北京地区艾滋病病毒感染的同性恋个体中病毒亚型分析

北京地区艾滋病病毒感染的同性恋个体中病毒亚型分析 ·疾病控制· 北京地区艾滋病病毒感染的同性恋个体中病毒亚型分析姚均张福杰何忠平赵红心李兴旺冯鑫徐克沂我们对!""#年以来的!$例同性恋感染者的血液样本进行了艾滋病病毒（%&’(!）亚型分析，以便了解北京市同性恋人群%&’(!的亚型分布、传播来源、流行时间和发展趋势。 !)材料与方法：（!）研究对象及样本：所有研究对象的血液样本均来自北京市的%&’(!抗体阳性经同性恋途径感染者。每名对象首次就诊时采集*+,全血，使用-./012公司-.3/+45,667 试剂盒，按说明提取细胞8...

·疾病控制· 北京地区艾滋病病毒感染的同性恋个体中病毒亚型分析姚均张福杰何忠平赵红心李兴旺冯鑫徐克沂我们对!""#年以来的!$例同性恋感染者的血液样本进行了艾滋病病毒（%&’(!）亚型分析，以便了解北京市同性恋人群%&’(!的亚型分布、传播来源、流行时间和发展趋势。 !)材料与方法：（!）研究对象及样本：所有研究对象的血液样本均来自北京市的%&’(!抗体阳性经同性恋途径感染者。每名对象首次就诊时采集*+,全血，使用-./012公司-.3/+45,667 试剂盒，按说明提取细胞893，核酸样本冻存于:$;<。（$）聚合酶链反应（=>?）：采用套式=>?方法扩增%&’( !12@基因，引物设计参照文献［!］。以A8#／A8!B为外侧扩增引物进行第一轮=>?反应，条件为"B< $+.2，**< !+.2，C$< #+.2，#个循环；"B< #;D，**< B*D，C$< #+.2，#$个循环；C$<延伸*+.2。以A8*／A8!$为内侧引物进行第二轮=>?，条件为"B<$+.2，**?产物的纯化：第二轮=>?产物经!E琼脂糖凝胶电泳，与893 标准分子量F/GH1G对照判定无误后，切下特异扩增带，用-./012公司的-./1I试剂，按说明提纯扩增的 %&’(!893片段。" 893序列测定：以提纯的=>?产物为模板，用35&公司荧光标记末段终止物循环测序试剂盒，在=A公司"J;;型=>? 仪上进行测序反应，样本用量约!0，引物12@(8 用量 J4+6,／K，反应产物经提纯后用35&公司#CC型893序列测定仪进行序列测定。#系统树分析：测得的序列的同源性分析及亚型确定，使用=LM,.4软件包完成。 $)结果：应用巢式=>?方法从!$例%&’(!阳性者外周血单核细胞（=5F>）样本中获得了可用于序列测定的%&’(! 12@目的基因片段，将这!$个样本的核苷酸序列分别与国际标准的亚型（3$A）的核苷酸序列进行比较并用8.DN/2O1程序计算彼此间的基因离散率，结果发现!$个样本与3、>、8、 A亚型共享序列间的基因离散率均在$*E以上，而与5亚型的共享序列间基因离散率仅为!!)$*EP#)JE，与流行于泰国5亚型的代表株 Q%!B的基因离散率为!C)BBEP $)*;E，而与流行于欧美5亚型代表株RS!J$的基因离散率仅为!;)T#EPB)*#E，与其亚型内的基因离散率!;)#*EP $);JE十分接近。进一步的系统树分析显示，!$个样本与5 亚型共享序列聚在一起并远离其他国际亚型（图!），并且!$ 个毒株与RS!J$紧密相连而与国际5亚型共享序列和泰国基金项目：首都医学发展科研基金资助项目（U8!"""!B）作者单位：!;;;!!北京地坛医院艾滋病临床研究中心 5亚型代表株Q%!B可以分开，证明这!$个样本确实为欧美 5亚型。图! 北京市!$例同性恋人群%&’(!的系统树分析 #)讨论：!"T!年在纽约、旧金山的同性恋群体中首先发现艾滋病，随后造成广泛流行，我国于!"T*年在来华旅游者中发现首例艾滋病后，!""$年在同性恋群体中发现%&’(! 感染者，现场流行病学调查显示，北京同性恋群体中的%&’( !感染者，有涉外同性恋史，本研究首次从分子流行病学角度加以证实。从我们对北京市!""#年以来!$份%&’(!阳性同性恋者=5F>样本的%&’(!前病毒893的>$$’#区序列进行分析后，发现这!$份样本均为5亚型，且全部属欧美 5亚型，而$例早期感染者的5V;!和5V;C与欧美5亚型代表株RS!J$的基因离散率仅为;)*TE和;)T#E，现场流行病学资料也显示这$例中的!例曾与瑞典人有同性恋关系，! 例曾居住美国多年，这从两方面证实了北京市同性恋%&’(! 感染来源确实为欧美传入。又%&’(!流行区毒株的基因离散率平均每年以;)*E$!E的速率增大，从北京市同性恋人群5亚型内的基因离散率可推断其流行时间已数年，这也与早期的现场流行病学调查结果一致。参考文献 ! 81,W/GNAK，RL6X1GSA，F1OXNOL/2V，1N/,)Y121N.OG/,/N.62DL.4 71N1+.2.217ZM/893L1N1G67X4,1I+6Z.,.NM/DD/M：/2/,MD.D6[%&’( !12@0121D)RO.12O1，!""#，$J$\!$*C(!$J!) （收稿日期：$;;$(;$($;）（本文编辑：尹廉） ·"*!·中华流行病学杂志$;;#年$月第$B卷第$期 >L.2VA4.71+.6,，S1ZGX/GM$;;#，’6,)$B，96)$ 万方数据

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