整合素连接激酶在胎盘血管性疾病中作用研究（可编辑）

整合素连接激酶在胎盘血管性疾病中作用研究（可编辑） 分 类 号 学号 D200978259 学 校代码 10487 密级 博 士 学 位 论 文整 合素连 接激 酶在胎 盘血 管性疾 病中 的作用 研 究学 位 申 请 人 : 王 芳 学 科 专 业 : 妇产科学 指 导 教 师 : 邹 丽 答 辩 日 期 : 2012 年4 月A dissertation submitted to Huazhong University of Science and Technology for the Degree of Doctor of MedicineStudies on the Role of Integrin-Linked Kinase in the placental vascular diseases D.Candidate : Fang Wang Major: Obstetrics and Gynecology Supervisor : Prof. Li Zou Huazhong University of Science & Technology Wuhan 430074, P. R. China April, 2012 独创性声明 本人郑重声明, 本学位论文是本人在导师指导 下进行的研究工作及取得的研究成果的 总结 初级经济法重点总结下载党员个人总结TXt高中句型全总结.doc高中句型全总结.doc理论力学知识点总结pdf 。 尽我所知 ,除文中 已经标 明引用 的内容外 ,本 论文不包 含任何其 他个人 或集体 已经发表 或撰 写 过的研究 成果。对 本文的 研究做 出贡献的 个人 和集体, 均已在文 中以明 确方式 标明。本 人完 全 意识到本人将承担本声明引起的一切法律后果。 学位论文作者签名: 日期: 年 月 日学 位论文版 权使用 授权书 本学位论 文作者 完全了 解学校 有关保留 、使用 学位论文 的规定 ,即: 学校有权 保留并 向国 家有关部 门或机构 送交论 文的复 印件和电 子版 ,允许 论 文被查阅 和借阅 。本人 授权华中 科技 大 学可以将 本学位论 文的全 部或部 分内容编 入有 关数据库 进行检索 ,可以 采用影 印、缩印 或扫 描 等复制手段保存和汇编本学位论文。 保密? ,在_____年解密后适用本授权书。 本论文属于 不保密? 。 (请在以上方框内打“?” ) 学位论文作者签名: 指导教师签名:日期: 年 月 日 日期: 年 月 日 目 录 前 言 1 中文摘要 5 Abstract9 第一部分 ILK 在子痫前期 发病 机制中的 作用14 引言14 材料和方法 14 结 果. 26 讨 论. 28 参考文献. 30 第二部分 ILK 对 EPCs 与血管形成相关能 力的作用. 32 引 言. 32 材料和方法 32 结 果. 36 讨 论. 41 参考文献. 42 第三部分局部转染 ILK 改善 RUPP 缺血 模型大鼠胎盘灌注 45 引 言. 45 材料与方法 45 结 果. 49 讨 论. 52 参考文献. 54 综 述. 55 附 录. 74 附录一75 附录二74 致 谢. 78华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文 前 言 胎盘血管 性疾病是指妊娠期母体血管发生病变影响胎盘血流灌注从而危害胎儿生长发 育的一类疾病。胎盘灌注不良是诸多胎盘血管 性疾病如妊娠期高血压疾病、胎儿宫内生长 受限、妊娠期糖尿病等的共有病理生理改变,局部血管形成异常是胎盘灌注不良的始动因 素和中心环节,临床 上是围生儿发病率与死亡率的主要原因,如果能够从根本上改善胎盘 血流灌注,对优生优育、提高人口质量具有深远意义。 胎盘血管的形成包括血管发生 (vasculogenesis ) 和血管新生 (angiogenesis ) 两种方式。 前者主要依靠内皮祖细胞 (Endothelial progenitor cells ,EPCs )或更早来源的血管母细胞聚 [1] [2] 集分化形成, 是血管从无到有的过程 , 主要见于胚胎血管系统 发育过程 ; 后者指由已经 存在的 成熟 血管 内皮 细胞 通过 局部 芽生 或套 叠 的形式 生成 新的 毛细 血管 ,是 血管 从少 到多 [3] 的过程 , 主要见于胚胎后的生理性和病理性血管重构。 新生血管能 否生成取决于 复杂的信 号转导 过程 ,并 由一 系列 环节 组成 ,包 括血 管 内皮细 胞基 底膜 和细 胞外 基质 的降 解、 内皮 细胞活 化、 增殖 、定 向迁 移、 管腔 形成 、发 生 分枝、 与其 它血 管吻 合形 成血 管环 等。 目前 介导这些 环节 的多 种 蛋 白 质 作 为 靶 点 用 于 缺 血 性 疾 病 的 治 疗 研 究 ,如 基 质 金 属 蛋 白 酶 [4,5] (matrix metalloproteinases, MMPs ) 与基底膜和 细胞外基质的降解有关 , 血管内皮生长因 [6-8] 子(vascular endothelial growth factor, VEGF )与血管内皮细胞活化、增殖、迁移 有关 , 但临床 效果 尚不 尽人 意 。 进一 步的 探索 不仅 能 完善胎盘血管形成 机 制而 且可能 为 将来 的针 对性治疗提供契机 。 自 20 世纪 90 年代以来,细胞信号转导系统的 研究取得了令 人瞩目的成绩, 并且为缺 血性疾病 的治疗提供了新 的思路 。 整合素连接激酶 (Integrin-linked kinase ,ILK ) 是一种能 够与整合素 β1、β3 亚基胞浆域结合的丝氨酸/ 苏氨酸蛋白,广泛分布于人类的 各种组织和 [9,10] [11] [12,13] 细胞中 。研究表明 ILK 在正常组织的血 管 发生、形成 和肿瘤血管发生方面 起重 要作用。ILK 通过上调基质细胞衍生因 子 1(Stromal cell derived factor-1,SDF-1)和细胞 间黏附分子 1 (Intercelluar adhesion molecule-1,ICAM-1) , 促进 EPCs 的分化、 增生、 粘附 [14-16] 及迁移 , 从 而 影 响 毛 细 血 管 的 形 成 。ILK 在 磷 脂 酰 肌 醇-3- 激酶 (phosphatidylinositol 3-kinase ,PI3-K ) 的介导下 , 通过促进血管内皮生长因子的表达, 调节滋养细胞的分化和迁 [17] 移 。国外有学者研究发现,定向敲除内皮细 胞内 ILK 基因的大鼠较正常大鼠的胎盘血管1华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文 [18] 生成明显减少,且子代均未存活,提示 ILK 可 影响活体胎盘组 织的血管生成 。另有学者 分别取孕早中晚期胎盘进行免疫荧光反应,发现 ILK 在妊娠 6~15 周的细胞滋养细胞的胞 质及胞浆中呈高表达,之后随妊娠进展表达量逐渐降低。表明 ILK 的分泌量与胎盘血管重 [19] 铸时间相吻合 。上述研究显示 ILK 参与了胎 盘的血管发生, 并维持血管功能。 本研究拟在论 证 妊娠期期 高血压疾 病的重要类 型 ?? 子痫 前 期患者脐血 中 EPCs 数量 和功能与 ILK 关系的基础上,利用 ILK 对体外 EPCs 进行靶向 调节以及 ILK 对体内胎盘血 管生成的影响,阐明 ILK 在胎盘血管形成过程 中的调节作用 。 参 考 文献 [1] Carmen Urbich, Stefanie Dimmeler. Endothelial progenitor cells: characterization and role in vascular biology. Circ Res, 2004, 20; 954: 343-53 [2] Patan S. Vasculogenesis and angiogenesis. Cancer Treat Res, 2004, 117: 3-32 [3] Felmeden DC, Blann AD, Lip GY. Angiogenesis: basic pathophysiology and implications for disease. Eur Heart J, 2003, 24: 586-603[4] Rundhaug JE. Matrix metalloproteinases and angiogenesis. J Cell Mol Med, 2005, 92: 267-85[5] Kandalam V, Basu R, Moore L, Fan D, Wang X, Jaworski DM, Oudit GY, Kassiri Z. Lack of tissue inhibitor of metalloproteinases 2 leads to exacerbated left ventricular dysfunction and adverse extracellular matrix remodeling in response to biomechanical stress. Circulation, 2011, 8;12419: 2094-105 [6] Ferrara N. Vascular endothelial growth factor and the regulation of angiogenesis. Recent Prog Horm Res. 2000, 55: 15-35 [7] Sakurai T, Kudo M. Signaling pathways governing tumor angiogenesis. 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Integrin-linked kinase, a hypoxia-responsive molecule, controls postnatal vasculogenesis by recruitment of endothelial progenitor cells to ischemic tissue. Circulation, 2006, 1142: 150-159[17] Butler T M, Elustondo P A, Hannigan G E, et al. Integrin-linked kinase can facilitate syncytialization and hormonal differentiation of the human trophoblast-derived BeWo cell lineReprod Biol Endocrinol, 2009, 7: 51[18] Friedrich EB , Liu E , Sinha S, et al. Integrin-linked kinase regulates endothelial cell survival 3华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文 and vascular development. Mol Cell Biol, 2004, 24 18: 8134-8144[19] Elustondo PA, Hannigan GE, Caniggia I, et al. Integrin-Linked Kinase ILK Is Highly Expressed in First Trimester Human Chorionic Villi and Regulates Migration of a Human Cytotrophoblast-Derived Cell Line. Biol Reprod, 2006, 74 5: 959 4华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文 整合素连接激酶在胎盘血管性疾病 中的作用 研究 华中科技 大学同 济医学 院附属 协和医 院 妇产科 博士研究 生: 王芳 博士生导 师: 邹丽 教授 中文摘要 第 一 部分 ILK 在子 痫 前期 发病 机制 中的 作用 目的探讨 ILK 在子痫前期患者脐 血 EPCs 中的 表达及其在新生血管形成中的作用 。 方法 1. 分离、培养 正 常 组 和 子 痫 前 期 组 脐血 EPCs , 利用 细 胞 形 态 学 和 免 疫 荧 光 吞 噬 功 能 (FITC-UEA-I 和 DiI-ac-LDL )检测鉴定 ; 2. 采用逆转录聚合酶链反应检测脐血 EPCs ILKmRNA 的表达; 3. 采用 免疫印迹技术 检测脐血 EPCs ILK 蛋白 的 表达 ; 4. 采用小管形成实验检测 EPCs 血管形成能力 。 结果 1. 分离 培养单个核细胞 ,FITC-UEA-I 和 DiI-ac-LDL 双阳性细胞为正在分化 的 EPCs ; 2. 正常妊娠组 EPCs 中 ILKmRNA 相对吸光度A 值较子痫前期组显著升高 (0.64?0.05 与 0.45?0.06) , 子痫前期组轻度者较重度者显 著升高 (0.47?0. 07 与 0.39?0.08) ; 3. 正常妊娠组 EPCs 中 ILK 蛋白 A 值较子痫前期 组明显升高 (32?2 与 26?1) , 子痫前期 组轻度者较重度者显著升高 (25?2 与 20?2) ; 4. 正常妊娠组小管结构形成的数量较子痫前期组显著增多 (330?8 与 135?7) , 子痫前期 组重度者的小管形成的数量明显少于轻度者 (148?6 与 116?8 ) 。 结论 5华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文 子痫前期患者 EPCs 中 ILKmRNA 及其蛋白表 达下降可能与子痫前期的发生密切相关 。 关键 词 子痫 ;胎盘灌注 ;血管内皮祖细胞 ;整合素连接激酶 第 二 部分 ILK 对 EPCs 与 血管 形成 相关 能 力的 作用 目的研究 上调 ILK 的表达 对 EPCs 细胞增殖、 迁 移和管腔形成能力 的影响 , 了解 ILK 在 EPCs 形成血管过程中的作用 。 方法 1. 分离、 培养重度子痫前期患者脐血 EPCs , 将细胞分为实验组 ( 转染 Ad-GFP-ILK )、阴 性对照组 (转染 Ad-GFP ) 和空白对照组 (不 进行细胞转 染)3 组; 2. 采用实时荧 光定量 PCR 技术检 测 ILK mRNA 的表达 ; 3. 采用免疫印迹技术检测 ILK 蛋白的表达; 4. 采用 活细胞计数试剂盒 (Cell Counting Kit-8,CCK-8)比色法测定转染后细胞的增殖能 力; 5. 采用 Transwell 模型迁移实验检测转染后细胞 的迁移能力; 6. 采用重悬贴壁法检测转染后细胞的分化能力 7. 采用 小管形成实验检测 转染后 细胞的 的 管腔形成能力。 结果 1. 转染后 EPCs 中 ILK mRNA 和蛋白的表达水平 ,实验组分别为 0.831?0.14 、0.78?0.12 , 分别与 阴性对照组 (分别为 0.453?0.21 、 0.34?0.16) 比较, 差异均有统计学意义 (P0.05 ) ; 空白 对照组分别为 (0.391?0.13 、0.41?0.21 ) , 分别与 阴性对照组 相比, 差异均无统计学 意义 (P0.05 ) 。 2. 转染 24 小时 后 EPCs 的增殖能力,实验组的 积分吸光度 (A ) 值为 2.343?0.027 ,与阴 性对照组 (1.625?0.033 ) 相比 , 差异有统计学意 义 (P0.05 ) ; 空白 对照组为 1.461?0.024 , 与阴性 对照组相比 ,差异无统计学意义 (P0.05 ) 。 3. 转染 24 小时 后迁移入小室下室的细胞数目, 实验组为(138.4?2.6 )个,高于 阴性对照6华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文 组 (82.6?3.7 )个 , 差异 有统 计学 意 义 (P0.05);空白 对照 组为 (95.3?4.2 ) 个 ,与 阴 性对照组 相比,差异无统计学意义 (P0.05)。 4. 转染 24 小时 后, 分 化 成 梭 形 细 胞 的 数 目 , 实 验 组 为 (546.1?6.3 ) 个 , 阴 性 对 照 组 为 (323.2?3.3) 个, 空白对照组为 (267.4?3.6) 个。 各组分别比较, 实验组与阴性对照组 差异有统计学意义 (P0.05 ) ;阴性对照组与空白对照组差异无统计学意义 (P0.05 ) 。 5. 转染 24h 后,各组 EPCs 均未 在 Matrigel 上形成明显的管腔网络状 结构,但实验组 形成 小管趋势较对照组明显。 结论 ILK 基因表达水平的 升高可以影响 EPCs 的增 殖、 迁移和小管形成能力 。 关键 词 整合素连接激酶;血管内皮祖细胞;胎盘灌注;子痫 前期 第 三 部分 局 部转 染 ILK 改善 RUPP 缺 血 模型 大鼠 胎盘 灌 注 目的 通过腺病毒转染技术局部转染模型大鼠胎盘, 观察转染 ILK 基因后胎盘 形态学和 微血 管密度 等方面的变化 ,探讨 ILK 在改善孕鼠胎 盘血管生长 的可能作用和机制 。 方法 1. 建立孕鼠 RUPP 缺血模型; 2. 模型鼠分组,并 采用体内腺病毒转染技术 将过表达 ILK 的载体转染入孕鼠胎盘组织; 3. 转染后的 孕鼠组织行 冰冻切片,荧光显微镜下观察 GFP 表达以了解 病毒的转染效果; 4. 测量孕 17 天大鼠 转染后胎盘的重 量; 5. 利用实时荧光定量 PCR 检测 转染后孕鼠胎盘组 织 ILK 基因 的 mRNA 水平表达 ; 6. 利用 免疫印迹法 检测转染前后 孕鼠胎盘组织 ILK 基因的蛋白水平表达 ; 7. 利用 CD34 因子 免疫组化实验检测 孕 17 天大鼠 转染 后的胎盘血管密度。 结果 1. 实验选取的 30 只孕鼠,麻醉及 感染死亡 4 只 ,早产 1 只; 2. 转染后胎盘组织 的冰冻切片在荧光下观察可见 GFP 大面积高表达,体内转染效果理想; 3. 体内转染后, 转染 组孕鼠的胎盘重量 为 (0.83? 0.12 )g, 阴性对 照组 (0.86.?0.23)g,空7华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文 白对照组 (0.79.?0.41)g,转染组与阴性对照 组相 相比 ,差异无统计学意义(p0.05 ) ; 4. 转染后各组 胎盘 中 ILK mRNA 的 表 达 水 平 , 转染 组为 1.352?0.31 , 阴 性 对 照 组 为 0.757?0.47, 空白对照组为 0.693?0.46。 各组分别比较, 实验组与阴性对照组 ILK mRNA 的表达 差异有统计学意义 (P0.05 ) ;阴性对照组与空白对照组 ILK mRNA 的表达水平 差异无统计学意义 (P0.05); 5. 转染后各组 胎盘 中 ILK 蛋白的表达水平 , 转染 组为 0.93?0.45, 阴性对照组为 0.48?0.32, 空白对照组为 0.54?0.41。 实验组与阴性对照组 相比 ,ILK 蛋白的表达 差异有统计学意义 (P0.05 ) ;阴性对照组与空白对照组 相比 ,ILK 蛋白的表达水平 差异无统计学意义 (P0.05); 6. 转染 组孕鼠胎盘的微血管数量 (78.4?5.03)较 阴性对照组 (64.2?3.15) 显著增多; 阴性 对照组与空白对照组 (60.1?6.34)相比 ,差异 无统计学意义 (P0.05 ) 。 结论 利用体内 腺病毒转染 技术可有效 增加 ILK 基因 在孕鼠胎盘 mRNA 和蛋白水平的表达 , 且能够增强 孕鼠胎盘的血管形成 能力, 提示 ILK 有望成为 胎盘促血管新生的新靶 点。 关键 词 整合素连接激酶; 胎盘灌注不良;体内转染;血管新生 8华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文 Studies on the Role of Integrin-Linked Kinase in the placental vascular diseases Department of Obstetrics and Gynecology, Union Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology Ph.D. Candidate : Fang Wang Supervisor : Prof. Li Zou AbstractPart one The role of the integrin linked kinase in the pathogenesis of pre-eclampsia Objective To investigate the expression of integrin-linked kinase in endothelial progenitor cells from patients with pre-eclampsia and the relation to placenta perfusion MethodsThirty patients with pre-eclampsia and thirty-five normal late pregnant women were investigatedThe expression of ILK mRNA and protein was determined with RT-PCR and Western blotting respectively. And the angiogenesis of EPCs was examined by tube formation in vitro Results1. The values of ILK mRNA in normal group and pre-eclampsia group were 0.64?0.05 and 0.45?0.06 ;The values of ILK mRNA in mild and severe pre-eclampsia groups were 0.47?0.07 and 0.39?0.08 (P0.05 )2. The values of ILK protein in normal group and pre-eclampsia group were 31.6?2.3 and 25.6?1.3 ;The values of ILK protein in mild and severe pre-eclampsia groups were 25.3?1.6 9华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文 and 20.2?1.7 (P0.05)3. The tube formation capacity in pre-eclampsia group (135.29?6.86 )was significantly reduced than in normal group (329.58?8.26)(P0.05); The decrease was even more obvious in severe group (115.72?7.63 )than in mild group (148.33?6.34)(P0.05 )4. There was positive correlation between the expression of ILK mRNA and protein and tube formation capacity in normal group, (r 0.69 and 0.73 ,P0.05 ), as well as in pre-eclampsia group (r 0.67 and 0.72 , P0.05 ) , in mild pre-eclampsia group (r 0.65 and 0.68 , P0.05 ) , and in severe pre-eclampsia group (r 0.63 and 0.74 ,P0.05 ) ConclusionThe study shows that the decrease of ILK in EPCs may be one of the possible reasons for the incidence of pre-eclampsiaKey words Pre-eclampsia ; Placental perfusion ;Endothelial progenitor cells ;Integrin-linked kinase Part two Integrin-linked kinase improves function of endothelial progenitor cells in vitro Objective To investigate the effect of integrin-linked kinase (ILK )on the proliferation, migration and tube formation capacity of endothelial progenitor cell ( s EPCs ) from patients with pre-eclampsia and the role of ILK in the onset and development of pre-eclampsia . MethodsThe experiment was divided into three groups :groups of transfection ,negative control and blank control which corresponded to groups of Ad-GFP-ILK transfection, Ad-GFP transfection and no transfection. Expression of ILK was detected by real-time polymerase chain reaction and western blot analysis .Changes of cell proliferation, migration and tube formation capacity were respectively detected by CCK-8, transwell test and tube formation .Results 10华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文 1. The mRNA and protein levels of ILK control group and negative control group were 0.831?0.14, 0.78?0.12 and 0.453?0.21, 0.34?0.16, respectively, which were both significantly different (P0.05 ) ;the number of blank transfection group was 0.391?0.13 and 0.41?0.21, which had no significant difference compared with negative control group (P0.05 ) . 2. The integral absorbance (A )values of the ILK transfection group and negative control group were 2.343?0.027 and 1.625?0.033respectively ,which was significantly different (P0.05 ) ; the (A ) value of blank control group was 1.461? 0.024, which was not significantly different compared with negative group (P0.05 ) .3. The cell migration number of transfection group and negative control group were 138.4?2.6 and 82.6?3.7 respectively , with a statistically significant difference (P0.05 ) ; and the number of blank control group was 95.3?4.2, which was not significantly different compared with negative group (P0.05) . 4. The number of endothelial-like spindle-shaped cells in transfection group and negative control group were 546.1?6.3 and 323.2?3.3 respectively, with a statistically significant difference between them (P0.05 ) ;the number of blank control group was 267.4?3.6, which was not significantly different compared with negative group (P0.05 ) . 5. There were no tube-like structures formed when EPCs of three groups seeded on the matrigelHowever, the tendency of tube-like formation in ILK group was more clear and obvious than that of blank control group ConclusionILK is probably involved in the onset of pre-eclampsia by regulating proliferation, migration and tube formation capacity of EPCs . Key words Integrin-linked kinase ;Endothelial progenitor cells ;Placental perfusion ;Pre-eclampsia Part three Local transfection of ILK to improve placental perfusion in reduction of 11华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文 uterine perfusion pressure rat ObjectiveTo test the hypothesis that enhanced leval of ILK expression might improve placental vasculogenesisMethods1. Placenta ischimia model was established by reduction of uterine perfusion pressure in pregnant rat;2. 30 model rat were devided into three groups and were treated with local injection of adenoviral vector expressing ILK on placenta; 3. Transfection effect of placenta was observed through frozen sections under fluorescence microscope; 4. Placenta weight were measured at day 17 of gestation; 5. Expression of ILK mRNA of transfected placenta was detected by real time quantitative PCR; 6. Expression of ILK protein of transfected placenta was detected by western blot; 7. Placental vascular density after transfected was detected by immnun ohistochemical assayResults 1. Four dyed from anesthesia accident and infection and one preterm birth of all the 30 rats; 2. Expression of GFP was expected in placenta by adenoviral transfected technology;3. The weight of placenta in ILK group and negative control group were (0.83?0.12g and (0.86.?0.23)g respectively , the weight of placenta in blank control group was (0.79.?0.41) g, which had no significant difference compared between three group (P0.05 ) ;4. The values of ILK mRNA in ILK group and negative control group were respectively 1.352?0.31 and 0.757?0.47, with a statistically significant difference between them (P0.05 ) ; the values of ILK mRNA in blank control group was 0.693?0.46, which had no significant difference compared with negative control group (P0.05 ); 5. The values of ILK protein in ILK group and negative control group respectively were 0.93?0.45 and 0.48?0.32,with a statistically significant difference between them (P0.05 ); 12华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文 the values of ILK protein in blank control group was 0.54?0.41, which had no significant difference compared with negative control group (P0.05 );6. The number of placental microvessels in ILK group and negative control group were respectively 78.4?5.03 and 64.2?3.15 , with a statistically significant difference (P0.05 ) ; the number of placental microvessels in blank control group was 60.1?6.34, which had no significant difference compared with negative control group (P0.05 )Conclusion Expression of ILKmRNA and protein in placenta can be elevated efficiently through adenoviral transfection technology and ILK promotes placenta vasculogenesis in experiment reduction of uterine perfusion pressure ratKey words Integrin-linked kinase ;Placental hypoperfusion ;In vivo transfection ; vasculogenesis 13华 中 科 技 大 学 博 士 学 位 论 文 第一部分 ILK 在子痫前期发病机 制中的作用 引言 妊 娠 高血 压疾 病是 妊娠 期特 有的 严重 威 胁 母婴健 康 的疾 病, 是我 国孕 产妇 及围 生儿 死 亡的主要原因之一。 全身血管内皮细胞损伤是妊娠高血压疾病 的主要病理改变。 研究发现, [1-3] 妊娠高血压疾病患者 外周血中内皮 祖细胞存在 数量下降和功 能受损 。内皮祖细胞的功能 又受到多种血管生成因子如血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor, VEGF)、 碱性成纤维因子 (fibroblast growth factor, FGF ) 等的调节。 整合素连接激酶 (integrin-linked kinase, ILK ) 是新近发现的, 具有促进 血管发生, 维持血管 内皮细胞功能的激酶, 在正常组 织的血管发生、形成和肿瘤血管发生方面起着重要的作用。本研 究通过检测妊娠期 高血压疾病中的重要类型 ??子痫前期患者脐血内皮祖