3种抗凝全血对网织红细胞染色结果影响的观察
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文章编号:1007—4287(2005)05—0818一O1 cIlinJLabDi哪.October.2005.v0l9.No.5
3种抗凝全血对网织红细胞染色结果影响的观察 沈亚文,郑宏图,梁艳玲,李凤芹
(1.四平市中心医院检验科,吉林四平136000;2.梨树县第二人民医院检验科;3.梨树
县中医医院检验科)
网织红细胞(reticulocyte)是介于晚幼红细胞和 成熟红细胞之间尚未完全成熟的红细胞.因其质内 尚存留多少不等的嗜碱物质,RNA,经煌焦油蓝活体 染色法染色后,嗜碱物质凝聚成颗粒,其颗粒又可联 缀成线,而构成网织红细胞.网状结构愈多,
表
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示该 细胞越幼稚,将其分成一,二,三,和四级.通常网织 红细胞比成熟红细胞稍大,直径为8—9.5tma.测 定其数量,型级对监测骨髓移植,急性髓系白血病药 物治疗后的恢复,诊断和监测贫血,监测人类红细胞 生成素有重要价值n】.
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操作程序中要求采集新 鲜血液标本直接进行网织红细胞活体染色L2J.目前 多数医院已使用抗凝全血标本进行全血细胞计数和 细胞形态学检查,为证实上述3种抗凝全血标本是 否适用于网织红细胞活体染色,笔者进行了新鲜血 与EDTA抗凝全血,肝素抗凝全血,枸橼酸钠抗凝全 血标本的网织红细胞活体染色计数结果的比较. 1材料与方法
1.1主要试剂和仪器试剂
煌焦油蓝染液:北京化学试剂厂.米勒窥盘计 数器:大连华文科技公司.光学显微镜:OLYMPUS 公司,日本.恒温水浴箱:北京医疗器械厂. 1.2方法
1.2.1试剂配制煌焦油蓝1.0g,柠檬酸钠0.4g, 氯化钠0.85g,双蒸馏水加至100rnl,完全溶解后过 滤储存棕色瓶内备用.
1.2.2标本采集与制片静脉采血,先取数滴血液 按1:l的比例加入煌焦油蓝盐水染液中,混匀,再将 其余静脉血分别加入EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝管 中,立即混匀.将3种不同抗凝全血分别加入煌焦 油蓝盐水染液中,按l:l的比例混匀,贫血时可适当 增加血液量,室温过低时放37c【=温箱,待30min后 各制备两张血涂片.涂片要求薄厚适宜,细胞分布 均匀.
1.2.3凉干后镜检.独立结果判断标准与报告方 式参照文献l2],因网织红细胞体积大,固应兼顾血涂 片的边缘和尾部.
1.2.4统计学处理所用数据均以;?s表示,t 检验.
2结果
新鲜血与抗凝血网织红细胞数值的比较:用3 种抗凝血与煌焦油蓝盐水染液制备的血涂片分别进 行网织红细胞形态观察及计数,其百分率与新鲜血 涂片的染色结果无明显差异(P值均大于0.o5),结 果见表l.
表1新鲜血与3种抗凝血网织红细胞数值的比较(%) 注:1.均以新鲜血为标准,与EDTA,肝素,柠檬酸钠抗凝血比
较.2.新鲜血与抗凝血均为同一人标本.
3讨论
实验结果表明,用EDTA,肝素,枸橼酸钠抗凝 血与煌焦油蓝盐水染液制备血涂片进行网织红细胞 形态观察及计数,其百分率与新鲜血的染色结果接 近,因此临床上可用EDTA,肝素,枸橼酸钠抗凝血 替代新鲜血制备血涂片进行网织红细胞染色.从 50例临床标本实验分析,如抗凝剂为液体时,染液 与抗凝血的比例应大于l:l或制片时偏厚些.禁止 抗凝血溶血,凝血,冷冻.
参考文献:
[1]邓家栋,主编.II缶床血液学[M].第1版.上海:上海科学技术出版
社,2001.374,375.
[2]叶应妩,王筑三,主编.全国临床检验操作
规程
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[M].第2版.南 京:东南大学出版社,1997.14—16.
(收稿日期:2004—12—12)
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