PVA颗粒与中药白芨栓塞犬子宫动脉的对比研究

PVA颗粒与中药白芨栓塞犬子宫动脉的对比研究 PVA颗粒与中药白芨栓塞犬子宫动脉的对 比研究 ?哪.biomed.net.caProgressinModernBiom星QQv019.:!!: PVA颗粒与中药白芨栓塞犬子宫动脉的对比研究木 徐伟王宏辉白彬叶远树 (哈尔滨医科大学附属第二医院放射线科黑龙江哈尔滨150086) 摘要目的:研究PvA微粒,中药白芨颗粒栓塞犬子宫动脉所引起的子宫病理变化,观察两者之间对子宫影响有无差别;探讨中药 白芨作为血管栓塞剂的有效性,安全性及相关特性.方法:先结扎8例犬双侧子宫动脉,病理证实子宫组织无坏死.然后采用 Seldinger技术,对16例犬进行选择性子宫动脉栓塞.分别向子宫动脉注入PVA微粒,中药白芨颗粒阻断供血,观察子宫病理变 化.将病理结果予以定量,综合评价脏器损伤.结果:双侧子宫动脉栓塞后,各栓塞组之间样本均数两两比较,均为P>0.05,即三种 处理对于子宫组织损伤无统计学差异.白芨主要栓塞末梢小动脉,栓塞牢靠,不易形成侧支循环,未出现细胞坏死.结论:选择上 述栓塞剂,对子宫组织损伤效果一致,中药白芨颗粒具有良好的血管栓塞作用和载体特性,使用方便,安全,是一种较理想的末梢 型血管栓塞剂. 关键词:中草药;PVA;白芨;栓塞;子宫组织 中图分类号:R285.6.Q95—33文献标识码:A文章编号:1673—6273(2007)10—1491—03 ComparativeStudyofCanineUterineArteryEmbolizationwithPVA ParticlesandBletillaStriataofChineseHerba1Medicine* XUWei,WANGHong-hui,BAIB.YEYuan-shu (DepartmentofRadiology,TheSecondAffiliatedHospitalofHarbinMedicalUniversity,Ha rbinHeilongfiangProvince,150086,China) ABs1RACTObjective:Tocomparethepathologicalchangesofuterinearteryembolization,?imPVAparticlesandBletillaStriata, andevaluatethevalidity.securityandcorrelativecharacteristiesofBletillaStriataasavascularembolizationagent.Methods:Uterinetis— sueswereconfmnednonecrosisbypathologyafterbilateraluterinearteryligation.AdoptingtheSeldingertechnique,embolicmaterials wereinfusedintothebilateraluterinearteriesrespectively,andpathologicalchangesoftheuterinetissueswereobserved, .Thepathologi— calresultswerequantitativelyanalyzedalonewithintegralweightedmethod,andthedamagedorganswereevaluated.Results:Thesam— piemeanswerecomparedbetweenligatedgroupandembolizedgroups,P>0.05,andwhichmeanstherewasnodifferenceofuterinetis— sueschangesafterall~eatments.TheBletillaStriatamainlyembolizedperipheralarteries.andtherewerefewcollateralcirculationsand nocytonecrosis.Conclusions:ItsuggeststhatBletillaStriataandPVAparticlesareequivalentindamagedeffects.BletillaStriataissafe andeffectiveinvascularembolizationwithcharacteristicofcarrier,anditisapotentialperipheralembolizationagent. Keywords:Chineseherbmedicine;PVA;BletillaStriata;embolization;Uterinetissue ChineseLibraryClassification(CLC):R285.6,Q95—33Documentcode:A ArticleID:1673.6273(2007)10-1491-03 刖盖 多年来,研究理想的血管栓塞剂一直是介人治疗中的重要 课题.目前使用的栓塞剂种类较多,其中PVA颗粒栓塞作用肯 定并为临床所认同,但其价格昂贵,难适应中国国情,在国内较 难普遍采用.随着祖国中医药的发展,特别是提纯及化学分析 的发展,近来研究认为,兰科多年生草本植物白芨具有良好的 栓塞效果[1】.本试验复制白芨颗粒及PVA颗粒栓塞犬双侧子宫 动脉模型,研究不同栓塞方法引起的子宫病理改变.为应用白 芨颗粒替代PVA颗粒作进一步的基础实验研究,从而为临床 寻找适合中国国情,行之有效的栓塞剂提供理论依据. l材料和方法 1.1材料和设备 实验动物是健康纯系的雌性家犬,体重(20?2)Kg.栓塞 剂PVA颗粒平均直径300.7001xm,白芨颗粒平均直径 300—700~m;细胞凋亡检测试剂盒由德国BoehringerMannheim 公司生产;1%戊巴比妥钠,生理盐水等.AngiostarPlus型DSA 机(德国SIEMENS公司),F3010型荧光分光光度计(日本HI— TACHI);BH2光学显微镜(日本Olympus);三高CMIAS99C 型多功能真彩色病理图象分析系统等. 1.2动物模型的制备及分组方法 将实验动物随机分成三组:PVA颗粒栓塞组(n=8只),白 芨颗粒栓塞组(n=8只),对照组(n=8只). PVA颗粒栓塞组:以1%戊巴比妥钠40mg/kg对犬进行腹 腔注射,麻醉成功后将犬仰卧位固定于台,下腹部备皮,消毒, 采用Seldinger技术穿刺右侧股动脉,置人导管鞘,导丝引导导 管超选择进入实验犬双侧子宫动脉,造影证实.准确定位后将 PVA300—7001xm10—50mg灌人动脉.确认靶动脉栓塞后重复造 影 基金项目:国家中医药管理局中医药科学技术专项课题(04.05ZP25) 作者简介:徐伟,(1977-),男,硕士研究生,住院医师,主要从事介入放射学工作. 通讯作者:王宏辉教授E-mail:honghuiwang@sina.com (收稿日期:2007:06-23接受日期:200708-10) ? 1492?MVo1.7No.1 白芨颗粒栓塞组:手术方法同上.栓塞剂改为白芨颗粒,剂 型与剂量同PVA. 对照组:以1%戊巴比妥钠40mg/kg对犬进行腹腔注射, 麻醉成功后将犬仰卧位固定于台上,下腹部备皮,消毒,逐层切 开腹部皮肤,皮下脂肪,筋膜,肌肉,进入腹腔寻找子宫,沿系膜 钝性游离双侧子宫动脉,分别用4号手术缝线双重结扎子宫 动,生理盐水冲洗腹腔,整理腹腔脏器,后关腹,缝皮. 子宫动脉栓塞术后l4,28天,麻醉后处死动物,每组四只. 剖腹取出子宫,用甲醛固定标本,石蜡切片,HE染色,光镜下观 察病理变化. 1_3观察指标及测定方法 观察指标及测定方法包括:动物的一般状态,光镜观察子 宫组织的病理形态,电镜观察子宫组织的超微结构,组织病理 观察 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 及病理加权记分.组织病理观察及病理加权记分标 准:?坏死:平均在一个低倍视野(100倍)内:无坏死(.)3分. 轻度:见到1个坏死灶(+)2分.中度:见到2-3个坏死灶(++) 1分.重度:大于3个坏死灶(卅)0分.?出血;平均在一个低 倍视野(100倍)内:无出血(-)3分.轻度:见1个血管出血(+)2 分.中度:见2~3个血管出血(++)1分.重度:大于3个血管出血 (卅)0分.?变性(浊肿,粘液变性,空泡变性,肌原纤维变性 等),变性细胞占所观察心肌细胞:无变性(-)3分.轻度:占 10%(+)2分.中度:占100%(++)1分.重度:大于30%(卅) 0分.?炎性细胞浸润(含中性粒细胞,淋巴细胞,浆细胞等),在 0.5×0.8cm切片范围内,炎性细胞浸润面积:无炎性细胞浸润 (.)3分.轻度:在1个400倍视野之内(+)2分.中度:大于1个 400倍视野,小于2个400倍视野(++)1分.重度:大于3个 400倍视野(卅)0分.?充血:扩张的血管直径与正常血管直 径比:小于无充血(-)3分.轻度:2倍(+)2分.中度:2,3倍 (++)1分.重度:大于3倍(卅)0分.病理观察由同一名经验 丰富的病理科教授进行,认真做好纪录,采用累计加分法,分值 越低,损伤程度越严重.反之,分值越高,损伤程度越轻微.最终 得出子宫组织病理结果积分表,以利于进行对比评价. 1.4统计学处理 本实验数据均为计量资料,数据以均数?标准差表示,多 实验组之间用方差分析(F检验),每两组间比较用Q检验,相 关分析采用Spearman秩相关分析,P<0.05存在统计学差异,统 计分析使用SPSS12.0生物统计软件完成. 2结果 2.1动物栓塞实验结果 动物的一般行为状态:栓塞前各组犬外观,饮水,进食量及 体重增长情况无明显差异.栓塞后各组犬精神不振,进食减少, 体重增长缓慢个别略有下降;对照组及实验组犬无明显区别. 未见任何毒性反应及中毒死亡现象.除一只犬术后伤口感染, 1,4天白细胞急剧升高;其余试验动物术后白细胞,血小板及 红细胞计数均无明显变化. 2.2子宫组织病理所见 子宫组织病理学观察所见:在结扎犬的子宫动脉和栓塞犬 的子宫动脉后即可见到子宫外观的颜色由鲜红色变为暗红色, 说明子宫动脉被阻断后,子宫组织的血供明显减少,整个子宫 处于缺血状态.光镜观察子宫组织的病理变化:对照组与栓塞 组光镜下均未见明显坏死及出血,可见变性细胞,多为轻度一 中度,主要是平滑肌细胞变性;炎性细胞浸润多以中性粒细胞 为主,程度不等;充血很常见,多为轻度,中度,少量调亡细胞. 结扎组与各栓塞组的病理结构变化相似.电镜观察子宫组织超 微结构:结扎组子宫组织与两栓塞组在相同部位取材.结扎组 可见子宫细胞内水肿,线粒体轻度肿胀,大小不等,栓塞组可见 子宫细胞内水肿,肌浆网扩张,线粒体轻度肿胀,部分子宫细胞 肌原纤维断裂.由此可见,结扎组与各栓塞组超微结构的变化 相似,与光镜结果基本一致. 2.3积分加权法病理定量结果 结扎组与栓塞组的积分均值相差不大,即不同处理方法所 引起的子宫组织损伤无明显差异.q检验结果,各组两两之间 的病理变化无统计学差异(P>0.05),即对于正常子宫组织损伤 无差别. 三个样本均数按由大到小的顺序排列依次为结扎组,中药 白芨颗粒组,PVA颗粒组,说明不同处理方法所致子宫组织的 损伤程度接近.将相关数值带入运算公式,计算出q检验所需 图1实验后子宫组织的病理改变:A:结扎双侧犬子宫动脉28天,炎 性细胞浸润;B:应用PVA微粒栓塞犬子宫动脉14天,炎性细胞浸润; c:应用白芨颗粒栓塞犬子宫动脉14天,炎性细胞浸润.(x40) Figure1UterinetissueschangesaReralltreatments:A:inflammatory cellsofuterinetissues28daysaRerbilateraluterinearteriesligation;B: inflammatorycellsofuterinetissues14daysafterembolizingbilateral uterinea~erieswitl1PVA;C:inflammatorycellsofuterinetissues14days afterembolizingbilateraluterinearterieswithBletillaStriata(x40) 指标,运算过程省略.各组两两之间比较,均不拒绝H0,所以各 处理组之间两两比较,各对比组的q值均小于p=0.05时的q 界值,即p>0.05,说明各对比组对于子宫组织的损伤差异无统 计学意义. 3讨论 白芨自古以来在祖国医学用于止血,生肌,抗炎,取得了满 意的临床疗效.近来国内学者郑传胜等用于血管栓塞和肿瘤栓 塞介入治疗.末梢性血管栓塞剂是影响肿瘤栓塞疗效的重要因 素.多年来国内外学者研制了多种栓塞物质,它们在显示有效 性的同时也表现出许多不足;即使是目前最常用的碘化油,也 不是一种理想的血管栓塞剂嘲.中草药白芨的有效成分—?粘 液质,它具有抗炎,抗肿瘤,促凝血等作用【3】.作为血管栓塞剂, 白芨颗粒主要栓塞末梢小动脉,栓塞牢靠,维持时间较长,可达 5周左右,且不易形成侧支循环,它可被降解吸收,允许重复栓 塞治疗.另外,堵塞在较大口径血管内的白芨颗粒,在血流的冲 击和溶解下,可产生"迁徙"现象,到达更细的分支内,产生更均 匀,彻底的栓塞.同时,子宫组织内无栓塞征象,亦未见子宫细 胞坏死,说明白芨颗粒栓塞子宫动脉是安全的.另外,白芨颗粒 不透x线,便于操作,克服了许多液态栓塞剂(如无水乙醇等) 可透x线,不易监视操作的缺点.关于白芨栓塞血管的机理 可能为:(1)它是一种粘滞性的胶状物,能机械性堵塞小血管及 造成血管内膜损伤;(2)它能促进局部红细胞凝集,缩短凝血时 间及凝血酶原时间,从而促使继发性血栓形成.另外,白芨颗粒 V~gtrw.biomed.net.cnProgressinModernBiom壁壁v'!!:: 比普通碘化油的粘滞性低,易经小口径导管注射,使用方便.中 药白芨颗粒具有良好的血管栓塞作用和组织相容性,使用方 便,安全,是一种较理想的末梢型血管栓塞剂】. 我们选择狗作为实验对象是因为狗的子宫血供除了子宫 动脉,还来源于卵巢动脉,阴道动脉等动脉.这与人的解剖结构 相似,而且狗易获得,易饲养,对手术耐受好.首先进行预实验, 间隔不同的时间观察子宫组织病理变化,证实切断子宫动脉血 供不会引起子宫组织明显的缺血坏死.接着进行下一步实验, 选择PVA微粒,白芨颗粒二种栓塞剂对狗双侧子宫动脉进行 确切栓塞. 手术后相同的时间切取子宫组织,观察病理变化.术中及 术后的大体病理所见为子宫呈广泛缺血的表现,即外观由鲜红 色变为暗红色,说明子宫动脉是子宫的主要供血动脉;镜下观 察所见以细胞变性,炎性细胞,静脉扩张,充血为主,并可见组 织疏松,水肿,未见明显坏死及出血,证实子宫的血供不仅来源 于子宫动脉,还有其他血管供应血液.细胞变性虽然是可恢复 的,但毕竟是一种损伤,这种副反应对于子宫正常生理的影响 有多大,需要进一步研究.我们在病理结果定量分析中应用了 积分加权法是一个应用量的概念对实验动物病理多种指标进 行综合分析的具体方法.所有获得的病理结果,采用积分加权 法打分,得到子宫损伤病理观察积分,应用q检验进行统计学 处理.三个样本均数两两比较结果均为p>0.05,证实二种栓塞 剂栓塞子宫动脉和结扎子宫动脉三个处理组之间两两比较,对 于子宫正常组织的损伤无统计学差异. 子宫动脉栓塞术已经广泛应用于临床,特别是大量应用于 子宫肌瘤的治疗[6-7].近年研究表明,子宫能产生多种生物活性 物质,并有内分泌功能,参与生殖,生理及病理过程,绝经前切 除子宫即使保留卵巢,也常常引起更年期综合症,冠心病及骨 质疏松等症状的提早出现.介入治疗子宫肌瘤是一种有前 途的治疗手段,将被患者普遍接受.通过建立动物模型,利用现 代的实验方法来探讨各种栓塞剂对子宫组织的作用机制及病 理改变.通过对各种类型的栓塞剂的对比研究,有效地将实验 性研究与临床应用科学地结合起来,不仅对介入方法在妇产科 疾病中的研究有重要的启示,而且对中药在介入栓塞领域中的 应用提供了动物实例参考,同时也将为临床开发新型的栓塞剂 提供更有价值的理论依据. 4结论 选择PVA颗粒,中药白芨颗粒栓塞犬子宫动脉,病理均表 现为细胞变性,炎细胞浸润,静脉充血,扩张,组织疏松,水肿. 上述栓塞剂,对子宫组织损伤效果无统计学差异.中药白芨颗 粒具有良好的血管栓塞作用和载体特性,使用方便,安全,是一 种较理想的末梢型血管栓塞剂. 参考文献(References) [1]FENGGANSHENG,ZHENGCHUANSHEN,ZHOURU/VIING,eta1. 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