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编号:022225
中文名称:结晶紫中性红胆盐MUG琼脂(VRBA-MUG)
英文名称:Violet Red Bile Agar-MUG
用 途:
用于食品中大肠杆菌的平板计数。(GB/T 4789.38-2008)
原 理:
蛋白胨和酵母膏粉提供碳氮源和微量元素;乳糖是可发酵的糖类;氯化钠可维持均衡的渗透压;3号胆盐和结晶紫抑制革兰氏阳性菌,特别抑制革兰氏阳性杆菌和粪链球菌;中性红为pH指示剂;琼脂为凝固剂;大肠埃希氏杆菌含有的葡萄糖醛酸苷酶作用于4-甲基伞形酮-β-D葡萄糖醛酸苷(4-Methylumbellifery-β-D-Glucuronide简称MUG)的β糖醛酸苷键,使其水解,释放的4-甲基伞形酮在366nm紫外灯下产生蓝白色荧光。97%的大肠埃希氏杆菌、10%的沙门氏菌以及少量的志贺氏菌具有葡萄糖醛酸苷酶。
图鉴:
配方
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(每升):
蛋白胨7g
酵母膏粉3g
乳糖10g
氯化钠 5g
3号胆盐 1.5g
中性红0.03g
结晶紫 0.002g
琼脂15g
MUG0.1g
最终pH 7.4±0.2
使用方法:
1、 称取本品41.6g,加入蒸馏水或去离子水1 L,搅拌加热煮沸至完全溶解,分装三角瓶,无需高压灭菌,备用。
2、 以无菌手续取样品25g或25mL,加入含225mL无菌磷酸盐缓冲液(或生理盐水)的三角瓶内,充分振摇或用均质器均质1min成1:10稀释液,然后以1:10继续稀释,选择2~3个适宜的连续稀释度,每个稀释度接种两个平皿,倾注加热溶解并冷至45℃左右的培养基,琼脂凝固后再加3-4mL培养基覆盖平板
表
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层。
3、 36±1℃培养18—24h。
4、 微生物检验中观察菌落形态,并于暗室中用360nm~360nm波长紫外灯照射,计数平板上发浅蓝色荧光的菌落。
质量控制:
质控菌株接种后于36±1℃培养18—24h结果如下:
菌 名 菌 号 生长状况 培养特征
大肠埃希氏菌 ATCC25922 良好 有荧光,深红色菌落,周围有红色沉淀
产气肠杆菌 CMCC(B)45103 良好 无荧光,红色菌落,周围可有淡红色沉淀
粪链球菌 CMCC32223 受抑制 -----
贮 存:贮存于避光、阴凉干燥处,用后立即旋紧瓶盖。贮存期二年。
规 格:100g