【word】 芽孢乳杆菌复合益生素对三黄鸡作用的研究

【word】 芽孢乳杆菌复合益生素对三黄鸡作用的研究 芽孢乳杆菌复合益生素对三黄鸡作用的研 究 科学试验与研究 茅孢乳杆菌复合益丝素珊 星黄呜作厕研究 相菲徐春厚 广东海洋大学 摘要选用100只1日龄三黄鸡,分为5组,每组设2个重复,各10只雏鸡.对照组饲喂基 础日粮;抗生素组在基础日粮中添加0.2%恩诺沙星;试验组在基础日粮中添加芽孢乳杆菌复合 益生素A,添加量为0.5%,1%和1.5%;试验期8周.试验结果 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明:芽孢乳杆菌复合益生素A 有提高三黄鸡平均日增质量和降低料重比的趋势;提高了三黄鸡生长前期血清溶茵酶和IgG的含 量(P<0.05);提高新城疫血清H1抗体效价并延长抗体维持时间;提高三黄鸡外周血T淋巴细胞 转化率.结果表明:芽孢乳杆菌复合益生素A能替代恩诺沙星,在饲粮中适宜的添加量为1%. 关键词三黄鸡芽孢乳杆菌复合益生素A营养免疫 中图分类号:S816.79文献标志码:A文章编号:1002—2813(2009)10—0001—05 芽孢乳杆菌具有芽孢杆菌和乳酸杆菌的共同特 性,可产生乳酸并形成芽孢,对外界环境有较强的抵 抗力.试验所用3株芽孢乳杆菌是产乳酸能力较 强,形成芽孢数量较多,并有抑菌活性的有益益生 菌.为探讨这3株益生菌对动物营养和免疫的影响 作用,故选用三黄鸡进行动物试验. 1 材料 关于××同志的政审材料调查表环保先进个人材料国家普通话测试材料农民专业合作社注销四查四问剖析材料 与 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 1.1试验动物与试验设计 选用100只1日龄健康三黄鸡,随机分为5个 组,每组设2个重复,每重复10只雏鸡.对照组(1 组)饲喂基础日粮;抗生素组(2组)在基础日粮中添 加O.2%恩诺沙星;试验3组,4组和5组在基础日 粮中添加复合益生素A,添加量分别为0.5%,1% 和1.5%;饮水均为自来水,试验期8周.日粮的配 制选用常规的饲料原料,参照1994年NRC肉鸡的 饲养标准配制,基础Et粮组成及营养成分见表1. 收稿日期:2009—06—16 基金项目:广东省科技计划项目,编号:2006B20301023 通信作者:徐春厚 表1试验基础日粮配方及营养水平 狂:母_t兄阃根育生系A2700,维生系D400布?维生素E 10IU;维生素K0.5,维生素B11.8,维生素B23.6,维生素B63,维生 素B120.009,生物素0.15,叶酸0.55,烟酸27,泛酸钙1O,50%氯化胆 碱1000,铜8500,锰6万5000,铁2万4000和锌3万3500nag(Cu, Mn,和zn均以硫酸盐形式添加). 1.2复合益生素A的制备 1.2.1菌种 芽孢乳杆菌SC,芽孢乳杆菌SL1和芽孢乳杆菌 NT,由广东海洋大学动物微生物学实验室分离,鉴 定和保存. 饲料研究量1 科学试验与研究 1.2.2种子培养基 黄豆汁0.5%,甘蔗汁13%,K2HPO40.005%, MgSo4’7H2O0.O1%,MnS04’H200.005%,121.3? 灭菌20min备用. 1.2.3发酵培养基(FD) 将10%的黄豆汁,13%的甘蔗汁,蛋白胨,葡 萄糖和无机盐(主要有K2HPO4,MgSo4?7H20, MnS04?H2O和柠檬酸三铵)按一定比例混合,即为发 酵培养基,将配制好的FD分装于三角瓶中, 40mL/瓶,灭菌(121.3?,20min)备用. 1.2.4复合益生素A 用种子培养基将3株芽孢乳杆菌活化,按2% 分别接种发酵培养基,连传三代,将3株菌的第三代 培养物混合,按10%接种发酵培养基,培养条件参 照潘俊福介绍的方法.3株芽孢乳杆菌在37cc和 120r/min条件下的混合培养物即为复合益生素A. 1.3饲养管理 进鸡前对鸡舍进行全面冲冼和消毒,闲置1周 以上.每重复设为1个单元.试验开始的前2周室 温控制在34,36?,采用红外线照射保温,以后每 周降温2?.1,3日龄的仔鸡采用24h/d的光照, 光照强度为20Lx;4,7日龄至少22h/d的光照,光 照强度为l5k,相对湿度为55%,85%.饲料的 形状为干粉料,每天喂料3次,自由采食和饮水.每 天早晚清扫鸡舍2次,清洗饮水器至少1次.7日 龄新城疫一传染性支气管炎二联苗免疫,2周龄传 染性法氏囊疫苗免疫. 1.4测定指标及方法 试验鸡每周第1天早上08:00空腹以重复为单 位称质量,并称剩料量和给料量,结算平均日采食 量,日增质量和饲料报酬. 试验于第28天和第56天,每组随机抽取4只 (每重复2只)体质量接近全群平均体质量的试验 鸡,心脏采血10mL,分离血清,测定血清溶菌酶,免 疫球蛋白IgG和IgA的含量.同时,从翅静脉采集 抗凝血,分离淋巴细胞进行体外培养,采用MTY比 色法进行测定外周血淋巴细胞转化率. 试验鸡于2l,28,35,42,49和5613龄翅静脉取 血液(每重复2只),分离血清,做红细胞凝集抑制 试验(HI试验)测定血清新城疫?抗体效价. 试验鸡于28和56日龄屠宰后将己游离且剔除 周围脂肪的胸腺,脾和法氏囊迅速称其鲜质量,并按 下式计算免疫器官指数. 免疫器官指数=免疫器官鲜质量(g)/体质量 (kg)×100% 1.5数据统计分析 采用SPSS13.0统计软件进行单因素方差分析, 以LSD多重比较显着水平. 2结果与分析 2.1芽孢烈杆菌复合益生素A对三黄鸡生产l蝣向 从表2可见:试验前期各组平均日采食量在统计 上差异不显着,但各组料重比在统计上差异显着,各复 合益生素A添加组和抗生素对照组都有提高平均日增 质量,降低平均日采食量和料重比的趋势,平均日增质 量以0.5%复合益生素A添加组最高.试验后期,各 复合益生素A添加组与对照组平均日采食量均差异不 显着;平均日增质量方面,1%复合益生索A添加组显 着高于对照组,1.5%复合益生素A添加组也比对照组 提高16.92%(P<O.05);抗生素组的料重比与对照组 和1%复合益生素A添加组差异均不显着,0.5%和 1.5%复合益生素A添加组的料重比均显着低于对照 组.从整个试验期看,各复合益生素A添加组和抗生 素组的平均H采食量与对照组统计差异不显着;0.5% 复合益生素A添加组的平均Et增质量比其他各组都 高;各复合益生素A添加组料重比显着低于对照组和 抗生素组. 表2复合益生素A对三黄鸡生产性能的影响g 2饲料研究 科学试验与研究耵 ?怀准误左;l廿J仃双倨屑汪子母元笠小同衣不爱并显者,屑狂同子母或木怀子母衣不蠹并小显者. 2.2芽孢乳杆菌复合益生素A对三黄鸡血清溶菌 酶的影响 表3复合益生素A对三黄鸡血清溶萄晦含?掘响V-.,/mL 狂1日J霰2 从表3可见:28日龄,对照组与抗生素组和1% 复合益生素A添加组差异不显着;0.5%和1.5% 复合益生素A添加组溶菌酶含量显着高于对照组, 以0.5%复合益生素A添加组最高.56日龄,抗生 素组与对照组和各复合益生素A添加组统计差异 均不显着.试验证明:1%及以上的复合益生素A 添加量,可提高三黄鸡血清溶菌酶含量. 2.3芽孢乳杆菌复合益生素A对三黄鸡血清IgG 和的影响 从表4可见:28日龄,对照组I含量显着低于抗 生素组和各复合益生素A添加组,抗生素组与1%复 合益生素A组差异不显着,1%复合益生素A添加组 的I含量比抗生素组提高6.41%(P>0.o5).对照 组和1%复合益生素A添加组IgA含量差异不显着; 抗生素组和0.5%及1.5%复合益生素A添加组Igi 含量显着高于对照组.56日龄,对照组,抗生素组和各 复合益生素A添加组含量相互差异不显着,抗生 素组比对照组高0.29%,IgG含量有随复合益生素A 添加量增加而升高的趋势,1.5%复合益生素A添加组 比对照组高l1.34%,比抗生素组高11.01%;对照组, 抗生素组与0.5%和1%复合益生素A添加组Igh含 量相当(P>O.o5),1.5%复合益生素A添加组IgA含 量显着高于对照组. 表4复合益生素A对三黄鸡血清免疫球蛋白含量的影响g/L 注同表2 表5复合益生素A对三黄鸡血清新城疫HI抗体效价的影响 注同表2 饲料研究一=3 科学试验与研究 2.4芽孢乳杆菌复合益生素A对三黄鸡血清新城 疫Hl抗体效价的影响 从表5可见:1%复合益生素A添加组HI抗体效 价在整个试验期均显着高于对照组;O.5%复合益生 素A添加组}?抗体效价在试验前期显着高于对照组; 1.5%复合益生素A添加组m抗体效价在35,42和49 日龄时显着高于对照组.新城疫?抗体效价在复合 益生素A添加量为1%时最高.试验结果表明:添加 1%的复合益生素A既经济又能提高新城疫?抗体 效价,并能延长其消退的时问. 2.5芽孢乳杆菌复合益生素A对三黄鸡免疫器官 指数的影响 从表6可见:28Et龄,抗生素组与0.5%和 1.5%复合益生素A添加组均能显着提高胸腺指 数,以1.5%复合益生素A添加组胸腺指数最大 (P<0.05);O.5%和1.5%复合益生素A添加组脾 指数均显着大于对照组;1%和1.5%复合益生素A 添加组法氏囊指数显着大于对照组,0.5%复合益 生素A添加组与对照组和抗生素组问法氏囊指数 差异不显着.56日龄,对照组,抗生素组与1%和 1.5%复合益生素A添加组相互间差异不显着;脾 指数,0.5%和1%复合益生素A添加组与对照组 相比差异不显着,1.5%复合益生素A添加组脾指 数显着大于对照组;以1.5%复合益生素A添加组 法氏囊指数最大,显着大于对照组,但与抗生素组差 异不显着. 2.6芽孢乳杆菌复合益生素A对三黄鸡淋巴细胞 转化率的影响 从表7可见:28Et龄,淋巴细胞转化率在对照组,抗 生素组,0.5%和1.5%复合益生素A添加组间差异不显 着;1%复合益生素A添加组的淋巴细胞转化率显着高 于对照组,比对照组提高23.27%.56Et龄,抗生素组与 对照组和0.5%复合益生素A添加组差异均不显着, 1%和1.5%复合益生素A添加组淋巴细胞转化率显着 高于对照组. 3讨论 3.1芽孢乳杆菌复合益生素A对三黄鸡生产性能 的影响 Abdollahi等(2OO2)的试验结果表明:在肉鸡日 粮中添加益生素,试验前期能显着提高肉鸡增质量, 但在试验后期对增质量作用不明显.研究发现,芽 孢乳杆菌发酵培养物能显着提高三黄鸡平均日增质 量,降低料重比,整个试验期平均日增质量以0.5% 复合益生素A添加组最高,料重比各复合益生素A 添加组显着低于对照组和抗生素组,以1%复合益 生素A添加组最低;促生长作用在三黄鸡生长后期 表现较明显,可能因为在雏鸡阶段,其肠道微生态刚 刚开始建立,很多功能尚不健全,外源芽孢乳杆菌通 过自身酶的分泌,对病原菌的抑制,刺激肠道分泌和 吸收功能发育及黏膜免疫系统建立等直接或间接因 素起作用,随着肠道微生态的逐步完善,在生长后期 芽孢乳杆菌的作用更加明显.这与前人的研究结果 不尽一致,这可能与益生素中菌种等成分不同,作用 机制也不同有关. 3.2芽孢乳杆菌复合益生素A对三黄鸡免疫功能 的影响 3.2.1芽孢乳杆菌复合益生素A对三黄鸡血清免 疫球蛋白的作用 禽类血清中的IgG具有抗细菌,抗病毒和抗外 毒素等多种活性作用,在体液免疫中最为重要.血 表6复合益生素A对三黄鸡免疫器官指数的影响 注同表2,刺激指数sI. 4饲料研究 清中的IgA与存在于唾液,泪液,鼻和支气管分泌物 等外分泌液中的分泌型IgA有一定程度的相关性. 分泌型IgA是机体黏膜防御感染的重要因素.试验 证明:饲粮中添加芽孢乳杆菌复合益生素A均能提 高三黄鸡血清中IgA含量,1.5%芽孢乳杆菌复合 益生素A添加组显着高于对照组;1%和1.5%芽 孢乳杆菌复合益生素A添加组的IgG含量高于对照 组.试验前期,芽孢乳杆菌复合益生素A的添加效 果明显好于试验后期. 3.2.2芽孢乳杆菌复合益生素A对血清新城疫HI 抗体效价的影响 体液免疫是B淋巴细胞介导的免疫应答反应, 血清中抗体水平的高低可反应动物机体体液免疫状 态.研究发现,应用芽孢乳杆菌复合益生素A的雏 鸡免疫新城疫疫苗后,其抗体水平均不同程度高于 对照组,在28日龄差异最显着.微生态制剂能明显 提高循环血液中的抗体水平,这可能是由于益生菌 的细胞壁成分可作为抗原物质和免疫佐剂,促进免 疫器官的综合发育,从而有更多的淋巴细胞分化成 浆细胞产生抗体. 3.2.3芽孢乳杆菌复合益生素A对血清溶菌酶的 影响 Fleeting(1992)在某些组织和分泌物中发现一种 明显溶解细菌的成分,命名为溶菌酶(I_ZM).血清 溶菌酶是由吞噬细胞合成并释放到细胞外的一种重 要酶,通过作用于革兰阳性菌细胞壁的肽聚糖,使细 胞壁失去坚韧性,细菌发生低渗性裂解来杀伤细菌. 溶菌酶作为机体非特异免疫因子之一,参与机体多 种免疫反应,在机体正常防御功能和非特异免疫中, 具有保持生理平衡的重要作用.因此,检测血清溶 菌酶可作为了解机体防御功能的指标之一,它的含 量反应了非特异性体液免疫功能.研究结果表明: 芽孢乳杆菌复合益生素A对三黄鸡血清溶菌酶含 量有提高作用,试验前期比试验后期效果显着. 3.2.4芽孢乳杆菌复合益生素A对免疫器官指数 的影响 法氏囊是禽类特有的体液免疫中枢器官,是B 淋巴细胞分化成熟的场所;胸腺是细胞免疫中枢器 官,是T淋巴细胞分化成熟的场所;脾是禽类最大的 外周免疫器官,参与全身的细胞免疫和体液免疫. 张春杨等(2002)研究表明:用益生菌剂饲喂肉鸡,能 科学试验与研究 明显促进免疫器官的生长发育,可显着提高免疫器 官(脾,法氏囊和胸腺)指数.测验中,试验组的免疫 器官指数与对照组相比,均有不同程度的提高.试 验前期,1.5%芽孢乳杆菌复合益生素A添加组的 效果较好;而试验后期,1.5%芽孢乳杆菌复合益生 素A添加组对胸腺指数的影响不大. 3.2.5芽孢乳杆菌复合益生素A对淋巴细胞转化 率的影响 淋巴细胞转化试验是体外检测T淋巴细胞功能 的一种非常重要的方法,其通过刺激指数来反应淋 巴细胞对刺激物的应答水平,能在一定程度上反应 机体的细胞免疫水平.试验研究表明:饲粮中添加 芽孢乳杆菌复合益生素A均能提高三黄鸡淋巴细 胞转化率;28日龄时,1%芽孢乳杆菌复合益生素 A添加组效果较好;56日龄时,1.5%芽孢乳杆菌 复合益生素A添加组效果较好. 试验结果表明:在日粮中添加1%芽孢乳杆菌 复合益生素A时,既有较明显的促生长作用,又可 使三黄鸡免疫功能有所提高,在日粮中适宜添加剂 量为1%. 参考文献 [1]李志莲,李加福,尹桂花.鼠李糖乳杆菌,地衣芽 孢杆菌对蛋种鸡生产性能的影响.中国畜禽种 业,2005(10):23—24. 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