HPLC测定益肾康脉胶囊中补骨脂素和异补骨脂素的含量

HPLC测定益肾康脉胶囊中补骨脂素和异补骨脂素的含量 HPLC测定益肾康脉胶囊中补骨脂素和异 补骨脂素的含量 第3l卷第l7期 2006年9月 中国中药杂志 ChinaJournalofChineseMateriaMedica VoL31,Issue17 September,2006 HPLC测定益肾康脉胶囊中补骨脂素和异补骨脂素的含量 郝旭亮,刘霞,倪艳,李先荣 (山西省中医药研究院,山西太原030012) 益肾康脉胶囊系由补骨脂,麦冬,丹参等10多 味中药研制而成,临床主要用于治疗气血不足,瘀血 阻滞,宗筋失养所至腰膝酸软,精神不振,气短乏力 及阳萎,早泄等症.作者采用HPLC对君药补骨脂 的有效成分补骨脂素和异补骨脂素的含量进行了测 定,方法简便,快捷,重复性好,能较好的控制本品质 量. 1仪器与试剂 美国HP1100高效液相色谱仪(G1322A真空脱 气泵,G1311A四元泵,G1313AALS自动进样器, G1315DAD二极管阵列检测器,Chemstationsystem化 学工作站);电子天平,德国赛多利斯BP211D.乙腈 为色谱纯(天津四友试剂厂);水为重蒸馏水;其他化 学试剂为分析纯;补骨脂素对照品(供含量测定用,批 号10739-200310),异补骨脂素对照品(供含量测定 用,批号0738-9907).益肾康脉胶囊自制. 2方法与结果 2.1色谱条件采用大连依利特HypersilODS2 C18柱(4.6mm×250mm,5Ixm);柱温为室温;流动 相水.乙腈(7O:30);检测波长246nm.理论板数按 补骨脂素峰计算不低于3000. 2.2对照品溶液的制备精密称取补骨脂素对照 品,异补骨脂素对照品适量,加甲醇制成每1mL各 含5g的溶液,即得. 2.3供试品溶液的制备取胶囊内容物3g,精密 称定,置索氏提取器中,加甲醇适量,加热回流提取 2h,放冷,转移至100mL量瓶中,加甲醇至刻度,摇 匀,用微孔滤膜(O.45Ixm)滤过,取续滤液,即得. 2.4阴性对照溶液的制备按处方量除去补骨脂 药材,按工艺条件制备阴性样品.取阴性样品3g, 同法制得阴性对照溶液. 2.5空白试验照上述色谱条件,吸取供试品溶 [收稿日期12006-01—15 [通讯作者]'郝旭亮,Tel:(0351)4668028,E-mail:hxliattg-01 @163.com ? 1472? 液,对照品溶液,阴性对照溶液1O,分别注入液 相色谱仪.供试品溶液色谱中,在与对照品色谱相 应位置上,有一相同的色谱峰,阴性对照液在此保留 时间无干扰,见图1. I_ 】IB l】l …._i一 图1益肾康脉胶囊HPLC图 A.对照品;B.样品;C.阴性对照; 1.补骨脂索;2.异补骨脂索 2.6线性关系的考察分别精密吸取补骨脂素和 异补骨脂素对照品溶液(含补骨脂素5.5g? mL,,异补骨脂素6.2Ixg?mL)2.5,7.5,1O,15, 17.5,注入液相色谱仪中,记录峰面积,得补骨脂 素回归方程为Y=6481.0X+1.23,r=0.99997;异 补骨脂素Y=6862.3X一2.0,r=0.99996.结果 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明,补骨脂素在0.014—0.096Ixg,异补骨脂素在 0.016,0.108Ixg峰面积与进样量有良好的线性关 系. 2.7精密度试验精密吸取补骨脂素和异补骨脂 素对照品溶液各1O,按上述色谱条件各重复进 样5次,结果补骨脂素RSD0.39%,异补骨脂素 RSD0.42%. 2.8稳定性试验精密吸取供试品溶液每隔2h测 定1次,连续测定5次,结果补骨脂素RSD2.4%, (下转第1476页) 第31卷第17期 2006年9月 中国中药杂志 ChinaJournalofChineseMateriaMedica Vo1.31,Issue17 September,2006 肾脏影响的实验研究[J].北京中医药大学,2003,26 (2):26. [22]MitsumaT,YokozawaT,OuraH,eta1.Clinicalevaluationof kampomedication,mainlywithWen-Pi-Tang,ontheprogression ofchronicrenalfailure[J].NipponJinzoGakkaiShi,1999,41: 769. [23]TopezewskaBrunsJ,PawlakD,TankiewiczAKgnurenineme— tabolismincentralnervoussysteminexperimentalchronicrenal failure[J].AdvExpMedBiol,527:177. [24]徐书立.温脾汤对慢性肾衰病人血液流变学的影响.中医研 究[J],1999,12(6):22. [25]李经纬,余瀛鳌,蔡景峰,等.中医大辞典[M].北京:人民卫 生出版社,1995:1785. MechanismofWenpidecoctiondelayingprogressionofchronicrenalfailure ZHANGJier.WANYi.gang (1.DepartmentofTraditionalChineseMedicine,AffiliatedDrumTowerHospitalofNanjingUniversity MedicalSchool,Nanjing210008,China; 2.SecondClinicalCollegeofNanjingUniversityofTraditionalChineseMedicine,Nanjing210029,China) [Abstract]Wenpidecoctionamelioratestheharmfulfactorsofchronicrenalfailure,suchasmesangialmatrixanditscyto— kines,nuclearfactor,endothelium— dependentrelaxingfactor,oxidativefreeraidical,apoptosis,lipide,protein,andbloodrheology. Wenpidecoctionisalleffectiveagentfordelayingtheprogressionofchronicrenalfailure. [Keywords]Wenpidecoction;chronicrenalfailure[责任编辑刘睨】 (上接第1472页) 异补骨脂素RSD1.8%,表明供试品8h内稳定性较 好. 2.9重复性试验精密称取同一批样品3g,共5 份,按供试品溶液的制备方法,制备5份供试品溶液, 分别进样,进行测定,记录峰面积,结果补骨脂素和异 补骨脂素的含量分别为0.091和0.149mg?g,,其 RSD为2.3%和2.4%,表明本方法重复性好. 2.10回收率试验精密称取已知含量的样品5份, 分别精密加入补骨脂素对照品和异补骨脂素对照品, 按供试品溶液制备方法,制备5份供试品溶液,分别 进样,测定,记录峰面积并计算含量,补骨脂素平均回 收率为96.3%,RSD0.84%(n=5),异补骨脂素平均 回收率为98.4%,RSD1.4%(n=5),见表1. 2.11样品测定分别精密吸取对照品溶液与供试 品溶液各1O,按上述色谱条件测定,以外标一点 法计算样品中补骨脂素和异补骨脂素的含量,3批 样品测定结果,补骨脂素含量分别为每粒0.029, 0.030,0.030mg(n=3),异补骨脂素的含量分别为 每粒0.043,0.043,0.044mg(n=3),二者总含量分 别为每粒0.0720.073,0.074mg(n=3). ? 1476? 表1补骨脂素,异补骨脂素加样回收率 对照品样品中含量加入量 /rag/mg 测得量回收率平均值RSD /mg呵c,,呵( 3讨论 供试品溶液的制备方法研究中,对索氏提取和 超声提取进行了比较,以索氏提取效果更佳.对索 氏提取的时间进行了考察,确定提取时间为2h,可 基本提取完全. 在流动相的选择的研究中,对甲醇一水(55:45), 水一乙腈(70:30)进行了比较,结果以水一乙腈(70: 3O)作为流动相分离效果好,保留时间相对较短. [责任编辑鲍雷】