中药生发擦剂治疗雄激素性脱发的实验研究_李荣群

第 31 卷 第 3 期 2 0 1 3 年 3 月 中 华 中 医 药 学 刊 CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE Vol． 31 No． 3 Mar． 2 0 1 3 中 华 中 医 药 552 学 刊 中药生发擦剂治疗雄激素性脱发的实验研究 李荣群，卜夏威，景佐 (浙江中医药大学，浙江 杭州 310053) 摘 要:目的:观察所选中药擦剂对雄激素性脱发模型的治疗作用。方法:在所建立的大鼠脱发模型上用所 选中药擦剂分高、低浓度剂量涂于背部患处，观察记录大鼠背部毛发生长情况，通过测定血清雄激素的含量以及 皮肤 HE染色切片，综合分析该中药擦剂对毛发生长和毛囊形态结构的影响。结果:与模型组相比，药物治疗组 的毛发生长毛囊恢复生长，且高浓度组较低浓度效果更佳明显。结论:该中药擦剂具有治疗作用。 关键词:中药擦剂;雄激素性脱发 中图分类号:R285． 5 文献标志码:A 文章编号:1673 － 7717(2013)03 － 0552 － 03 Traditional Chinese Medicine Treatment of The Model of Androgenetic Alopecia LI Rongqun，BU Xiawei，JING Zuo (Zhejiang Chinese Medical University，Hangzhou 310053，Zhejiang，China) Abstract:Objective:To observe the therapeutic effects of selected traditional Chinese medicine liniment on the model of androgenetic alopecia． Methods:On the basis of the established rat hair loss model，Take selected traditional Chinese medicine liniment，Divided into high and low concentration dose，and smear in the back surface of the skin． Observing， and recording the growth of hair in rats＇back． By measuring the content of serum androgens and Observing the skin HE dyeing slice，analyse the influence made on the hair growth and the morphological of hair follicle comprehensive． Results: Compared with model group，the hair and hair follicles of drug therapy group grow again and the effect of the treatment in high concentration is more significant than it in low concentration． Conclusion:he traditional Chinese medicine liniment has a therapeutic effect． Key words:Chinese medicine;alopecia 收稿日期:2012 － 10 － 19 基金项目:浙江省教育厅资助项目(2010 － 26) 作者简介:李荣群(1974 －) ，男，山东青岛人，副教授，博士研究生， 研究方向:中医药治疗风湿免疫病的研究和临床。 雄激素性脱发(androgenetic alopecia，AGA) ，又称男性 型脱发、脂溢性脱发，是皮肤科临床的常见多发病，病程漫 长，顽固难愈。本病主要发生于 20 ～ 30 岁男性，临床主要 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 现为头发油腻，多屑，瘙痒，头部额颞区渐进性脱发形成 “高额”，顶部大部分或全部脱落，仅枕部及两颞毛发基本 正常，脱发处皮肤光滑，可见纤细毳毛，无自觉症状或有微 痒。雄激素性脱发是多因素综合作用的结果，遗传易感性 和头皮毛囊局部雄激素的代谢异常是导致本病发生的主要 因素。目前的研究发现它的发生不仅与睾酮(T)及其代谢 产物二氢睾酮(DHT)、毛囊单位的Ⅱ型 5α －还原酶和雄激 素受体(AR)的水平增高直接相关，而且长期精神紧张、饮 食失调、心理失衡及病菌感染(如糠秕孢子菌、痤疮棒状杆 菌等)也是诱发和加重本病的重要因素。 雄激素性脱发的病因尚未完全明确，目前尚无较好的 治疗方法。由于本病影响美观，常给患者带来很大的精神 压力和心理负担，而随着人民生活水平的提高，对本病治疗 的要求更为迫切，因此对本病的研究受到了广泛的重视。 基于现代社会人们生活节奏快，工作压力大等多方面原因， AGA患者逐年增多且呈年轻化的趋势，治疗 AGA 的药物 有很广阔的市场前景。 目前临床常用的西医疗法(非那雄胺片、米诺地尔溶 液等)还实现不了有效治疗脱发的目标，且存在着不同程 度不良反应、停药后易复发等缺点;外科手术治疗(自体毛 囊移植)虽毛囊的成活率很高但可出现感染、表皮囊肿等 并发症，而且外观往往不自然，对于本身头发稀少的患者， 手术难以实施，另外秃发面积较大的患者需多次植发，手术 费用昂贵。 中药治疗本病，注重辨证论治，标本兼治，从整体上调 节内分泌功能，在改善症状、延缓病程方面确实有较好的临 床疗效、且不良反应少，具有独特的优势，但主要为复方汤 剂，其治疗周期长，患者依从性差。在众多方法中，中药外 治患者最易接受，使用方便，易于长期坚持，但大多为酊剂， 对头皮，毛发刺激较大。 目前对 AGA的中医药研究仅局限于疗效观察阶段，实 验研究方面开展甚少。发病机制不清，治疗方法有限，研究 进展不大，其中最重要的原因之一就是缺乏理想的脱发动 物模型。因此，除了药效观察外，加强病理模型和基础实验 方法的研究显得尤为重要。把中医药理论和现代药理结 合，对中药复方进行筛选，揭示其作用机制，改良和优化现 有方剂，开发安全高效低毒的外用生发制剂极为迫切。本 文通过建立符合脱发发病机理的动物模型，然后给予中药 擦剂进行治疗，观察动物毛发生长情况和毛囊结构，对比分 析该中药擦剂药理作用和治疗效果，希望能够指导临床取 255 第 31 卷 第 3 期 2 0 1 3 年 3 月 中 华 中 医 药 学 刊 CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE Vol． 31 No． 3 Mar． 2 0 1 3 中 华 中 医 药 553 学 刊 得更好的临床疗效以及为新药研究开发提供可靠的依据。 1 材 料 1． 1 药品与试剂 甲睾酮片:购于杭州市第一人民医院。 天津力生制药股份有限公司生产，批准文号:国药准字 H12020153。临用前用碾钵碾成细分。睾酮测定试剂盒、 发光剂、Wash buffer缓冲液等，北京康大贝克曼科技有限公 司。生发擦剂:主要为炮山甲、水蛭、红花、血余炭、细辛、青 皮。 1． 2 动物 SD雄性大鼠 25 只，体重(200 ± 10)g，购于浙 江中医药大学实验动物中心，合格证号:SYSK(浙)2008 － 0115。 1． 3 仪器 BECKMAN COULTER Access Immunoassay Sys- tem化学发光仪;CUT4062 手动型旋转切片机。 2 方 法 2． 1 实验前准备 将 25 只 SD雄性大鼠随机分 4 组，空白 组和 3 个平行模型组，模型组各老鼠背部(面积约 4 cm × 6 cm)剃毛:用棉线及标记笔标记 4 点，先用剪刀剪毛(尽可 能多剪) ，再用剃刀剃毛，使皮肤充分暴露。 2． 2 脱发模型的建立 模型组分别给予 1 mL(1． 5 mg)甲 睾酮(取甲睾酮片 60 片，每片 0． 5 mg，碾成细粉，配蒸馏水 20 mL，搅匀)及 0． 2 mL猪油 /只灌胃。空白组给予等体积 蒸馏水。连续灌胃 60 d，定期拍照。 2． 3 中药生发擦剂的治疗 空白组每天灌胃蒸馏水 1 mL /只，其他各组给予同等体积雄激素及 0． 2 mL 猪油灌 胃。药物组给予药物涂擦，低浓度组 1 次 /天，高浓度组 2 次 /天。连续给药 30 d，定期拍照。 2． 4 毛囊组织形态学观察 实验第 60 d 随机取空白组大 鼠 1 只，模型组大鼠 2 只;实验第 90 d 取所有大鼠，备皮。 取背部定点皮肤(面积约 2 cm × 1 cm) ，经 10%福尔马林固 定，石蜡包埋切片，常规 HE染色。在光学显微镜下观察切 片，对比分析空白组、模型组和药物组的毛囊生长情况。 3 结 果 3． 1 雄激素水平 眼眶取血，每 30 d 1 次，选取上午 9 ∶ 00 眼眶采血，分离血清，采用化学发光法对各组大鼠血清睾酮 (T)含量进行检测，结果以均数 ±标准差表示(珋x ± s) ，见表 1。从表上可见，实验 30 d后，各组的 T水平显著升高(P ＜ 0． 05) ，已达到一个血清高睾酮量的状态，复合雄激素性脱 发的特征，为模型建立成功提供了可靠的依据。 表 1 鼠体内血清睾酮含量(ng /mL，珋x ± s) 组别 n 1 d 30 d 60 d 90 d 空白组 7(6) 5． 50 ± 2． 33 5． 83 ± 1． 81 5． 71 ± 2． 95 5． 63 ± 1． 97 模型组 6(5) 5． 91 ± 1． 76 8． 86 ± 2． 87* 9． 66 ± 3． 30* 10． 71 ± 2． 90* 低剂量组 6 5． 43 ± 2． 63 7． 76 ± 1． 78* 8． 81 ± 2． 42* 9． 77 ± 3． 25* 高剂量组 6(5) 5． 78 ± 1． 83 8． 90 ± 1． 70* 9． 95 ± 2． 27* 10． 12 ± 2． 57* 注:与空白组比较，* P ＜ 0． 05。 3． 2 毛发生长情况 我们分别对空白组和模型组剃毛后、 及之后第 30 d与第 60 d 毛发生长情况进行拍照。可见空 白组大鼠背部剃毛区域毛发生长基本正常，模型组大鼠出 现不同程度的斑秃，如插页Ⅵ图 1 所示。 为研究该生发擦剂对大鼠脱发模型毛发生长的影响， 我们分别对空白组、模型组实验第 90 d，药物低浓度组和药 物高浓度组治疗第 30 d毛发生长情况拍照，如插页Ⅵ图 2 所示。比较各组大鼠背部实验区正中央(面积约 2 cm × 4 cm)区块，可见药物治疗组大鼠背脊部脱毛区域毛发呈现 不同程度的恢复生长状况:药物低浓度组绝大多数大鼠较 模型组毛发生长明显，药物高浓度组绝大多数大鼠较低浓 度组毛发恢复生长区域更大，且毛发生长更密。 3． 3 毛囊形态学观察 为了观察该生发擦剂对大鼠毛囊 毛囊结构的影响，分别对空白组、模型组和药物治疗组大鼠 背脊部实验区皮肤进行了 HE染色皮肤切片。 观察发现空白组大鼠毛囊较大，较长，结构完整，大多 处于生长期，数目较多。模型组大鼠毛囊大多处于褪行期 或休止期，数量减少，萎缩微小化，部分毛囊消失仅见皮脂 腺。药物低浓度组大鼠毛囊较模型组有所增大，小部分重 新进入生长期，药物高浓度组大鼠毛囊大多重新进入生长 期，生长较大。如插页Ⅵ图 3 所示。 4 讨 论 毛囊和皮脂腺是对雄激素敏感的靶器官，睾酮是体内 主要的雄激素，游离的睾酮(FT)在体内经 5α －还原酶作 用转化为二氢睾酮，后者结合雄激素受体的能力比前者强 5 倍以上(有研究表明雄激素性脱发毛囊中的 5α －还原酶 活性异常增高，致使患者脱发区皮肤转化 FT 为 DHT 的能 力能加) ，与受体结合后一方面调控靶基因的转录，并表达 功能蛋白，从而改变细胞的功能，另一方面改变真皮乳头与 毛囊细胞间的信号传导，结果使毛发的生长期缩短，头发毛 囊逐渐萎缩、微小化，终毛转变为毳毛，最终引起脱发。皮 脂腺合成与分泌皮脂受雄激素调节，游离雄激素水平升高 或其功能失调导致对正常血清水平雄激素敏感性升高时， 皮脂腺增生，皮脂分泌增多，堵塞毛囊，致毛乳头供血不足， 营养缺乏而使头发枯萎脱落。过多的皮脂导致细菌寄生于 毛囊，夺取营养，堆积代谢产物，引发炎症和毛囊萎缩。 中医学认为雄激素性脱发与本肝、脾、肾三脏关系密 切，虚、瘀、湿、热为其主要病理机制。“发为肾之候”，“发 为血之余”，头发的生长与脱落，润泽与枯槁，与肝血肾精 的盛衰有密切的关系，精盛血旺，则头发润泽茂盛，精虚血 少，则头发枯槁脱落。现代社会由于生活节奏快，学习、工 作压力大，过度损耗精力，导致精血不足，肾阴亏虚;加上饮 食不节，过食肥甘候腻、辛辣酒类等，损伤脾胃，导致脾失健 运，水湿内停，郁久化热，湿热内生，上蒸巅顶，侵蚀堵塞毛 窍，毛发失养而脱落。 血瘀也是本病的病因病机之一。瘀血不去，新血不生， 瘀血阻滞了气血精微的传输，使毛囊局部失养，故毛发脱而 不生。此外，毛发的枯荣与否和肺也有直接关系，肺气虚 弱，不能卫外而固毛发，肺失宣散，布散气血津液于皮毛的 功能下降，则皮毛憔悴枯槁。 从中医学角度出发，遵循标本兼治的原则，辨证地选择 药物，在滋补肾阴、濡养肝血的同时，兼以健脾除湿，清热化 瘀，宣肺调气。 细辛散寒宣肺，所含的消旋去甲乌头碱有扩张血管的 作用;青皮疏肝理气，有消积化滞之功;血余炭能化瘀通窍， 含有钙、钾、锌、铜、铁、锰、砷等元素;红花和炮山甲为活血 祛瘀之药，能够扩张血管，降低血液粘度，红花还有抗炎和 免疫抑制的作用。水蛭主要用于破血逐瘀。 实验结果显示，由这几味中药组成的生发擦剂确实具 355 收稿日期:2012 － 10 － 18 基金项目:浙 江 省 中 医 药 优 秀 青 年 人 才 基 金 资 助 项 目 (2010ZQ016) ;台州恩泽医疗中心(集团)科研基金资助 项目(11EZD21) 作者简介:包祖晓(1974 －) ，男，副主任医师，博士，研究方向:中西 医结合防治脑病。 有改善脱发的作用，因实验采取的是背部涂抹的方法，故其 作用机制可能主要是通过扩张血管，使血流量增加，降低血 液黏滞度，改善微循环，加强毛囊营养，促进毛发再生。另 外，血余炭为毛发提供了其生长必需的多种微量元素。 由于本实验制造的大鼠脱发模型不能完全模拟人类雄 激素性脱发的发病机制，且单从观察病理切片入手不能完 全得出该中药擦剂发挥治疗作用的机理，有待进一步的实 验探究。 参考文献 ［1］ 赵丽欣．脂溢性脱发的实验研究述要［J］．辽宁中医药大学学 报，2009，11(4) :76 － 77． ［2］ 陈学荣．雄激素性脱发［J］． Chin J Dermato Venerol Integ Trad W Med，2004，(3) :109 － 110． ［3］ 吕沛忠．雄激素源性脱发中医辨证论治及实验研究进展［J］． 山西中医，2010，26(9) :53 － 54． ［4］ 马晓佳，王广，李丽琼，脂溢性脱发的中西医治疗进展［J］．云 南中医中药杂志，2009，30(6) :70 － 72． ［5］ 吴学春，魏跃钢．雄激素源性脱发的中西医研究进展［J］． 世 界中西医结合杂志，2010，5(9) :822 － 824． ［6］ 张金燕，仲少敏，杨淑霞，吴艳．影响雄激素源性脱发疗效的 相关因素分析［J］．中国美容医学，2010，19(8) :1176 － 1179． ［7］ Singh SM，Gauthier S，Labrie F． Androgen recep tor antagonists (antiandrogens) :structure activity relationship［J］． Curr Meb Chem，2000，7(2) :211． ［8］ Ding D，Xu L，Menon M，et al． effect of short CAG(Glutamine) repeat on human androgen receptor function［J］． Prostate，2005， 58:23 － 32． ［9］ 赵晖，陈家旭，脂溢性脱发的研究现状［J］． 时珍国医药， 2006，17(4) :497 － 499． 第 31 卷 第 3 期 2 0 1 3 年 3 月 中 华 中 医 药 学 刊 CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE Vol． 31 No． 3 Mar． 2 0 1 3 中 华 中 医 药 554 学 刊 肝肾阳虚型抑郁症与血清甲状腺激素关系及 助阳舒心方干预作用的研究 包祖晓1，何贵平1，孙伟1，田青2，刘素芝1，陈世勇1，周威3，陈文泽1 (1．浙江省台州医院，浙江 临海 317000;2．北京中医药大学第三附属医院，北京 100029; 3．武汉工业学院医学院，湖北 武汉 430023) 摘 要:目的:观察肝肾阳虚型抑郁症与血清甲状腺激素关系及助阳舒心方的干预作用。方法:将 100 例肝 肾阳虚型抑郁症患者随机分为治疗组和对照组，其中治疗组用助阳舒心方治疗，对照组用氟西汀治疗，疗程均为 6 周，比较血清甲状腺激素在治疗前后的变化，分析治疗前 HAMD总分、中医证候积分与血清甲状腺激素的相关 性，分析治疗前后 HAMD总分、中医证候积分减分率与血清甲状腺激素减分率的相关性。结果:肝肾阳虚型抑郁 症治疗前 TSH高于正常者占 17． 71%、T3低于正常者占 30． 21%、T4低于正常者占 18． 75%;治疗前 HAMD总分与 TSH含量具有正相关的关系，与 T3、T4含量具有负相关的关系;治疗前证候积分与 T4含量具有负相关的关系;治 疗前后 HAMD总分减分率与 TSH减分率具有正相关的关系;两组治疗前后 TSH、T3、T4的组内比较具有显著的统 计学意义(P ＜ 0． 01)。结论:肝肾阳虚型抑郁症与甲状腺激素变化有关，TSH 升高、T3和 T4的降低与病情严重程 度有关，T4的降低可用于证候诊断的参考，TSH减分率可用于临床疗效评估的参考，调控内分泌功能可能是助阳 舒心方治疗抑郁症的机制之一。 关键词:抑郁症;肝肾阳虚;助阳舒心方;氟西汀;促甲状腺激素;三碘甲状原氨酸;甲状腺素 中图分类号:R749． 41 文献标志码:B 文章编号:1673 － 7717(2013)03 － 0554 － 03 Research on Relationship Between Depression of Liver － Kidney Yang Deficiency Type and Serum Thyroid Hormone and Intervention of Zhuyang Shuxin Prescription BAO Zuxiao1，HE Guiping1，SUN Wei1，TIAN Qing2，LIU Suzhi1，CHEN Shiyong1，ZHOU Wei3，CHEN Wenze1 (1． Taizhou Hospital of Zhejiang Province，Linhai 317000，Zhejiang，China; 2． Third Affiliated Hospital of Beijing University of Chinese Medicine，Beijing 100029，China; 3． Wuhan Polytechnic University of Medicine，Wuhan 430023，Hubei，China) 455 第 31 卷 第 3 期 2 0 1 3 年 3 月 中 华 中 医 药 学 刊 CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE Vol． 31 No． 3 Mar． 2 0 1 3 中 华 中 医 药 Ⅵ 学 刊 中药生发擦剂治疗雄激素性脱发的实验研究 (正文见 552 － 554 页) (a)为实验前剃毛后大鼠脊背皮肤;(b)为 30 d后空白组大鼠该区域毛发生长情况; (c)为 60 d后模型组大鼠该区域发生长情况。 图 1 大鼠背部实验区毛发生长情况 (a)空白组;(b)模型组;(c)药物低浓度组;(d)药物高浓度组。 图 2 实验第 90 d，空白组、模型组、不同治疗药物浓度组大鼠背部脱发区毛发生长情况 (a)空白组;(b)模型组;(c)药物低浓度组;(d)药物高浓度组。 图 3 治疗 30 d以后，各组大鼠背部皮肤 HE染色切片