缺氧——几种类型的小鼠缺氧实验实验目的和要求通过在动物身上复制乏氧性、血液性和组织中毒性等缺氧模型，观察缺氧时动物的活动、呼吸、血液和粘膜颜色等指标的改变以及动物的存活时间，加深理解各类缺氧的发病原因和机制。实验动物 每组取成年小鼠7只，新生小鼠1只。 成年鼠称重、编号。 选出两对体重相等或最相近（误差在1g以内）的成年小鼠备用。实验一：乏氧性缺氧取体重相等或相近的小鼠2只，同时密闭并计时；观察小鼠的活动、呼吸和皮肤粘膜颜色的改变，死亡时记录存活时间。测死亡时瓶内氧浓度（同时测尚存活鼠的瓶内氧浓度）。死后立即开胸取心血，观察血液颜色。实验二：一氧化碳中毒性缺氧取小鼠1只，放入指定装置，调节煤气流量（60个左右气泡/min）吸入CO。观察指标、方法同实验一的2、4项。实验三：亚硝酸钠中毒性缺氧取体重相等或相近的小鼠2只；腹腔注射给药：0.15ml/10g体重 观察指标与方法同实验一的2、4项。 鼠1 鼠2 5％亚硝酸钠溶液 √ √ 1％美蓝溶液 √ 生理盐水 √实验四：氰化钾中毒取健康小鼠1只，称重；腹腔注射0.2％氰化钾（按0.15ml／10g体重注射）；观察指标同实验一的2、4项。实验五：年龄因素的影响取成年鼠和新生幼鼠各1只；新生鼠置入青霉素小瓶中，瓶口盖棉花；与成年鼠共同置入广口瓶并密闭。观察活动、呼吸情况和存活时间。注意事项所用广口瓶须密闭不漏气，且各瓶容量应一致。动物死亡后要立即取血，血液要充分与抗凝剂混合，量要准（即液滴大小相同），各管血滴数要一致，否则对比性差。试管应事先编号，以免搞错。记录时间要准确，以一只
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为准。氰化钾有剧毒，勿沾染皮肤、粘膜，尤其是破损处。要认真仔细观察小鼠活动情况，呼吸深度和尾、耳、口颜色的变化。实验结果几种类型缺氧指标的改变 乏氧性 血液性 组织 年龄 玻璃珠 钠石灰 CO NaNO2+NS NaNO2+美蓝 KCN 成年 新生 存活时间（min） 血液颜色 － － 呼吸变化 － － FiO2(％) － － － － － －分组讨论题各组缺氧存活时间不同及死亡的原因和机制是什么？各组血液颜色生成的原因；美蓝的作用是什么？各组的呼吸变化有何不同，为什么？实验一FiO2变化的原因、机制是什么？（完）分组讨论题各组缺氧存活时间不同及死亡的原因和机制是什么？各组血液颜色生成的原因；美蓝的作用是什么？各组的呼吸变化有何不同，为什么？年龄差异对缺氧耐受有何不同，为什么？实验一缺氧装置的原理是什么？其中FiO2变化的原因、机制是什么？（完）分组讨论题存活时间，死亡原因和机制血液颜色呼吸变化FiO2变化 年龄差异 美蓝的作用 实验一装置的原理（完）Chart3 21 21 20.5 20 18.4 15 15.4 10 12.5 9 9.7 8.3 6.7 8.3 6.7 8.3钠石灰瓶小鼠玻璃珠瓶小鼠时间氧浓度（％）两瓶中氧浓度变化关系（模式图）Sheet1 钠石灰瓶小鼠 21 20.5 18.4 15.4 12.5 9.7 6.7 6.7 玻璃珠瓶小鼠 21 20 15 10 9 8.3 8.3 8.3Sheet1 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0钠石灰瓶小鼠玻璃珠瓶小鼠时间氧浓度（％）两瓶中氧浓度变化关系（模式图）Sheet2 Sheet3 CO中毒死因①结合速率==解离速率==亲和力==②吸入气钟中CO达0.1％，血中HBCO可达50％③HBCO使氧曲线左移，血液向组织释放氧减少④抑制RBC糖酵解，2,3-DPG减少，氧离曲线左移亚硝酸钠中毒高铁血红蛋白血症（methemoglobinemia) HB-Fe2+＋NaNO2HB-Fe3+＋NaNO 正常人MHB含量占HB总量的0.07~0.38%，相当于0.03g%左右 NaNO2中毒时MHB含量占HB总量的10%以上，相当于1.5g%以上 HB-Fe3+＋美蓝HB-Fe2+KCN中毒Cytaa3-Fe3+＋CN－→Cytaa3-Fe3+-CN－幼鼠耐受缺氧的原因：中枢方面：神经系统发育不完善，对氧需求量少；脑无氧酵解能力强；ATP利用率为成年的1/10；心脏方面：心肌糖元含量高，新生30mg/g组织，成年2～4mg/g组织；血液方面：RBC多；细胞方面：线粒体呼吸功能强；全身：体积小，活动少，耗能少。
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