乳酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶比色法)
产简介：
乳酸(Lactic acid，LD)又称2-羟基丙酸是一种化合物，是一种含有羟基的羧酸，分子式是C3H6O3，参与生物化学很多反应过程。乳酸检测有化学氧化法、酶催化法、电化学法、酶电极感应器法。
乳酸检测试剂盒(乳酸脱氢酶比色法)其检测原理是在NAD存在条件下，乳酸脱氢酶(LDH)催化乳酸生成丙酮酸，同时生成NADH。在碱性条件下显色剂与丙酮酸生成复合物，并使平衡偏向乳酸氧化为丙酮酸的方向，驱动反应完成，生成的NADH与乳酸为等量摩尔。通过分光光度比色法测定340nm处吸光度，据此通过比色分析就可以计算出LD水平。
组成：
自备材料：
1、 离心管或小试管
2、 蒸馏水
3、 水浴锅或恒温箱
4、 比色杯
5、 分光光度计
操作步骤(仅供参考)：
1、 准备样品：
血浆、血清、尿液及其他体液样品：血浆、血清按照常规方法制备后可以直接用于本试剂盒的测定，尿液通常也可以直接用于测定，-20℃冻存。
细胞或组织样品：取恰当细胞或组织裂解液，如果有必要需进行适当匀浆，低速离心取上清，-20℃冻存，用于LD的检测。
高浓度样品：如果样品中含有较高浓度的LD，可以使用原有的裂解液或PBS等进行稀释，如鸡血清、血浆可稀释5～10倍后检测。
2、 配制标准品工作液：4℃避光保存2个月有效。
3、 LD检测：按照下表设置空白管、对照管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。如果样品中的LD浓度过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。样品的检测最好能设置平行管。
4、 用分光光度计检测，以蒸馏水调零，比色杯光径1.0cm，读取空白管、对照管、标准管、测定管的340nm吸光度(即A空白、A对照、A标准、A测定)，一般应数小时内检测完毕。
计算结果：
血清、血浆、尿液、脑脊液乳酸(mmol/L)=｛(A测定?A对照)/(A标准?A空白)｝×5
组织乳酸(mmol/g)=｛(A测定?A对照)/(A标准?A空白)｝×5/待测样品蛋白浓度(g/L)
参考区间：
健康成年人安静状态空腹静脉血
0.6～2.2mmol/L
健康成年人安静状态空腹动脉血
0.3～1.47mmol/L
健康成年人尿液乳酸排出量
5.5～22mmol/d
新生儿毛细血管血
1.2～4.4mmol/L
0～16儿童脑脊液
1.1～2.8mmol/L
注意事项：
1、 本法适用于自动分析仪，分别监测测定管和标准管的吸光度升高速率，计算乳酸的浓度。
2、 如果没有分光光度计，也可以使用酶标仪测定。
3、 抗凝剂用肝素钠-氟化钠较好。抗凝血样品置于冰浴中送检，尽快分离出血浆等。
4、 草酸抗凝剂对LDH有一定的抑制作用。
5、 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：6个月有效。
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