【doc】急性脑缺血超微结构观察大鼠颈动脉结扎后病理改变

【doc】急性脑缺血超微结构观察大鼠颈动脉结扎后病理改变 急性脑缺血超微结构观察大鼠颈动脉结扎 后病理改变 第12卷第2期 1990年4月 中国医学科学院Voi12.No.2 ACTAACADEM]AEMEDlC】NAES[NJCAEApril.1990 急性脑缺血超微结构观察 大鼠颈动脉结扎后病理改变 郭玉璞严徽瑾杨蜀莲高淑芳 陈厚兰赵惠敏代园固 (协和医院,北京) 脑卒中是危害人袭健康最常见疾病之一,其中以不同程度的缺血性脑血管病占多数(0,a0面).为研 究防治缺血性脑血管病,制备实验性脑缺血动物模型,以便观察其生理生化相脑组织病理改变,探索和 寻技疗治措施.本文 报告 软件系统测试报告下载sgs报告如何下载关于路面塌陷情况报告535n,sgs报告怎么下载竣工报告下载 了结扎双侧大鼠颈总动脉后(120,18omin)遣成急性脑缺血后组织病理印超徽 结构的改变. 材料与方法 一 结扎氟喇颈总动脉囊性睦血性实验大鼠12只,雌雄各半.体重180~250g,动物山医学科学院 动物中心提供,戊比妥钠(4oomg/kg)腹腔内注射麻醉后.仰卧位固定于鼠台上.头骨针电微描记脑也 图,铜部正中叼L]分离出两侧伴有神经的颈总动脉,分三组进打实验 1.对照组t太白鼠4只.经麻醉分离出预总动脉但未结扎作脑也描.与实验组同时断头处死.取 脑固定于3嘶戊二醛内. 2.验组It大白鼠6只.其中2只结扎颈总动脉后2Omln,描记脑电.脑电活动低平,汪明有缺 血性改变.于120min后.结柬实验.断头处死动物,取脑固定于3嘶戍二醛内.其余4只未作脑电. 故未作病理观察. 3.实验组I:大白鼠6只,结扎颂总动脉后2Omin描记脑电圈脑电低平,证宴有缺血性改变. 于180min后结束实验.断头处死动物,墩脑固定于3嘶戊二醛中. =,随电描记在大鼠冠状缝旁前相当于皮层感觉运动区礼顶叶后部.安放针电极,扎透颅接近硬膜 深度,刷牙科粘台剂固定.参考电极安放在鼻骨正中,用RMSH型八道脑电图仪和日术光电5210型脑电 图仪描记,均于结扎前.悟20rain.进行描记. 三,坦飙龠理技术将固定于3面戊二醛液内的鼠脑,冠状切片法,每片1,2mm.常规石蜡包埋,HE Weil氏染色.另取脑双侧皮层感觉运动区.环氧树脂618包埋.分别半薄切片(1p.m).田苯胺蓝(TB)染' 色,光镜现察和超薄唧片,枸磷酸铅和醋酸铀染色,H6oo透射电镜观察 结果 一 . 脑电田描记结果对照组,大鼠4只均切开皮肤暴露领总动脉,但未结扎.脑电图描记未见异常, 实验组I大鼠2只和实验组1大鼠6只,共8只均于颈总动脉结扎后2Omln出现脑电图改变.波幅低 平.渡率变慢等明显缺血性改变,见另文报道. =.光镜观寨无论是石蜡包埋.HE染色相髓鞘染色忉片.半薄切片甲苯胺蓝染色,在光镜下观察 率文于198B年10月ll口收到j中国胁和医科大学生理教研室 2期急佳脑缺血超微结构观察大鼠颈动脉结扎后病理改变151 见对照组4只大鼠的皮层组织细胞等均来见异常.实验组I太强2只.HE染色均示神经细胞和小血 管周围同隙扩大.TB染色.可见少数神经细胞淡染,胞体稍大.偶见浓染.胞悼较小,呈蚨血性改变. 其余大部分神经细胞.未见明显异常.实验组16只大鼠皮层细胞的病理改变与实验组I基本相,均 见少数神经细胞呈淡染和深染皱绾细胞及血管间隙变宽的现象. 三.电镜超徽结构改变 对照蛆的血管内皮细胞基底膜和外蟆及其周围结构等都未见异常.神经细胞核摸清楚,棱内异染质羊u常染 质分布正常.桉周可见饯粒体,高尔基氏器,内织嘲和核糖体等,其形态和分布均正常.细胞膜及其周围相 郜结构.细胞突起(树突和轴突)等也来见异常.星形细胞和少{对突肢质细胞的核膜核染质均正常.胞浆 内细胞器结构正常,细胞体来见舯大,胞膜清楚.突起未见承肿和8中胀.神经纤维网(neuropiI)~H皮层下白 质区的有髓纤维和树突结构未见异常.突触结构清楚正常. 实验蛆I和I的超微结构所见,两组无差剐,血管内度细胞线粒体忡胀.胞浆饮液小泡稍增多,管腔 变小变窄,血管外膜外间隙变宽.尤其可见到肿胀和水肿的肢质突起围绕于血管外埘(1).神经细胞改变. 分轻.重两型.轻型仅示桉周细胞器的线粒体肿胀和空化.内织网扩大呈池状.细胞周围胶质纤维增生突 起呈轻度忡胀水肿.重型示细胞皱缩,浓染.梭染色质聚集.细胞体变小.变窄.胞浆内细胞小器结构不清. 嗜锇酸物质增加,细胞局围星形细胞突起肿胀水忡明显呈空泡样改变(图2).胶质 细胞改变明显特别是星形 细胞胞体种胀.内织同扩大变宽呈空泡状,线粒体可见肿大空化或皱缔深染(图3).白质有髓纤维间隙变宽.胶 质纤维明显东肿(图4). 讨论 研究急性脑缺血动物模型文献较多,各家所得结果不尽相同,可能与选择动物和实验条件不同有关一?. 本文为急性脑缺血塞验,结扎双侧颈总动脉,造成脑缺血.本实验分三组即对照组,实验组I(120rain) 和实验组1(180min).两个实验组结果相似.其腐理改变特征神经细胞呈细胞毒性改变.轻者为线粒体 肿大.空化,内织网扩张呈池状;重者神经细胞呈缺血性固缩性细胞病变,细胞周边水抻明显是星形细胞 突起水呻所致.血管改变仅见内皮细胞线粒体肿大发空,饮液小泡增多,管壁结构损伤不田显.白质神经 纤维间有水肿.但组织间隙渗出扩大不十分显着.只是胶质细胞突起肿胀,永种空化而形成.综上所见,本 实验结果表昵,急性早期脑缺血是以细胞缺血性改变为主.细胞改变则又以星形细胞水肿改变最明显.虽 血管周围水明显存在,但并非组织间隙承_噼扩大.仅以胶质纤维水肿肿胀.空化为主.形成了细胞. 血臂周围和白质神经纤维间隙的水肿.由此可见在脑缺血早期急性期的星形细胞.首先遭到损伤且呈现【!Ij 显的细胞毒水肿现象.同时,亦见到星形细胞突起而伸入神经组织之各种成分间隙中.如血管.神经细 胞周围.神经纤维网中神经突起周围.从组织形态方面,看到神经组织与其它组织的间隙不同.星形细胞 担负着重要的连接,支持和保护作用-.因此,在研究缺血性脑水呻时.耍注意研究星形细胞本身的损伤及 其与神经细胞,突起和血管的关系. 关于缺血时神经细咆损害问题,以往做过大量研究工怍.最早动物实验认为缺血.缺氧3min即可造 成神经细胞严重损害;铗血,缺氧5,lOmin神经细胞遭到不可逆的损伤.70年代.有动物实验证实在脑 缺血,缺氧30mln,神经细胞仍能恢复.至80年初期,有人证实脑缺血,缺氧60rain仍能嵌复.实际 上脑缺血造成神经细胞损伤是一个相当复杂的生理,生化,代谢过程[5,.且受许多因素的影响.在组织 病理形态学方面也有其特征.且在缺血时的病理改变.光镜所见与超微结构有很大差异.1如缺血3,6h光 镜所见改变不明显.而超微结构已出现严重损伤;又如短时间缺血缺氧后神经细胞当时无明显改变,而在 24,48b出现迟发性神经细胞死亡等].从本组120~180rain脑缺血实验中.光镜所见无明显改变,而电 镜下则见到星形细胞.神经细胞和血管内皮细胞遭到不同程度的损伤.与上述文献报道一致.从本组资料 看到星形细胞的损害明显严重,而神经细胞的损害有重.有轻,这可能与神经细胞缺血坏死迟发反应和 缺血时间有关.作者曾观察过在不同时间内局址性脑缺血对脑组织损伤情况.证明2丑,丑8h神经细胞损伤 152中国医学科学院12卷 最严重.本实验倪120~180min出现轻度不同的结果可能与星形细胞和神经细胞对毓血,缺氧损害闭不剜 有关. 关于血管损伤同题.从本赛驻和文献均证实了缺血, 之.而血管内皮细胞更次之.从本实验结果清楚地看出 胞线粒体肿大,而管壁结构本身损伤不明显. 缺氧的损伤阈.以星形细胞最敏感.神经细胞次 在缺血120,180rain血管尼围水肿明显.内皮 参考文献 (本文图1,4见插图第2,3页) 1.GarciaJH,Expertmenta1ischemicstrokelArevJew.Stroke1984;15:5 2.EbhardtG,etaI.NeuronaliniuryfollowingpermanentmiddlearterYocelusion incats.AetaNeuropatho1l08$;80{7o 3.GareiaJH.etal_Arterialairembolism;StructuraIelfectsonthegerbilbrain. Stroke1081;12{414 4.HossmannKA,eta1.Resuscitationofthemonkeybrainalteronehourcomplete iscbemia1Physiologicalandmophol.gicaIobservations.BrainRex.1974;81:59 5.PaljarviL.BrainlacticacidosisandischemiecelldamageIAtopographiestudy withbigh—resolutionlightmicroscopyofearlyrecoveryinaratmodelofsevere incompeleteiseherain,ActaKeuropathol1984:Bt89 6.GotohO.etaI.Ischemicbrainedemafollowingoeclusionofthemiddlecerebral arlerYintheratI.Thetimecoursesofthebrainwalersodiumandpotassiu皿 contentsandblood-brainharrierpermeahilitYto125I—albumin.Stroke1985;16: 101 7.IgnelziRJ.Brainedema,AdvanceNeurology.1980;28:281 8.KirinoT.etal,Delayedneuronaldenthintberathippoeampusfollowingtraft— sientforehrainischemia.AetaNeuropathol1984;64{139 9.杨蜀莲,等,急性滴缺血脑电图动物实验观察.脑电圈学与神经精神疾病杂志 19884(4); 223 UltrastructuralObservation0fAcuteCerebrallschemia PathologicalChangesafterCarotidLigationinRats GuoYupu.etal (PUMCHospital,Beijing) ThisstudyreporteAtheultrastructura[changesofacutecerebralischemia inrats. Thepathologicalchanges120rainand180rainafterligationofbothcarotid arteriesin12ratswere曲sefvedTheresuktsshowthecytotoxicswellingandedema oftheneuronsandastrocy~s,particularlyedemaofgila[processesweremore markedthannearons.alsoperivascularedemawasrathersevere.butthelesion— ofthestructureofthevesselwasverymild.Swellingandedemaofas— trocytesanditspt'ocessesareofimportanceconsiderationofthemechanismof acutecerebralischemia.Thelatterwasbrieflydiscussed.