉尘螨和屋尘螨最高，食物过敏原总阳性率为37.2%。Chung等 性为21.4%。［6］对101例特应性皮炎患者进行食物过敏原检测研究，结果显示牛奶的敏感性为35.5%，鸡蛋的敏感 点刺试验并非绝对安全的体内检测方法，若已知患者对某种物质高度过敏，则不宜再做试验；同时身体虚弱、哮喘发作期以及不合作的儿童也不宜做点刺试验。若出现严重的过敏反应如过敏性休克，则应立即给患者抗休克的治疗。 2.斑贴试验（patchtest）：斑贴试验是诊断接触性皮炎（contactdermatitis）最可靠和最简单的方法，由JosefJadassonhn于1895年在奥地利Graz城的德国皮肤科学会上，向全世界首次系统地报告了有关斑贴试验的研究结果，使斑贴试验确立为研究接触性皮炎的可靠实验手段。到20世纪60年代，斑贴试验不仅作为科研工具，在临床工作中也开始广泛应用，并得到迅速发展。 斑贴试验适用于：（1）皮肤湿疹样改变，怀疑或有待排除接触性过敏原；（2）皮肤湿疹样改变，对预期治疗的疗效不好； （3）慢性手足湿疹；（4）持续性或间断性面部、眼睑、耳部和会阴部湿疹。对于非Ⅳ型变态反应性皮肤病（如荨麻疹、脂溢性皮 ［7］炎、痤疮等）患者进行斑贴试验来寻找其致病原，并不符合斑贴试验的反应机制。 斑贴试验的检测原理是将受试抗原置于斑试器上，贴于患者前臂或背部。依据国际接触性皮炎研究组（ICDRG）的标准 （？）可疑：仅轻度红斑；（+）阳性：红斑、浸润，可有小丘疹；（++）强阳性：红斑，浸润、丘疹、小水疱；（+++）极强判读结果， DOI：10．3877/cma．j．issn．1674-0785．2011．19．043 作者单位：100053北京，首都医科大学宣武医院皮肤病与性病科 Email：zhuwei@xwh．ccmu．edu．cn通讯作者：朱威， ·5754·October1，2011，Vol．5，No．19（）201110519ChinJClinicians（ElectronicEdition）， 阳性：红斑、浸润，大水疱；（－）阴性：无反应。阳性反应说明患者对受试物过敏，反应越强，说明对该物质敏感性越高，越需要注意预防。但是需要注意排除原发性刺激或其他因素所致的假阳性反应，假阳性反应一旦将受试物除去，皮肤反应48h逐渐减弱；而真正的阳性反应可持续4d或更长，从第二天到第四天反应逐渐加强，以后消退。 ［8］国内朱国兴等报道慢性湿疹和皮炎122例斑贴试验结果 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 ，显示0.1%硫柳汞位居致敏原首位，其次是5%硫酸镍。 而Acar等对56例仅表现为外耳道瘙痒的女性患者进行斑贴试验，结果表明24例患者至少有一项出现阳性反应，其中阳性 45例过敏性接触性皮炎患者中最常见的过敏原是镍和烷基酰胺类均占23.3%，率最高的为硫酸镍。同时国外也有研究报道，［9］ ［10］。其中烷基酰胺类作为一种表面活性剂常用于个人日常护肤理中，其次秘鲁香树占18.6%新霉素占16.3%如洗发香波、 ［11］隐形眼镜护理液、牙膏、卸妆液、洗手液等。斑贴试验同时还是诊断化妆品过敏的主要依据。 3.激发试验［1］：激发试验是模拟变应原进入体内的自然过程，引起发病，严格意义上讲，皮肤点刺试验和斑贴试验也属 它们最大区别的在于试验的部位不同，皮肤点刺试验和斑贴试验是在皮肤上做的，而激发试验是在靶器于激发试验的范畴， 官上做的。变应原激发试验可以分为支气管激发试验、鼻黏膜激发试验、现场激发试验、食物和药物激发试验等，所有的变应原激发试验均有一定的风险，应经患者同意后方可进行，患有严重过敏性疾病的患者如哮喘、休克不宜做此试验。 三、体外检测方法 1.Uni-CAP系统：Uni-CAP系统的灵敏度和特应性较高，目前临床中应用较为广泛。可以用于支气管哮喘、过敏性鼻炎、特应性皮炎等特异性IgE的检测。 Uni-CAP系统的原理是以放射过敏原吸附试验（radioallegrosorbenttest，RAST）为原理发展而来的荧光酶联免疫法。该系 后者是装在小胶囊中的亲水性载体聚合物，由活化的纤维素衍生物合统将变应原吸附在一种称作immunoCAP的新型固体上， 成，与变应原有极高的结合能力。CAP系统具有优良的反应条件和较短的扩散距离。 ［12］王瑞琦等对1008例明确诊断为尘螨、蒿属花粉、葎草花粉、猫毛屑或链格孢霉5种过敏原过敏者用CAP过敏原检测系 统进行相应的过敏原特异性IgE检测，并随机选取部分临床明确诊断对上述5种过敏原不过敏者同时进行相应过敏原IgE检测，分析CAP系统检测的准确性并计算阳性预测值和阴性预测值。研究结果显示上述5种过敏原的灵敏度分别为99.0%、97.9%、91.7%、93.5%、85.5%，95.8%、93.0%、97.0%、91.7%。特异性IgE检测结果与临床诊断之间特异性分别为96.2%、 CAP100检测法和生物共振检测法对28的符合率较高，阳性预测值均＞94%，阴性预测值均＞80%。李国华等分别用Uni- CAP100检测法过敏原检出率分别为71.43%和21.43%，例过敏性疾病患者血清学检测比较，结果表明生物共振法及Uni-两 者一致性较差（P＜0.01），生物共振检测法不太适合在临床中应用。 2.Mediwiss敏筛定量过敏原检测系统：Mediwiss敏筛过敏原定量检测系统是采用免疫印迹方法，CAP系检测原理与Uni- 定量测定患者血清中的sIgE的水平。统类似， Jiang等［14］对216例中国北方过敏性鼻炎患者血清中屋尘螨、艾属植物和豚草属3种过敏原研究分析，以SPT的检测结 CAP系统和Mediwiss敏筛定量过敏原检测系统的诊断指标（如准确率、果作为参考标准，比较immunoUni-敏感性、特异性）的 immunoUni-CAP系统的敏感性更高（P＜0.01），差异，研究结果表明与SPT相比这两系统的准确率相似，而Mediwiss敏筛定量 过敏原检测系统的特异性更高（P＜0.01）。也有研究报道CAP系统的敏感性、特异性和准确率比Mediwiss敏筛定量过敏原检测系统高［15］［13］。 ［16］倪慧萍等对73例年龄段为3～12岁的不同严重程度的哮喘患儿血清过敏原特异性IgE抗体检测，研究结果表明屋尘 和户尘螨是3岁以上儿童哮喘发作的主要诱因，支气管哮喘患儿的哮喘严重程度与其血IgE水平的高低呈正相关，且对多种抗原表现特异性IgE阳性者往往病情较重。 3.食物过敏原IgG抗体检测：随着人们饮食结构的改变和食品中添加剂的多样化，食物过敏和食物不耐受受到医学界越来越多的关注。食物不耐受是一种复杂的变态反应性疾病，它的发生是免疫系统把进入人体内的某种或多种食物当成有害 IgG抗体与食物颗粒形成免疫复合物，物质，从而针对这些物质产生过度的保护性免疫反应，产生食物特异性IgG抗体，可能 引起所有组织发生炎性反应，并表现为全身各系统的症状与疾病［17］。 检测原理是患者血清中的特异性抗体与特异性食物过敏原反应，然后加入酶标记的抗体结合液，形成过敏原-抗体复合再加入偶联酶的生色底物，发生显色反应。测定反应产物的吸光度值，根据吸光度值计算出患者血清IgG抗体浓度。物， ［18］有研究报道900例湿疹和慢性荨麻疹患者血清食物过敏原的IgG检测结果以鸡蛋、小麦、虾的致敏性较高，阳性率分 40.2%、34.9%。同时随访观察325例患者20d、60d后病情改善情况，70.8%。别为56.2%、有效率分别为62.8%、 4.嗜酸粒细胞阳离子蛋白（eosinophilcationicprotein，ECP）的测定：ECP是嗜酸粒细胞（EOS）释放的毒性蛋白，ECP的测定方法很多，可用放免法测定，也可用CAPsystem测定，其原理是血清中的ECP与immunoCAP上的抗ECP特异性结合，然后 ECP酶标二抗复合物，加入酶标抗ECP抗体，该抗体与血清中的ECP结合形成ECP-此复合物作用于底物，生成可释放荧光的 ［19］根据荧光吸光度换算ECP含量。刘冰等对32例慢性荨麻疹儿童进行血清ECP检测研究发现血清ECP和血清总IgE物质， 与外周血EOS的计数无相关性，但儿童慢性荨麻疹中血清总IgE的变化可能较血EOS计数变化更灵敏，更能反映EOS的活化程度。 四、体内试验和体外试验的比较 体内试验属于生物测定的范畴，是根据受试皮肤的反应推测患者是否对该变应原过敏；体外试验属于免疫化学测定，是［1］ October1，2011，Vol．5，No．19（）201110519ChinJClinicians（ElectronicEdition），·5755· 对sIgE的直接检测。体内试验易受操作者技术熟练程度的影响，对结果的判定也有一定的主观性；体外试验的操作程序化，但仪器和设备应经常校正。体内试验受药物的影响较大，如皮试前服用抗组胺药，皮试反应可受到明显的抑制。其中以糖皮质激素的影响最大，因此，在进行体内试验前，应要求患者停药。体外试验则不受药物的影响，患者可在进行治疗的同时接受检查。尽管体内试验有上述局限性，但仍不失为一种灵敏可靠的病因诊断方法，且体内试验价格低廉，更适合我国国情。多数体外试验的试剂需进口，故价格昂贵。 参考文献 ［1］林文棠，2003：1-6.朱平．实用临床免疫学．西安：第四军医大学出版社， ［2］康熙雄．临床免疫学．北京：人民卫生出版社，2010：56. ［3］宋志强，2006，35：333-335.郝飞．变应原检测的再认识．临床皮肤科杂志， 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