紫外分光光度法测定补骨脂药材中总呋喃香豆素含量２

紫外分光光度法测定补骨脂药材中总呋喃香豆素含量２ 紫外分光光度法测定补骨脂药材中总呋喃 香豆素含量,         作者:寿清耀～ 杨荣平～ 王宾豪～ 钟国跃～ 涂永勤～ 胡轶娟 【关键词】  补骨脂药材,,,总呋喃香豆素,,,紫外分光光度法 摘要:目的建立紫外分光光度法测定补骨脂药材中总呋喃香豆素的含量。方法补骨脂药材粉末经索氏提取2 h～过聚酰胺柱后～采用紫外分光光度法～检测波长为245 nm对补骨脂药材中的总呋喃香豆素进行测定。结果采用该方法可准确测定补骨脂药材中总呋喃香豆素的含量～补骨脂素在1.008，10.08μl/ml范围内吸光度与浓度的线性关系良好～样品平均回收率为98.7%～精密度RSD为0.11%～重复性RSD为2.8%～稳定性RSD为0.75%,4 h内,。结论该方法简单、准确～可用于补骨脂药材中总呋喃香豆素的含量测定。 关键词:补骨脂药材,  总呋喃香豆素,  紫外分光光度法 Determination of the Total Furanocoumarins in Fructus Psoraleae by UV Spectrophotometry Abstract:ObjectiveTo establish a  UV spectrophotometry for determination of the total furanocoumarins in Fructus Prosraleae. MethodsThe powder of Fructus Psoraleae was extracted by CH3OH for two hours and puerariaed by polyamide column chromatography ;when it was determined  by UV spectrophotometry, wave length was 245 nm.ResultsThe method had good linear relationship from 1.008μl/ml to 10.08 μl/ml,and the recovery rate was 98.7%(The relative standard deviation of accurate test and stability test were 2.8%and 0.75% respectively.ConclusionThe method is simple and accurate, and can be used for determination of the total furanocoumarins in Fructus Psoraleae. Key words: Fructus Psoraleae,  Total furanocoumarins,  UV spectrophotometry     补骨脂为豆科植物补骨脂Psoralea corylifolia L. 的干燥成熟果实。补骨脂味辛～苦～归肾、脾经。具有温肾 补阳、纳气、止泻之功效,1,。用于阳痿遗精～遗尿尿频～腰膝冷痛～肾虚作喘～五更泄泻,外用治白癜风、斑秃。呋喃香豆素类为补骨脂的主要活性物质～用于治疗白癜风、多种妇科出血、鼻、牙龈出血及类血友病出血等症,2,,同时有一定的抗癌活性及对成骨细胞的增殖作用。由于补骨脂中呋喃香豆素类成分无酚羟基～而其他成分包括拟雌内酯类～补骨脂黄酮类及单萜酚类成分均有酚羟基～故采用聚酰胺柱色谱对补骨脂药材中的呋喃香豆素进行富集～以补骨脂素为对照品～建立了用紫外分光光度法测定总呋喃香豆素含量的方法。结果 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明该方法简便、准确～可用于补骨脂药材中总呋喃香豆素含量测定。 1  仪器与试药 UV1601型可见紫外分光光度计,日本岛津,～AW220型电子天平,日本岛津,～补骨脂素对照品、异补骨脂素对照品,中国药品生物制品检定所,～聚酰胺粉,30，60目,。 2  方法与结果 2.1  供试品溶液的制备 2.1.1  上柱样品的制备取补骨脂药材粉末,过三号筛,0.5 g～精密称定～臵索氏提取器中～加甲醇适量～加热回流提取2 h～过滤～加0.5 g聚酰胺粉,30，60目,拌匀～即得。 2.1.2  乙醇洗脱浓度的考察将样品上聚酰胺柱,10 ml 30~60目聚酰胺～1×10 cm,～水洗脱至无色～再依次以30%,50%,70%乙醇各洗脱100 ml～洗脱液进行紫外全波长扫描～图谱见图1~5。     由上图可以看出～30%乙醇洗脱液的紫外扫描图最大吸收波长为245 nm～与补骨脂素及异补骨脂素等呋喃香豆素的紫外扫描图基本一致,50%乙醇洗脱液显示为补骨脂酚的紫外吸收图,而70%洗脱液显示为黄酮及拟雌内酯类紫外吸收。 图1  30%乙醇洗脱液(略)         ;        &n bsp;    图2  50%乙醇洗脱液(略) 图3  70%乙醇洗脱液 (略)         ;        &n bsp;  图4  补骨脂素(略) 图5  异补骨脂素 (略)   2.1.3  乙醇洗脱用量的考察将样品上聚酰胺柱～加水洗脱至无色～再加30%乙醇洗脱以 10 ml/min洗脱～每25 ml为一流分～取1 ml稀释至10 ml～在245 nm处测定吸光度。结果见表1。   表1  样品30%乙醇洗脱液不同流分的紫外吸收(略) 由上表可以看出～第10个流分所检测到的吸光度已很低～故样品上聚酰胺柱后～加水洗脱至无色～用30%乙醇以10 ml/min洗脱250 ml即得。 2.1.4  结论根据实验结果～最终确定补骨脂药材供试品制备方法为取补骨脂药材粉末0.5 g,过三号筛,～精密称定～臵索式提取器 1中～加甲醇适量～加热回流提取2 h～过滤～滤液加0.5 g聚酰胺粉,30，60目,拌匀～挥干～上聚酰胺柱～以30%乙醇洗脱250 ml。 2.3  对照品溶液的配臵取补骨脂对照品12.6 mg精密称定～加甲醇超声～定容至50 ml～再精密吸取1 ml～加甲醇定容至25 ml即得 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 品溶液。 2.4  标准曲线的绘制精密吸取上述对照品溶液1～3～5～7～10 ml～加甲醇定容至10 ml～于245 nm处测定吸收度,.并以吸光度与对照品浓度进行回归,得标准曲线方程y=0.132 1x+0.008 8～r=0.999 7(n=5)。实验表明补骨脂素在1.008，10.08 μg/ml浓度范围内与吸光度呈良好的线性关系。 2.5  精密度实验精密吸取上述对照品溶液1 ml～加甲醇稀释至10 ml～于245 nm处测定吸光度～连续测定5次～结果表明5次测定的RSD为0.11%～故仪器精密度良好。 2.6  稳定性实验将精密度考察项下对照品溶液于0～6～12～24～48 h在245 nm处测定吸光度～实验结果表明RSD为0.75%～对照品溶液在4 h内稳定性良好。 2.7  重复性实验按照拟定的含量测定方法～取同一批药材5份～每份0.5 g～分别制备样品～测定吸光度～并计算其含量～实验结果5个样品含量RSD为2.9%～表明本法重复性良好。 2.8  回收率实验取已知含量的补骨脂药材0.25 g～精密称定～分别精密加入补骨脂素对照品溶液适量,3种不同水平～各2份,～按供试品制备方法处理～进行含量测定～计算回收率。结果见表2。   表2  回收率实验(略) 由表2可知～3种水平6次实验的加样回收率测定结果均在95%，105%之间～其平均值为98.7%～RSD为1.00%。 2.9  样品测定 取6批补骨脂药材～每批0.5 g,过三号筛选,～按供试品制备方法制备～测定吸光度～根 据标准曲线计算样品中总呋喃香豆素的含量。结果见表3。   表3  6批补骨脂药材含量测定结果(略) 从表3可知～补骨脂药材中总呋喃香豆素的含量在1%左右～各个批次药材之间总呋喃香豆素的含量有较大的差异。 3  讨论 补骨脂中总呋喃香豆素是补骨脂中的主要活性物质～补骨脂中呋喃香豆素没有酚羟基～在聚酰胺柱上的吸附能力较补骨脂中的其他成分如黄酮类、拟雌内酯类及单萜酚类为弱。根据这一特性～我们通过聚酰胺柱色谱对补骨脂药材中的呋喃香豆素进行了富集～并对乙醇洗脱的浓度与用量进行了考察。结果以药材提取液拌聚酰胺～上柱～水洗至无色～再以30%乙醇洗脱250 ml作为供试品溶液,以补骨脂素为对照品绘制标准曲线测定样品中总呋喃香豆素含量～该方法灵敏度高～重复性好。根据拟定的方法～我们测定了6个不同批次药材中中呋喃香豆素的含量～发现各个批次药材含量有较大的差别～故有必要通过总呋喃香豆素来控制补骨脂药材的质量。 参考文献: ,1,  国家药典委员会.中国药典～?部,S,.北京:化学工业出版社～2005. ,2,  吉  力～徐植灵.补骨脂化学成分综述,J,.中国中药杂志～1995～20,2,:120.