扫描电镜的孢粉制样技术
电 子 显 微 学 报Vo l- 18, No14 第 18 卷 第 4 期
1999- 08 1999 年 8 月Journa l of Ch in e se E lec tron M icro scopy Soc ie ty
() 文章编号: 100026281 1999042047420476
扫描电镜的孢粉制样技术
3 周忠泽鲁润龙
() 中国科学技术大学生命科学学院, 合肥 230027
摘 要: 本文介绍了三种扫描电镜的孢粉制样技术, 即盖玻片涂片法、铜片涂片法及铜台挑入法。 本
文对这三种方法进行比较, 说明各自的优缺点。
关键词: 扫描电镜; 植物孢粉; 制样技术
分类号: 16; 9441571 文献标识码: TN Q A
孢粉形态资料是进行植物系统分类的重要依据。近年来由于扫描电子显微镜的应用, 许多先前在光学显微镜下无法分辨的微观特征, 包括花粉萌发孔的位置、数目以及外壁纹饰等方面的微 观差异都被清晰地揭示出来, 从而为某些疑难类群的分类划界和系统位置提出了颇有价值的信 息。因此扫描电镜越来越受到孢粉学家和分类学家的重视。但是对孢粉的不同制样技术, 将会严 重影响扫描电镜对孢粉观察和拍摄的效果。 近年来, 作者用扫描电镜观察植物孢粉时, 摸索出几 种制样技术。 具体介绍如下。
盖玻片涂片法
)用玻璃刀将盖玻片划开成 315×315的小片; 2mm mm )1 在盖玻片的背面标上数字号码;) ) 3用毛笔蘸丙酮在双面胶上来回涂抹几次, 将其溶解的胶再涂到盖玻片上; 4用玻棒蘸取经过
( ) 醋酸酐分解法处理过的孢粉直接涂抹在粘有胶的那一面上; 5在一个大的圆形铜片上 直径约
) )按号码顺序将粘有花粉的盖玻片有规则地排在大的铜片上;5, 6上粘有几条双面胶; 6 cmcm
) 7真空镀膜机中喷金, 扫描电镜观察并照相。 该方法的优点是: ?因为盖玻片面积小, 一个大的
铜片上同时可以排 50, 60 个小片, 一次可以喷金和观察完, 这样既可以减少喷金的次数, 又可以
)1 取一些已制作好的圆形铜台, 其规格为: 高 3, 315, 直径 3, 315。 mm mm )2 在铜台侧面贴上一小块标签纸, 然后标上数字号码。
)3 在铜台上面粘上双面胶。
) 4 剪下一小块与铜台表面大小相对的金属箔纸, 将箔纸无胶的一面朝下, 直接粘在双面胶
上, 有胶的一面朝上, 以便能粘住孢粉。
) 5新鲜的植物材料, 采取刚刚裂开的花药或孢子囊, 将花粉或孢子直接撒在金属箔纸上; 从
蜡叶标本上取的材料, 先用 95% 的乙醇将花粉或孢子从花药或孢子囊中直接洗出来, 在解剖镜
下, 用猪鬃将花药或孢子逐粒挑到粘有金属箔纸的铜台上。 每个铜台上要挑 50, 100 粒孢粉, 这
样才能保证找到每一个面。
) 6后面的步骤同上。
该制样技术具有以下优点: ?直接用未处理的孢粉材料, 这样花粉或孢子不粘有杂质, 拍摄
( ) 出来的花粉或孢子照片非常精美, 背景也清爽干净 如图 3。 ?使用金属箔纸后, 花粉或孢子突
出在金属箔纸表面上, 整个花粉或孢子都能拍摄出来, 立体感好。?铜台具有一定的高度, 操作方
便。 ?铜台侧面的号码不易抹掉, 且也能直接看到, 不易混淆。 ?体积小, 节省材料和时间。
图 1醋酸酐法处理过的显花蓼花粉;
图 2 直接涂在双面胶上的头花蓼花粉;
图 3 挑在金属箔纸上的未经醋酸酐法
处理过的酸模叶蓼花粉
电 子 显 微 学 报 476 第 18 卷
接从花药或孢子囊中取出来的, 这样才能保证拍摄出来的照片效果好。
21 使用小的铜台比玻片和铜片操作要方便, 能提高工作效率, 节省箔金料。
31 铜台上一定要粘有金属箔纸, 这样才能保证拍摄出来的花粉或孢子背景清爽, 立体感强。
Spec im en prepa ra t ion techn ique s f or SEM ana ly s is of
po l len an d spore
22ZHOU Zho n g ze L U R u n lo n g
(), , 230027, . Schoo l o f L ife Sc ienceU n ive r sity o f Sc ience and T ech no lo gy o f C h inaH efe i C h ina
A bstrac t: Sam p le p rep a ra t io n is a k ey fac to r in SEM ana ly sis o f po llen and spo re. In th is p ap e r th ree sp ec im en
) . : 1p rep a ra t io n tech n ique s a re in t ro duced in de ta ilsT h e se tech n ique s can be summ a r ized a s fo llow ingsm ea r ing
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