十一项尿常规检测试剂带的研制

十一项尿常规检测试剂带的研制 ,,,,,,,,,,, ,, , , ，,,,, ,,,,,,,,,,,,,, ,,,, ,,,,,, ,,,,,,,,,,,, ,,,,,,,,, ,, ,,,,,,, ,,,,,,,,,, ,, ,,;,,,,,,, ,, ,,,,,,, ,,,,,,,,,,, ,, ,,？,,,,,,,, ,,, ,,, ,,,,,, ,, ,,,,,, ,, ,,,,,,,,,,, ,, ,,,,,,, ,,,,, ,,,,,,,,,,:,,,,(,,,,,,, ,,,, ,,,, ,,,, 摘 要 尿常规分析属于临床疾病初步诊断的定性和半定量分析，使用干化学分析是尿常规分析理想的手段，快速方便，适合医院和家庭使用。本文逐项进行了尿常规分析试纸的开发及其检测性能的评定，并将其与市售的尿常规分析试纸作比较，以期达到或突破国外产品的水平。 白细胞检测以咪唑为催化剂，选择适当的试剂浓度和配比，很好地解决了测定结果线性不佳的难 题 快递公司问题件快递公司问题件货款处理关于圆的周长面积重点题型关于解方程组的题及答案关于南海问题 。检测范围,, ;,,,,,“,,,,, ;,,,,,,,,，灵敏度范围,;,,,,,,,,, ;,,,,,，,,,。为保持重氮盐的稳定性，将检测体系控制在,, ,(,，为防止抗坏血酸对检测的干扰，添加了氧化剂氯酸钠，可抵抗浓度高达,,, ,‖,,抗坏血酸的干扰。 潜血检测采用邻联甲苯胺法，通过显色剂邻联甲苯胺被氧化后形成的蓝色物质的含量对血红蛋白含量(或红细胞个数)进行定量。检测范围,,;,,,,,止,,,, ;,,,,,,,，灵敏度范围, ;,,,,,止,, , ;,,,,,，(,,。选用,,,,,,,?,,,,,,缓冲体系并添加了增敏剂噻唑以提高检测灵敏度。用十二烷基硫酸钠提高过氧化物的稳定性。选用弱氧化剂碘酸钾作为潜血试纸的抗,;物质。 尿蛋白试纸通过蛋白质误差法来测定尿液中蛋白质的含量。试纸的检测范围,(,, ,,,,, ,,,，灵敏度范围,(,, ,,,,,一,(, ,,,。尿液,,对试纸测定结果没有影响。 尿糖的测定是通过葡萄糖氧化酶和过氧化物酶的共同作用，测定尿液中葡萄糖的含量。由于酶的催化作用，试纸反应时间快(,, ,)，检测范围,,,,, ,,,,,,,，灵敏度范围,(,,,一,(, ,,,,,,。确定了两种酶之间的配比以及显色剂的用量以使显色呈明显的梯度。使用合适的酶稳定剂明胶来保持酶的活性。在试纸中加入了弱氧化剂碘酸钾抵消抗坏血酸的影响。当抗坏血酸浓度高达,,,,,,,,时仍不出现阴性结果。 尿液,,试纸采用精密,,试纸的原理，将混合指示剂溴百里酚蓝和甲基红用于尿液,,的测定，可检测人体尿液在,, ,(,,,(,的变化。 尿比重试纸通过测定尿液离子强度来反映尿液比重值，当尿液,,,一,(,时，要在尿比重试纸的测定结果上加,(,,,的修正值。 亚硝酸盐试纸采用,,,,,, 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 ，灵敏度为,, ,,,,,,。 尿胆原测定中通过对二甲氨基苯甲醛与其反应显色来确定尿胆原的含量。 胆红素测定中利用,，,(二氯苯四氟硼酸重氮盐与其形成紫红色偶氮化合物来进行定量。 酮体测定使用了亚硝基铁氰化钠在,,为,(,的缓冲液中与酮体中的乙酰乙酸反应显色。乙酰乙酸是酮体中的主要成分，其他两种组分丙酮和,(羟丁酸都由乙酰乙酸分解而来，所以乙酰乙酸可以反映尿液中酮体的变化。 抗坏血酸的测定采用,，,(二氯靛酚钠褪色法，它的主要作用是检测尿液中是否含有抗坏血酸，以判别是否会对其他指标的检测造成干扰。 对成品试纸条进行了一系列性能评定试验，包括准确度、分析特异性、抗,;能力、精密度、贮存期内稳定性等，以保证成品试纸条能应用于临床。 通过与两家国外公司的进口试纸条在医院进行对照临床试验和统 计分析，表明本文试纸条与其具有等效的检测结果。 为将试纸进行批量生产，本文与机械加工厂联合设计并制造了一条包含浸渍干燥机、裁切机、复合机和滚切机在内的半自动化生产线。该生产线工作效率高，仅需,,个操作工，,, ,即可完成,,,,筒(,,,,,,条)试剂带的生产，并可最大程度地降低试纸的批间和批内差异，保证了试纸检测性能和外观品质。关键词:尿液分析试纸白细胞潜血蛋白质葡萄糖性能研究批量生产 ,,,,,,,, ,,,,, ,,,,,,, ,,,, ,,, , ？,,,,,,,,,, ,,, ,,,,—？,,,,,,,,,,, ,,,,,,,, ,,,;, ,,,,,,;,,,, ,,,,,,, ,, ;,,,,;,, ,,,,,,,,,(,,,,, ,,,,, ;,,,,;,, ,,,,,,,, ,, 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,,,,,,,,,;,(,,,,,,,,:,,,,,,,,,, ,,,,,;,,,,,;,,,;,;;,,, ,,,,,;,,,,,,,;,,,;,,,;,,,,,,,,,;, ,,,,;,,,, ,,,,,;,,,, , 目 录摘要………………………………………………………………((，,,,,,,,,………………………………………………………………………，，，第一章综述…………………………………………………………………, ,(,尿试纸发展概况……………………………………………………………, ,(,尿液常规分析方法进展……………………………………………………((, ,(,尿常规检测的临床意义【,,…………………………………………………((, ,(,本文的研究内容与思路…………………………………………………((,, ,(,(,本文的研究内容……………………………………………………,, ,(,(,本文的研究思路……………………………………………………,, ,(,本文的研究意义……………………………………………………………,,第二章十一项尿液常规分析试纸的研制…………………………,, ,。,尿常规中重要指标的测定保?,(,(,尿液白细胞试纸的制备……………………………………………((,, ,(,(,尿液潜血试纸的制备………………………………………………((,, ,(,(,尿液蛋白试纸的制备………………………………………………((,, ,(,(,尿液葡萄糖的测定…………………………………………………((,, ,(,尿液其他指标的检测………………………………………………………,, ,(,(,尿胆原及胆红素的检测……………………………………………((,, ,(,(,亚硝酸盐的检测……………………………………………………。,, ,(,?, ,,值的检测………………………………………………………………………,,, ,(,(,比重的检测…………………………………………………………((,, ,(,(,酮体的检测…………………………………………………………((,, ,(,(,抗坏血酸的检测……………………………………………………((,,第三章尿液 分析试纸的性能评定…………………………………,, ,。,主要试剂与仪器……………………………………………………………,, ,(,(,主要试剂…………………………………………(((…………………,, ,(,(,主要仪器……………………………………………………………((,, ,，,准确度试验…………………………………………………………………,, ,(,灵敏度试验…………………………………………………………………,, ,(,精密度试验…………………………………………………………………,, ,(,(,批内精密度试验……………………………………………………((,, ,(,(,批间精密度试验……………………………………………………((,, ,(,抗,;能力试验……………………………………………………………(,, ,(,特异性试验…………………………………………………………………,, ,(,贮存期内稳定性试验………………………………………………………,, ,(,临床试验……………………………………………………………………,, ,(,(,试验方法……………………………………………………………((,, ,(,(,临床研究数据的统计分析…………………………………………((,,第四章尿试纸的批量生产工艺设计…………………………………,, ,(,浸渍工艺设计………………………………………………………………,, ,(,裁切工艺设计………………………………………………………………,, ,(,复合工艺设计………………………………………………………………,, ,(,滚切工艺设计………………………………………………………………(,,第五章结论与展望…………………………………………………(,, ,(,结 论…………………………………………………………………………………………………(,, ,(,展 望…………………………………………………………………………………………………(,,参考文献……………………………………………………………((,,攻读硕士学位发表的论文…………………………………………(, ,致 谢………………………………………………………………………………,, 硕士毕业论文 第一章综述,(,尿试纸发展概况 检测试纸的起源可追溯到,,世纪英国物理学家,,,,,, ,,,,,发明的石蕊试纸，或者更早，可追溯到罗马学者,,,,,,,通过浸泡于没食子酸测定铁的莎草纸。 尿液分析试剂带的使用始于,,,,年，美国,,,,和,,,,,两家公司几乎同时创制了测定尿葡萄糖的新产品,,,,,,,,,,,和,,,,,,,„试剂带。这两种试剂带具有用法简单、操作方便，且测定结果能与 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 色板比较等优点。 国内的临床检验发展较慢，上世纪八十年代初期基本上只有一些化学试验方法配合医生进行诊断。少数大医院才使用一些国外产品。八十年代中期以后，一些厂家开始注意到该领域的巨大潜力，开始引进或研制国外尿液检测试纸，并有一些自动分析仪的生产。 ,,,,年广西桂林医疗电子仪器厂以技术贸易的方式从日本京都第一株式会社引进当时具有国际先进水平的,,(,,,,型尿液分析仪和专用试剂带的生产技术及设备，由此填补了国内空白。,,年代初期，国内相继推出了,,,,项尿液分析仪及专用试剂带，但各厂家的产品在检测性能方面均存在一定的缺憾，不能完全满足临床检验的要求。,(,尿液常规分析方法进展 尿液分析方法已经从原来病理性分析发 展到尿液中复杂成分的分析，根据其采用的分析方法可以分为湿化学法、干化学法和物理法。它们的侧重点是不同的，湿化学法主要用于尿液中复杂成分和药物代谢的分析;干化学法是从湿化学法发展过来的，它用于尿液中成分的快速检测，随着现代生物技术的发展，例如，免疫分析方法在干化学中的应用，使试纸检测的特异性得到显著提高;物理法则主要用于尿沉渣和尿液中细胞的分析。 尿比重尿比重也称尿密度，它是反映肾脏浓缩功能的指标。尿比重的检测方法中以物理方法最多。折射仪法【,,是间接测定尿液中的总固体量(,,,,,,,,,,，,,)来反映尿比重的方法。比重计法是测定密度最常用方法，它的缺点是测定时需要尿液的体积较多„,,。液滴下落法【,,是通过测定尿液标本在苯甲硅油 第一章综述中下落时间来计算尿液的比重，在这种方法中只要控制苯甲硅油的比重和粘度，就可以直接测定尿比重。渗透压法【,】所依据的原理是溶液的依数性，由于溶液的浓度不同使尿液的渗透量及凝固点发生变化，通过测定尿液 样本 保单样本pdf木马病毒样本下载上虞风机样本下载直线导轨样本下载电脑病毒样本下载 的渗透量或凝固点下降值建立其与尿比重之间的关系。 由于尿液离子强度与尿液密度具有较好的线性关系【,】，因此可以通过测定离子强度来反映尿比重的变化。它的基本原理是利用磷酸二酯或聚合电解质作为离子交换剂，与尿液中的离子交换质子，从而改变尿液的,,，通过,,值的变化测得尿液的离子强度【,】。尿常规分析试纸就是采用了这种方法，但是这种方法受到尿液的,,和温度的影响较大，需要考虑其对测定结果的误差大小。 ,,尿液的,,范围在,”,,之间，尿液偏酸或偏碱都是体内酸碱平衡被破坏的反映。,,的测定方法则一直使用经典电极法或指示剂显色法，但是尿液中的一些大分子物质，如蛋白质，不仅能吸附在电极表面，而且也能使指示剂在显色时产生误差。所以减少这类物质的干扰是尿液,,检测的关键。 亚硝酸盐现有的亚硝酸盐测定方法在检测限和灵敏度上能够完全符合尿液中的亚硝酸盐的测定，没有必要再发展一种新的测定方法。它利用有机化学上的,,,,,, ,,,,,,,反应【,】，这种检测方法成本低，可以快速得到检测结果。但是对于由其它细菌引起的尿路感染，该方法是检测不出的，所以使用该方法检测尿液得到阴性结果并不能说明不存在尿路感染。另外，尿液样本的存储时间过长，会使尿液中的亚硝酸盐含量增加，这是进行检测时必须注意的。 现有的试纸检测方法就是使用了上述的方法，但是在试纸上出现的最大问题是稳定性，因为检测试剂中使用了苯胺这类容易被氧化的物质。如何选择稳定性好的物质又不能降低试纸的检测灵敏度是亚硝酸盐分析的关键。 尿蛋白 蛋白质的测定有两类方法，一类是利用蛋白质的物理化学性质，如折射率、比重、紫外吸收等测定得知;另一类是利用化学方法测定蛋白质含量如微量凯氏定氮、双缩脲反应、,,,,,(酚试剂法(,,,,,法)和染色法等。 (一)紫外分光光度法 由于蛋白质分子中酪氨酸和色氨酸残基的苯环含有共轭双键，因此蛋白质具有紫外吸收，,,,,, ,,,,，,,,,与其含量呈正比，可用作定量测定【,】。紫外吸收法的优点是快速、简便、不消耗样品，低浓度盐类不干扰测定。因此，在蛋 硕士毕业论文白质和酶的生化制备中(特别是在柱层析分离中)广泛应用。此法的缺点是: (,)对于测定那些与标准蛋白质中酪氨酸和色氨酸含量差异较大的蛋白质，有一定的误差:(,)若样品中含有嘌呤、嘧啶等吸收紫外线的物质，会出现较大的干扰。不同的蛋白质和核酸的紫外吸收是不相同的，即使经过校正，测定结果也还存在一定的误差。但可作为初步定量的依据。由于尿液中的复杂成分在紫外区的吸收会干扰尿液中蛋白质的测 定，所以这种方法在尿液分析中应用不多。 (二)可见分光光度法 可见分光光度法的原理是蛋白质与特定物质反应显色，在显色物质的最大吸收波长处建立标准工作曲线，然后根据标准工作曲线定量。双缩脲法〔,,就是利用蛋白质中具有肽键在碱性条件下与铜离子发生双缩脲反应生成紫色化合物来定量蛋白质的。目前在实验室使用较多的是,,,,,(酚法【,】，这种方法是在双缩脲法的基础上发展起来的。,,,,,(酚试剂由甲乙双组合试剂组成。甲试剂由碳酸钠、氢氧化钠、硫酸铜及酒石酸钾钠组成。蛋白质中的肽键在碱性条件下，与酒石酸钾钠铜盐溶液起作用，生成紫红色络合物。乙试剂是由磷钼酸和磷钨酸、硫酸、溴等组成。此试剂在碱性条件下，易被蛋白质中酪氨酸的酚基还原呈蓝色反应，其色泽深浅与蛋白质含量成正比。此法的优点是操作简单迅速，不需特殊仪器设备，灵敏度为紫外吸收法的,,,,,倍，双缩脲法的,,,倍。它的最大缺点是与不同的蛋白质反应显不同的颜色，从而造成测定的误差。茚三酮法【,,是利用氨基酸与茚三酮反应生成蓝紫色化合物的原理，在波长,,,衄处，测定蛋白质的含量。这种方法的最大缺点是需要将蛋白质水解成氨基酸后，再测定，程序复杂。 (三)染色法 利用,,指示剂蛋白质误差法原理发展起来的一种方法，因此在这种方法中控制,,是非常关键的。甲基橙、考马斯亮蓝、溴甲酚绿是染色法测定蛋白质中常用的测定染料。该方法具有快速、灵敏的特点。 考马斯亮蓝,,,,阴离子与蛋白质在酸性条件下结合后，发生颜色变化，由棕红色变为蓝色，且在蛋白质一定浓度范围内符合比尔定律，可在,,, ,,?,处比色测定【,,】。该法操作简便迅速，消耗样品量少，但不同蛋白质之间差异大， , 第一章综述最大的问题是工作曲线是非线性的。 甲基橙和溴甲酚紫法也可以用于蛋白质的测定，但是它们只是和蛋白质中的白蛋白反应，对其它蛋白质没有反应。所以，如果运用这种方法测定蛋白质成分复杂的体液时，会产生一定的误差【,,】。 (四)浊度法 磺基水杨酸和三氯醋酸可与蛋白质结合或破坏蛋白表面的水化层，使之沉淀，产生浊度来定量尿蛋白。在尿液蛋白质分析中，这种方法应用较多【,,】。它与多种蛋白质均有作用，不会产生由于方法特异性造成的误差问题。 (五)干化学分析 溴酚蓝显色法，指示剂的蛋白质误差现象由,,,,,,,,发现【”】，即在相同的,,条件下，蛋白质的存在会使,,指示剂产生显色误差。虽然这种现象造成了利用,,指示剂来测定生物体液,,的困难，但是却提供了一种蛋白质的快速测定方法。最早出现的尿蛋白干化学试纸使用溴酚蓝作为显色剂，缓冲液是该方法的关键，使用缓冲液将,,指示剂的颜色固定在酸性一端，并且使蛋白质远离其等电点。但是溴酚蓝的理论变色点在,, ,(,,,(,，这会使其在高碱性尿液中产生误差。 钨酸盐染料显色法，由于尿液中离子强度会影响,,指示剂的离解常数【,,】，为克服这个缺陷，,,,,,,，,发明了钨酸盐染料显色法，这个方法利用钨酸盐与蛋白质形成的有色物质来判断蛋白质的含量。 尿糖检测尿液中葡萄糖含量是尿液分析开展最早的检测指标，它的检测方法的可信度也是最高的。所有的检测原理都是将葡萄糖氧化后生成具有颜色的化合物。 菲林试剂法是最早用于尿糖检测的方法，它的原理是二价铜离子在碱性条件下被还原糖中的游离羰基还原成氧化亚铜红色沉淀【,,】。菲林试剂法发展变化较多，它可以使用重量法、容量法、比色法等多种方法测定。但是这种方法的影响因素多，操作时间长，需要加热，特异性不高。,,,,,,;,是在菲林试剂法的基础上发展起来的，它使用柠檬酸钠代替了菲林试剂 里的酒石酸钾钠，所配制的,,,,,,;,试剂比菲林试剂更稳定，可以长期保存，并且其比菲林试剂法更灵敏。在尿液中可检测的葡萄糖范围在,(,,,,, ,,,,,,〔,,,。为减少加热过程， , 硕士毕业论文,,,,,,,发明了自加热碱性铜还原测定尿糖的方法，并将它制成固体药片状，实现了干化学分析【,,】。酶催化反应的特异性、快速性使人们将它应用到葡萄糖的测定上。酶法测定葡萄糖时使用的酶有葡萄糖氧化酶、过氧化物酶和己糖激酶、葡萄糖。,(磷酸脱氢酶两大类。 ,(,,,,,,将葡萄糖氧化酶运用到尿糖检测试纸上【,,】，实.