【doc】造血干细胞动员剂硫酸葡聚糖的临床前及人...

【doc】造血干细胞动员剂硫酸葡聚糖的临床前及人... 造血干细胞动员剂硫酸葡聚糖的临床前及 人... ,口弓 中华器官移植杂志1992年第13卷第3期 . 占干磁萄铎瘾耐孵,, 造血干细胞动员剂硫酸葡聚糖 的临床前及人体试用研究 ?103? 中国人民解放军军事医学科学院放射医学研究所尸 马恩普郭树华魏汉东刘安丁林茂江幼岷吴租泽 中国长城医院墨.王青梅姚善诛7. / 摘要应用造血干细胞动员剂硫酸葡聚糖(DS)进行动物试验及人体试用,以 观察其动员造血干细胞的效果及毒剐作用.结果DS可使犬循环血中粒单系祖细胞 (CFU—GM)增加到绮药前的4倍,小鼠LDo为l128.6,l369.4mg/kg~低分子 量的DS过敏试验结果为阴性.31名人体试用,DS可使循环血中的CFU—GM,缸 系爆式集落形成单位(BFU—E),粒红巨棱巨噬系集落形成单位(CFU—GEMM)分j;lI 增加到用药前的8倍,10.5倍和119倍,初步判定其安全,有效剂量为15~20mg/kg. 静脉注射DS后分离血中造血干细胞l,2敬,可得单桉样细胞3.8×10/kg,CFU— GM3.1×10'/kg. 利用循环血中干细胞移植治疗白血病, 恶性肿瘤和放疗,化疗所致造血功能损伤是 国外近年来采用的新疗法但因在正常生理 条件下血中干细胞的数量少,阻碍了这一疗 法的推广应用.本实验室近年来对造血干细 胞动员剂硫酸葡聚糖进行了效价,毒副作用 等一系列研究.在实验室研究基础上又开展 了正常人体试用研究,并获得成功. 材料 关于××同志的政审材料调查表环保先进个人材料国家普通话测试材料农民专业合作社注销四查四问剖析材料 与方法 一 ,动员造血细胞效价实验:实验用河北地区 杂种犬{且,雄性,身体继康,肝肾功船正常.静 脉注射低分子的DS(分子量为10000u)之前和注射 后不同时间取静脉血,计数单校样细胞(MNC,即 淋巴钿胞和单棱细胞),甩体外琼脂培养方法测定粒 单系祖细胞(CFU—GM)(1). =,小鼠LDso毒性实验:按国家卫生部发布 的《新药审批办法规定进行,用台格动物KM小 鼠雌雄各半.所甩DS与正常人体试用者相同, 剂量为400,2l?lmg/kg分5十荆量组,每组7 只小鼠.雄性动物组问荆量间隔为4OOmg/kg,髓性 组剂量间隔为435.mg/kg, 三,药物过敏试验:体重为250~350g的豚鼠 】2且,平均分成两组.甲组动物腹腔注射低分子量 DS,5mg/只,隔日l敬,共3砍,其中3只于 第1敬给药后第l4天静酥注射低分子量DS15 mg/kg,另外3丑于2I天注射DS15mg/kg.乙组动 物静脉注射中分子量DS(分子量为15O00u),注射 剂量,方法同甲组.注射Ds后观察l5分钟内有无 兴奋不安,呼吸困准,抓鼻,耸毛,咳嗽,慷厥, 抽畜,昏迷以致室息死亡等症状. 四,正常人试用: I.低分子量DS针剂:100mg/ml,5mI/安瓿, 毒性试验台格,无热原,无细菌,药物过敏试验为 阴性结果. 2.对象:31名志愿受试者,年龄21,41岁,女 性2人,男性29人,身体健康,无过敏史,肝肾功 能正常. 对照组lO人,静脉滴注生理盐水-不用DS给 药组21人,静脉滴注DS,按给药剂量分成9组: 0.3,0.75,1.5,3-0,6.0,15.O,20.0,25.0 30.0mg/kg,其中15,25rag组各3人,20rag组9 人,其它各组1人. 另有1人注射DS15mg或2Om~/kg后1.5小时 开始用H~emoaetics30型血细胞分离器,从肘? -拓瑷煞码_100050 ,, 脉分离血中造血细胞.间隔3天进行第2次分离. 3.观察指标:凝血指标,肝肾功能等,给药 前及给药舌不同时『口]检查体温,呼吸,脉搏,血压 及心电,抽静脉血做血常就柱查,测定造血祖细 胞,包括CFU—GM,BFU—E和CF—GEMM. 结果 一 DS动员MNc和CFU—GM的效 果 给犬注射DS之前,静脉血中MNC计 数为(3.2?0.8)×10./L,给药后13,5 7,9N24小时各时间点血中MNC数被给药 前的值去除.得出MNC增加的倍数.分别 为给药前的1_73?0.29,1.94?0.46,2.00? 0.34,1.51?0.18,l_22?0.20和1.10-F0.26 倍. 给药前血中CFU—GM平均为24.7= 4.9/Z×10MNC.给药后1,35和7小时 血中cFu—GM产率分别为给药前的1.44? 0.20,1.59?0.132.04?0.31和1_37? 0.29倍.将各时间点的MNC和CFU—GM 增加的倍数相乘,即为每毫升血中CFU—GM 增加的倍数,分别为给药前的2.49,3.08 4.08和207倍. 结果 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明,给犬注射DS之后,循环血 中MNC和CFU-GM呈时相性变化,用药 后1小时开始增加,5小时达到高峰.分别 增加到给药前的2.00和4.08倍. 二小鼠LD.实验 注射DS后立即死亡的动物,多数死于 休克,给药后1,2天死亡的动物表现为注药 部位流血不止.7天内各组动物死亡分布情 况见附表.经微机处理,求出雄性小鼠LD.. 为1128.6mg/kg,95的上限为833.7 mg/kg,下限1484.Img/kg~雌性小鼠L. 为1369.4mg/kg,.95的上限为1030.2 mg/k下限为1871.1mg/kg雌雄之间的 差异无显着性. 三,DS的过敏反应实验 低分子量DS组动物,第14天结药后除 附表7天内各组动物死亡分布 给药剂量动物数给药后不商天数7天内 的死亡动物数 当天l 4】 2l 11 】1 O0 21 2O 1l 】】 oo 234,7死亡总数 2oo7 1oo4 loo3 o1o3 oooo 22o7 loo3 1oo3 ooo2 oooo 1只豚鼠出理轻度奋外.其余2j{和第2I 天给药的3只豚鼠均未见任何过敏厦应.判 定为阴性结果.注射中分子量DS纽动物. 第14天,21天给药后数分钟内均出现兴奋, 咳嗽尖叫,四肢无力,休克等症状.10分 钟后逐渐消失.此外,6只动物在给药后数 分钟时均出现耳廓远端及嘴尖部皮肤颜色变 暗,数日不褪,判定中分子量DS过敏宴验 为阳性结果 四,正常人体试用 1.DS动员MNC和造血祖细胞的效 果:由于目前尚不能直接测定人类造血干细 胞,一般采用计数MNC和涣4定CFu,GM 来说明DS动员造血干细胞的效果.本实验 室为了进一步观察DS的动员效果,同时测 定了BFU—E和CFU—GEMM. 注射DS前静脉血中MNC绝对值为 100%,用药后不同时间的MNC相对值呈 现有规律的变化.25mg/kg以下各组MNC 的升高幅度随DS剂量的增椰而增加,用药后 3小时为峰值.注射DS20m~/kg后3小时, 血中CFU-GM产率为用药前的2.1?0.3倍, 每毫升血中CFU—GM数为给药前的8倍; BFu—E产率给药后3小时为给药前的2.8= 蛳埘 ,雄2雌 器 官 3 09倍,每毫升血中BFU-E值为给药前的 105倍;CFU-GEMM产率给药后3小时为 绐药前的3.I=1.7倍每毫升血中CFU— L.EMM值为给药前的11.9倍.整体分离循环 造咀细胞2敬,共状得MNC3.8×10./kg, 0FU-GM3.1×i0/kg 2.DS的副怍用及其人体安全,有效剂 的判定:注射DS3~3Omg/kg,未见呼 脉搏,帆压千不心电图的变化,注射DS 36和30g/k未见体皿改变,15,2O和25 rag/kg组分别有2/3,1/"9和1/3的人在给药 后数小时出现一过性体温升高,但均在37.4 ?下.凝血指标中TT(凝血酶生成试验), 』T(凝血酶原时间),KPTT(白陶土部分凝 帆活酶时间)在注射DS152025和30 mg/kg后均出现了异常变化,其中TT在给药 后1小时最长7小时时趋于恢复,但仍不 正常.25mg/kg组有1/3的人PT,KPTT在 给药后24小时仍不正常,30mg/kg组有1人 在24]]x时时PT仍不正常.给药后1,4.7 天检查BUN,ALT(丙氨酸转氨酶,GPT), 30mg/kg以下组未出现BUN的异常变化, {N.30mg/kg组ALT从正常时的<~50Onmoi? S/L(30u)上升:117nmol?S/L(67 U). 其它指标,却外周血红细胞,血小板计 数,igE,E玫瑰花试验,淋巴细胞转化率 等均未见有意义的变化. 综上所述,注射DS25.30mg/kg的 4人中有2人PT,KPTT或PT在给药后 24小时未恢复正常,30mg/kg组1人出现 ALT一过性升高20mg/kg时有明显的动员 造血细咆的效果,因此可以判定DS对人体 的安全,有效剂量为15~20mg/kg. 讨论 硫酸葡聚糖是聚髓离子化台物,具有动 员白细胞,抗血凝,抑制肿瘤生长和转移, 活化脂蛋白酶,抗病毒和窿进B淋巴细胞有 丝分裂等作用,1958年作为抗血栓药列入英 -105? 国药典,1975年国内作为降血脂,防治动脉 硬化的药物批准生产,投放市场.1978年德 国乌尔姆大学Ross口 报告 软件系统测试报告下载sgs报告如何下载关于路面塌陷情况报告535n,sgs报告怎么下载竣工报告下载 了DS动员粒系祖 细胞进入循环血液的药效学作用,给犬静脉 注射该药后3,5小时血中粒系祖细胞的数量 增加到给药前的9倍,其分子量约90OOOu, 注射药量为15mg/kg.其后,Korbling等将 用DS动员的循环血造血干细胞治疗犬的急 性放射病,取得了良好效果.本实验室将DS 试用于人体,并取得初步成功,找到了安 全,有效的用药剂量为15~2Omg/kg,这可 能对推进造血干细胞动员剂DS的临床应用 起到积极作用. DS的毒副作用,动员干细胞的药物披 价与其分子量的大小有密切关系本文将低 分子量的DS给犬静脉注射使血中CFU- GM的数跫增至给药前的4倍,而分子量为 9n000u的DS,使血中CFU-(3M增加9 倍.Ds的主要毒副作用是破坏正常的凝血 机制[4).随着分子量的增大,用药剂量的增 加,可以出现肝肾功能,胃肠功能的变化, 表现为ALT,BUN一过性升高,恶心,呕吐 等,但是分子量为35000u的DS,在常规 用药剂量的情况下未见上述毒副反应.然而, 我们在研究中发现,判断DS能否应用于人 体的关键在于是否产生过敏反应,分子量低 于10O00u的DS不出现过敏反应,大于 10000u的DS刚容易出现过敏反应,而不 能用于人体. 在动物和人体同时应用分子量相同的 DS的比较中看到,DS的药理及毒理学作用 存在着种属差异.同样注射15,20mg/kg的 DS,犬的循环血中CFU-GM增加3倍,而 人增加7倍;给犬注射分子量约为35O00u 的DS不出现ALT升高,而给人注射低分 子的DS30mg/kg后3天,ALT从正常值 升高到1117nmo1.s/L.可见,人对DS比 动物敏感. DS动员造血千细胞旨在从循环血中获 得大量造血千细胞用于临床移植,治疗白血 ? 106? 病,恶性肿瘤和急性放射病等症.1988年 Korbli"B等'报告了34例血液病,肿瘤病患 者进行曰体循环血:f细胞移植的结果.作者 用阿糖胞甙和柔红霉素的动员造血千细胞作 用,在给药后适当时候用血细胞分离器分离 患者血中造血千细胞.平均每个患者分离l1 次(7---17次),获得CFU—GM1.4×10/kg. 我们进行整体分离试验,分离2次,所得 CFU—GM为3.1x10/kg,获得了较为满意 的结果. 致谢陈士懦,璐鞋兰,邱丽玲,戤小刚分别 承担部份实验研究工作,特此致谢. 参考文献 1.吴臼泽主编.造血干细胞秽植基础.第t版. 北京:^民卫生出版社,1988:353. 2.R?3WM.Thero1eofdextransulfate inincreasingtheCFLGMconcentration indogblood.ProcSocietyExpBiology Med,1978,157:30t. 3.KorblingM,eta1.Albumi~densit?gra— dientpurilicztiOnofeaaiaehemopoietlc bloodstemcellslloag—termallogenei~ engraftmentw~thoutGVHR.ExpHen!at, 1979,7:277. 4.张卿两,等.硫酸葡聚糖与肝素抗凝作用的比 较.中华血液学杂志,1987,8:678. 5.Korbl~ngM,eta1.Autolog~isbloodstem cell,transplaatatio~in34patients:its methodolg~caladvantageandlimlta;on. BongMarrowTra~sp,1988,3(Supp]1)j 51. 肾移植总:者的术后监护 中l司人民解放军成都军区昆明总医院泌尿外科. 刘齐责成.荣麻伟青熊德顺扬树才 我们自开展肾移植以来,患者术后I2小时内屎 量每小时平均在800~2000ml者共15例.肾移植术 后超大量输液的临床监护,其成败直接影响肾移植 术后患者的存亡,现将我们成功和失败的经验教训 总结 初级经济法重点总结下载党员个人总结TXt高中句型全总结.doc高中句型全总结.doc理论力学知识点总结pdf 报告如F. 15倒患者中,男3例J女l2倒,年龄21~55 岁供受者均为同型血,赫巴细取毒性试验1,5 者3例,6,1O者11例,15%者1例.诊断均 为慢性肾小球肾炎,病程2O天,5年.肾移植术后 l2小时以内屎量在81)1),1000ml/h者8铡,>l000 , l500mI/h者5饲,2000ml/h者2倒.12小时 内发生脱水者3例,水肿者4侧,水中毒者1僦, 正常者7厕 我们认为肾移植术后12小时之内m^量原则上 应相等.即术后12小时内,在单位时间内输液量的 多少与速度原则上等于屎量的多少与速度.但必须 掌握F列关系,根据病情变亿进行调齄:(1)中心 静脉压;(2)血压l(})屎量.中心静脉压,血压 都低说明血容量不够,应继续迅速补充血容量, 加快输液速度.中心静脉压正常或偏低,血压正 ,说瞬血容量基奉补足,这时可按屎量的多少与 速度进行正比例输液.中心静脉压正常,血压偏 低,可能是心功能欠佳或朴救量不足,可试行快速 输液冲击试验,即超过单位时问屎量的J倍,持续 10分钟.如中心静脉压明显增高而血压无明显变 化,应少输液量,并应用强心剂及抗酸药,待中 心静脉压辟,血压上升后,再维持正常补液速 度.中心静脉压增高,血压偏低,说明右心描血功 能降低,心功能差,应限制输液量,同时应用强心 剂治疗.-P心静脉压增高,血压增高,说翳心句能 良好,辅液过量,应限制轮渡速度及量 _蜘此趣大量的渡体输入,辕掖速度及量掌妊不 好,短时间内极易发生水肿,脱水,甚至发生水中 毒的严重后果,因此在掌握上述原则基础上辽必须 箱意观察患者的临床表现(1)水肿:患者首先袭 现为球结膜水肿下肢水肿先从足背,躁关节开 始.肾移祖术后输液控制不好其临床变化迅速,出 现脉搏增使颈静脉怒张,血压增高,脉压差增 太,心音增强.(2)脱水{出现眼球凹陷,皮肚无 弹性塌陷,静酥蔓陷,血压低(3)求中毒是束 肿的进一步恶化,袭现为脑承肿,肺水肿及球结膜 水肿,分泌物增多 肾移植术后的世上量输液必须建立2,3十输液 通道,才能顺利将波体输入体内,"保持出入量的 动态平衡以及应付各种突发情况.因此 设计 领导形象设计圆作业设计ao工艺污水处理厂设计附属工程施工组织设计清扫机器人结构设计 建立输 渡通道必须遵守有一个近心通道和1—2个远心通道 的原则. -邮敢端码{650032