输入性新型麻疹病毒D9基因型密切接触者中和抗体水平检测 输入性新型麻疹病毒D9基因型密切接触者中和抗体水平检测 了解输入性新型麻疹病例密切接触者血清对D9基因型病毒的中和抗体水平，探讨正常健康人群对感染新型麻疹病毒的抵抗力。
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采集D9基因型输入病例接触者血清和选择2008年四川省健康人群血清，分别用D9基因型输入病毒和本土流行株H1基因型病毒进行中和抗体滴度测定。结果 D9基因型输入病例接触者和四川健康人群血清的中和抗体滴度较高，对D9基因型输入病毒的中和抗体的几何平均滴度（以下简称GMT） 分别为44.02和54.57，对四川本土流行株H1基因型病毒中和抗体的GMT 分别为39.12和41.36，抗体滴度均达到保护水平（≥16）。结论 无论四川省本土流行株感染产生的抗体和疫苗免疫诱生的抗体对D9基因型输入病毒都有抵抗力。 麻疹是一种由麻疹病毒引起的传染性很强的呼吸道传染病，麻疹病毒属于副粘病毒科麻 疹病毒属，麻疹病毒只有1个血清型，到目前为止，WHO根据病毒核蛋白基因和血凝素蛋白基因的核苷酸序列差异，已发现了8个基因组（A-H）23个基因型在世界各地流行。根据我国麻疹网络实验室连续17年的病毒监测数据
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明，H1基因型是我国本土流行的绝对优势基因型。2009年四川省发现了我国大陆首例D9基因型输入病例[1， 2] ，并分离出D9基因型麻疹病毒。为了解密切接触者是否产生针对D9型病毒的保护性抗体及健康人群对新型病毒是否有抵抗力，并阻断其传播，采集D9型密切接触者和收集部分以往的健康人群血清分别进行针对D9基因型和流行株H1基因型病毒的中和抗体检测，现将结果
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如下。 1 材料与方法 1.1 血清 采集D9基因型输入病例接触者血清12份（麻疹IgM抗体全部阴性，年龄大于20岁）；选择2008年四川健康人群血清15份（麻疹IgM抗体全部阴性，年龄14岁以下儿童，为2008年强化免疫后的目标人群）。 1.2 麻疹病毒株 中和实验用D9基因型输入病毒09-1（以下简称D9株）和四川省2007年本土流行代表株H1基因型病毒07-7（以下简称H1株）。 1.3 细胞 使用WHO推荐的Vero/SLAM细胞，由国家麻疹实验室引进，使用15代以内的细胞。 1.4 中和实验方法 血清56℃30min灭活后，然后进行1：2到1：512倍比稀释，50μl不同稀释度的血清与 50μl100TCID50/50ul病毒混合后，37℃中和3h，然后加入100μl的Vero/SLAM细胞悬液（每个稀释度的血清同时做2孔）置37℃5%CO2培养箱中培养7d，以具有50%中和能力的血清稀释度的倒数为该血清的中和抗体滴度，中和抗体滴度≥2为阳性，≥16为达到保护水平。 2 结果 D9基因型输入病例接触者血清检测了12份， 2008年四川省健康人群血清检测了15份（表1）。 两类人群血清对D9 株H1株的中和抗体GMT均无统计学差异（F=0.812,P＞0.05） 3讨论 中和抗体检测法是一个经典的麻疹抗体检测方法 [3～9]，中和抗体表示中和病毒的能力。特异性的抗体与相应的病毒结合后，病毒便不能吸附于敏感的细胞或抑制其穿入，病毒只能被相应的抗体中和，这种抗体通常称为中和抗体，中和实验是以测定病毒的感染力为基础，因此健康人群抗麻疹病毒中和抗体水平非常有意义，它能代表人群免疫水平，反映个体抵抗病毒的能力。 从表1可见，D9基因型输入病例接触者和四川省健康人群血清对两种麻疹病毒的中和抗体阳性率均为100%，主要原因2008年初在全省范围内开展了麻疹的强化免疫使我们的目标人群免疫水平较高，2007年四川的麻疹疫情是近几年最严重的，使自然感染产生的抗体也较高。另据土耳其资料[6]：无论流行株抗原性变异与否，疫苗保护性抗体滴度应高于或等于16才能中和不同基因型的流行株。D9基因型输入病例接触者和四川省健康人群血清对两种麻疹病毒的中和抗体滴度均达到保护水平（≥16），从实验结果表明无论是本土野病毒感染产生的抗体还是疫苗免疫诱生的抗体对D9基因型和H1基因型都有相当的抵抗力，同时四川省乃至我国没有产生2代病人也应证了我们的实验结论。另外也表明我国现行的疫苗对预防输入和本土的麻疹病毒的感染是有效的，与陈志慧报道的结论是一致的[9]。两类人群对D9 株H1株的中和抗体GMT之间无统计学差异，但对D9 株的中和抗体GMT均略高于对H1株的中和抗体GMT，可能是样本量较少所致，但也应开展进一步研究。 随着消除麻疹工作的深入开展，及时发现输入病毒，防止扩散和爆发是相当重要的，一方面要通过常规免疫和强化免疫提高我们自身的抵抗力，另一方面也要提高监测的敏感性，加强宣传，提高防病意识，对高危人群和免疫空白人群进行监测和免疫，为下一步消除麻疹奠定坚实的基础。
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