响应面——满意度函数优化复合酶法提取野木瓜汁工艺的研究
响应面——满意度函数优化复合酶法提取
野木瓜汁工艺的研究
2011NO.9
?88?SerialNo.234ChinaBrewingR
esearchReport
响应面——满意度函数优化复合酶法提取野木瓜汁工艺的研究
王雅臣,王明力,王丽娟z,袁志
(1.贵州省发酵_q2程与生物制药重点实验室,贵州贵阳550003;2.贵州大学化学与
化工学院,贵州贵阳550003)
摘要:为了提高野木瓜出汁率和野木瓜汁含糖量,采用复合酶法提取野木瓜汁,用
响应面——满意度函数分析法进行优化.结果表
明,最佳酶解工艺参数为每lOOg果肉打浆3HTk80mL,复合酶(纤维素酶与果胶酶
添加比例为4:1)添加量O.
170%,调整pH值为4.0,存
45?处理4h,野木瓜出汁率为76.0%,野木瓜汁含糖量达N7.77%,均高于空白样.
关键词:响应面;满意度函数;野木瓜;复合酶
中图分类号:TS275.5文献标识码:A文章编号:0254—5071(2011)09—0088—05
OptimizingcomplexenzymaticextractionofChaenomeleseathayensisjuicebyresponsesur
facemethodology
combinedwithdesirabilityfunctionanalysis WANGYachenII2jWANGMingli,WANGLijuan2,YUANZhi 《1.GuizhouKeyLaboratoryofFermentationEngineeringandBiologicMPharmacy,Guiy
ang550003,China;
2.CollegeofChemistryandChemicalEngineering,GuizhouUniversity,Guiyang550003,c
hina)
Abstract:InordertoincreasetheyieldandsugarcontentofChaenomelescathayensisjuice,cc
athayensisjuicewasextractedbycomplexenzymoly—
sis.Theextractiontechnologywasoptimizedbyresponsesurfacemethodologycombinedwi
thdesirabilityfunctionanalysis.Theresultsshowedthat theoptimumconditionsforenzymaticextractionofCcathayens~juicewereasfollows:80ml
waterper100gpulp,0.170%complexenzymefcellu
lose:pectinase=4:1),pHvalue4.0,enzymolysistemperature45?
andenzymolysistime4h.ThejuiceyieldofC.cathayensiscouldreach76.O%,and thesugarcon~ntofC.cathayensisjuicecouldreach7.77%.Boththejuiceyieldandsugarconte
ntweremuchhigherthancontro1.
Keywords:responsesurface;desirabilityfunction;Chaenomelescathayensis;complexenz
yme
野木瓜(Chaenomelescathayensis)属蔷薇科贴梗海棠
灌木丛植物,植物学上分类属于毛叶木)k~[Chaenomeles
cathayensis(Hems1.)Schneid.],是贵州省遵义正安县独有
的天然特产资源【野木瓜皮薄,肉厚,气香,品质优良,
中医记载其味甘,平,归心,肾二经,有强心利尿,驱虫止
痛之功效闭.现代研究表明,野木瓜含有丰富的有机酸,
果胶,蛋白质,多种氨基酸维生素和矿物质,还含有多糖,
皂苷,黄酮,超氧化物歧化酶等活性成分『41,是理想的保
健食品.
野木瓜果肉硬度大,酸涩味重,小适合鲜食,利』_{j酶处
收稿日期:2011一O419
基金项目:贵州省社会发展攻关项目((2009)一3010)
作者简介:王雅臣(1986一),男,在读硕士研究生,研究方向为食品科学;王明力,教授,
通讯作者.
表3正交试验结果方差分析
Table3.Varianceanalysisofoahogonalexperimentresults 3结论
(1)微波处理小麦蛋白胶黏剂制备啤酒标签胶4个因
素的影响大小为料液tg>微波功率>处理时间>处理温度. 且因素A料液比对各指标影响高度显着,影响最大.
(2)微波处理小麦蛋白标签胶黏剂制备啤酒标签胶的
最佳工艺条件为处理温度80~C,料液比l:4.5,微波功率
600W,处理时间90rnin.
参考文献:
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总第234期?89?
理可以破坏野木瓜果肉中的果胶,纤维素,淀粉等大分子
物质形成的网络结构,提高出汁率和榨得野木瓜汁的含糖
量,同时也可以最大限度地保留营养成分阁,便于进一步 加工.笔者采用纤维素酶与果胶酶组成的复合酶处理野木 瓜鲜果,在单因素试验基础上以出汁率,榨得野木瓜汁的 含糖量为考核指标,应用响应面设计及满意度函数法分析 试验数据,研究复合酶法提取野木瓜汁的最佳工艺条件. 1材料与仪器
野木瓜鲜果:贵州省遵义正安县天然资源野木瓜,8, 9月成熟采收.
果胶酶:酶活力20000U/g(上海蓝季科技发展有限公 司),纤维素酶:酶活力30000U/g(上海蓝季科技发展有 限公司).
所用化学试剂均为分析纯.
wY080ST手持折光仪都万辰光学仪器厂),JM.W65 小型胶体磨(温州市七星乳品设备厂),FAI604电子精密天 平(苏州江东精密仪器有限公司),JYL.C051九阳料理机 (九阳股份有限公司)等.
2试验方法
2.1酶法制备野木瓜汁工艺流程
野木瓜鲜果一清洗一削皮,去籽一切丁一热烫一打浆一酶 处理一过滤一野木瓜汁一杀菌一冷却,冷藏备用 2.2工艺要点说明
2.2.1原料处理
挑选8,9成熟的野木瓜,去皮,去籽,去瓤,切成1cm3 大小,投入95?的热水中热烫2rain,使破碎后的野木瓜不 易发生酶促褐变,保证野木瓜汁的品质.
2_2-2果浆的制备
处理后的野木瓜果肉加入适量的水进行打浆,得到野 木瓜果浆.
2-2.3果汁的制备
经酶处理的野木瓜果浆,用120目双层滤布进行抽滤, 再用手挤压,以不出汁为准.
2_3野木瓜果浆最佳酶解工艺条件的确定
2_3.1测定方法及出汁率的计算
野木瓜果肉经加水打浆后,分别加入各种单一酶和 复合酶,在一定条件下进行酶解处理后取汁,出汁率计 算公式:.
出汁率(%)=f(总汁液重.加水量)/果肉重]x100% 还原糖(以葡萄糖计)含量测定:采用GBT5009.7—2008 中的直接滴定法.
23I2单因素试验
分别考察了纤维素酶与果胶酶的添加比例,复合酶添 加量,酶解温度,酶解时间,pH值对野木瓜果肉出汁率和 野木瓜汁含糖量的影响程度,及各因素的适用条件. 100g野木瓜果肉加水80mL打浆后添加0.1%的复合 酶,在pH值为4.0,45%保温4h,分别考察纤维素酶与果胶 酶添加比例1:1,2:1,3:1,4:1,5:1对野木瓜果肉出汁率和野 木瓜汁含糖量的影响.同时做空白试验:不添加酶,单独 添加纤维素酶,单独添加果胶酶进行对照.
100g野木瓜果肉加水80mL打浆后,按纤维素酶与果 胶酶比例4:1添加复合酶,在pH值为4.0,45~C保N4h,分别 考察不同复合酶添加量0.05%,0.1%,0.15%,0.2%,0.25%
对野木瓜果肉出汁率和野木瓜汁含糖量的影响. lOOg~木瓜果肉加水80mL打浆后,按纤维素酶与果胶 酶比例4:1添3no.1%复合酶,调整为pH值为4.0,在一定温度 保温4h,分别考察不同酶解温度30%,35?,40%,45cI=,50?, 55?,60?对野木瓜果肉出汁率和野木瓜汁含糖量的影响. 100g野木瓜果肉加水80mL打浆后,按纤维素酶与果 胶酶比例4:1添3no.1%复合酶,在45%保温一定时间,分别
考察不同酶解时间lh,1.5h,2h,2.5h,3h,3.5h,4h,4.5h,5h
对野木瓜果肉出汁率和野木瓜汁含糖量的影响. 100g野木瓜果肉加水80mL打浆后,按纤维素酶与果 胶酶比例4:1添加0.1%复合酶,在一定温度保温4h,分别考 察pH值为3.0,pH值为3.5,pH值为4.0,pH值为4.5,pH值为 5.0对野木瓜果肉出汁率和野木瓜汁含糖量的影响. 2.3.3响应面优化试验
以纤维素酶与果胶酶的添加比例,复合酶添加量,酶 解时间3个对野木瓜果肉出汁率和野木瓜汁含糖量影响 比较大的因素,采用Box.Behnken试验设计优化复合酶法 提取野木瓜汁的工艺,试验因素水平见表1.
表1Box—Behnken试验因素水平编码
Table1.FactorsandlevelsofBox-Behnkendesign
2-3.4数据处理
由于试验为多因素多相应的优化试验,所以采用满意 度函数法将每个响应转换成满意度函数网,出汁率和果汁 含糖量都属于望大特性,其满意度函数定义:
f0Y(x)<--L,
(x))I]器L---Y_o.…(1)
l1Yi(x)兰,Of).
其中,di是第i个响应的满意度函数,?为第i个响应 值,为第i个响应值的规格下限,Y,()()为第i个响应值 所不能超过的特定值(目前技术条件所允许达到或者达到 该点后增加响应值不能明显的改进产品质量).之后求出 各响应对应的满意度值:
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d(d?,d,…,d(2)
其中,k为试验序号.再计算出满意度的协方差矩阵S 和相关系数矩阵R.
根据响应相关性的不同,采用不同的优化模型.如果相 关性不强,可以用各个响应的满意度函数的几何平均定义 为多响应问题的总体满意度函数;如果相关性强,可以求 出协方差矩阵S的特征值九与主成分z,用加权主成分分析: Mk=z1[九I/(l+2)】+z2[X2/(1十)】.(3)
利用Minitab15.0软件求得Mk的拟合方程,从而得出 最佳工艺参数嘲.
3结果与分析
3.1单因素试验分析
3.1.1纤维素酶与果胶酶的添加比例的影响
纤维素酶与果胶酶酶活力与作用存在差异,由图1可 以看出,其添加比例不同,对野木瓜果肉出汁率和野木瓜 汁含糖量都有较大影响,在比例为4:1的时候,出汁率达 ~1J72.84%,木瓜汁含糖量也相对较高,有7.25%.选择比 例3:1--5:1进行优化试验.
图1复合酶不同添加比例对出汁率的影响
Figure1.Effectofdifferentcomposi~onsofcomplexenzymeOn
juiceyield
在同等条件下与不加酶的空白样进行对照,空白样出 汁率为51.4%,木瓜汁含糖量为2.67%.由此充分说明酶的 添加,有助于提高野木瓜果肉出汁率和果汁含糖量. 在同等条件下与单独添加纤维素酶和单独添加果胶 酶的样品进行对照.添加纤维素酶时,出汁率为65.5%,木 瓜汁含糖量为5.45%,添加果胶酶时,出汁率为63.4%,木瓜 汁含糖量为4.67%;由此充分说明果胶酶与纤维素酶组成复 合酶对提高野木瓜果肉出汁率和果汁含糖量有明显作用.
3.1.2复合酶添加量的影响
由图2可以看出,复合酶添加量对酶解效果有很大的 影响.当复合酶添加量>O.15%时,出汁率>73%,复合酶 添加量达到0.20%时,木瓜汁含糖量达到7.5%,继续增大 复合酶添加量,出汁率和果汁含糖量都趋于稳定.为了节约 酶用量进而节约成本,选择复合酶添加量在0.15%~0.20% 进行优化试验.
图2复合酶添加量对出汁率的影响
Figure2.EffectofadditionamountofcomplexenzymeOI3juiceyield
3.1-3酶解温度的影响
由图3可以看出,在45%时,出汁率和果汁含糖量都达剑 最大值.纤维素酶与果胶酶最适温度都为45?,温度过高, 酶活力会下降,影响酶解效果,且温度过高,野木瓜汁颜色 由鲜亮变暗.所以将酶解温度定为45oC,不再进行优化. 丑
图3酶解温度对出汁率的影响
Figure3.Effectofenzymolysistemperatureonjuiceyield
3.1.4酶解时间的影响
由图4可以看出,酶解时间对酶解效果有很大的影响. 酶解时间达到4h,出汁率和果汁含糖量增加趋于平缓,处 于节省工艺时间考虑,在3.5h,4.5h进行优化. 图4酶解时间对出汁率的影响
Figure4.Effectofenzymolysistimeonjuiceyield
印0
研究报告中国酿造2011年第9期
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3.1.5pH值的影响
由图5可以看出,复合酶处理野木瓜浆的最适pH值为 4.0.pH值过低,过高,都会影响酶的活性,且影响较明显,
故选择pH4.0为酶解pH值,不再进行优化.
料
pH值
图5pH值对出汁率的影响
Figure5.EffectofpHvalueonjuiceyield 皿
如
3-2响应面优化试验结果分析
以纤维素酶与果胶酶的添加比例(A),复合酶添加量
(B),酶解时间(c)3因素为自变量,出汁率(Y.),木瓜汁含
糖量(Y2)为响应值,应用Minitab15.0软件进行Box—Behnken 试验设计,试验见表2.
表2Box—Behnken试验设计结果
Table2.ResultsofBox-Behnkendesign 3.2.1满意度函数的计算
将表3中Yl,Y2的试验数据代入公式(1)中.根据试验
数据,令其中L.=70.0,Y.,(x)=80.0,L2==7.00,Y2,一(X)=
8.00,计算结果代入公式(2)得到Y.,Y:对应的满意度:
dl=(0.58,O.53,0.15,0.37,0.41,O.56,0.51,0.43,0.31,0.61,
0.57,0.51,0.32,0.49.0.58). d2=(0.69,0.55,0.17,0.45,0.27,0.82,0.63,0.38,0.37,0.65,
0.71,0.62,0_33,O.59,0.76)To 计算d与d2的协方差矩阵S及相关系数矩阵R:
『0.001677210.0225271\f10.900\ S10.02252710.0373638)?R10_9001J 由此可见,d与d2之间的相关性较强,所以应该进行
主成分分析.
3-2-2加权主成分的计算
l=0.051836,九2=0.0023.
u1=(0.540516,0.841334),t12=(0.841334,.0.540516).
得到的主成分为:
l=O.540516xdl+0.841334xd2,
=O.841334xdl一0.540516xd2.
将上述所求代入公式(3),即可得到对应的Mk值.
Mk=(0.861,0.724,0.216,0.557,0.438,0.952,0.775,0.535,0.461, 0.847,0.871,0.767,0.435,0.733,0.917)
3.2.3加权主成分二次回归模型的建立
以M为响应值,利用Minitab15.0软件对其与A,B,C进
行二次多项式拟合,并获得二元回归方程:
M=0.905253+0.118901A+0.099217B+nl17686C.0.087273AB+ 0001957AC+0.025873BC.0.043483A0194987B.0.】97653C
表3回归模型系数显着性检验
Table3.Significancetestofcoefficientsinregressionmodel 表4回归方程的方差分析
Table4.Varianceanalysisofregressionequation
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.
一
Il【】_0.
r
图6各因素相互作用对出汁率影响的响应曲面图
Figure6.Responsesurfaceplotshowingtheinteractiveeffectsofcompositionofcomplexenz
yme(A),additionamountof
complexenzyme(13)andenzymolysistime(C)onjuiceyield 对模型(表3,表4)进行分析,由表3可知,各因素对酶
解效果的影响大JJ,/il~序为A>C>B.A,B问交互作用相
对显着.其决定系数R2=90.32%,说明二次多项式回归效果 比较好.由表4可知,失拟项p=0.131>0.05,说明二次多项 式回归模型正确.
3-2.4最优工艺的确定
对回归方程取一阶偏导为零,求解为(0.00,.0.80,.0.80),
即纤维素酶与果胶酶添加比例为4:1,复合酶添加量为 0.170%,酶解时间3.9h.在优化条件下再重复试验3次,野木 瓜果肉出汁率达~JJ76.O‰野木瓜汁含糖量达到7.77%,与预 测值较符合.
4结论
4.1以野木瓜果肉出汁率,榨得野木瓜汁的含糖量,在单因 素分析基础上,建立了纤维素酶与果胶酶添加比例,复合 酶添加量,酶解时间3个因素的回归方程,此模型在试验范 围内能较准确地预测酶解效果.
4.23个因素对酶解效果的影响大小顺序为纤维素酶与 果胶酶添加比>酶解时间>复合酶添加量.
4_3复合酶(纤维素酶与果胶酶比例为4:1)最佳酶解工艺 参数为每lOOg果肉打浆加水80mL,调整pH值为4.0,添加 复合酶0.170%,酶解温度45cc,酶解时间3.9h.在此最佳条 件下,野木瓜出汁率为76.O%,比空白样的51.4%多22.6%, 野木瓜汁含糖量达到7.77%,比空白样的2.67%多5.10%,极 大地提高了野木瓜果肉出汁率和野木瓜汁含糖量,说明复 合酶法辅助提取野木瓜汁是切实可行的.
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