【doc】雌性大鼠,小鼠生殖系统与人子宫内膜甾体激素分泌细胞的研究

【doc】雌性大鼠,小鼠生殖系统与人子宫内膜甾体激素分泌细胞的研究 雌性大鼠,小鼠生殖系统与人子宫内膜甾体 激素分泌细胞的研究 l990年 第l1卷第2期 Vo1.1lN0.2 19gO 雌性大鼠,小鼠生殖系统与人子宫内膜 甾体激素分泌细胞的研究 首都医学院组骞{胚胎学教研空诸定寿路欣王暑翠史小抹 首都医学院宣试医院计,0生育研究室叶廿 提耍,对雌性大鼠小鼠的生殖系窥^的午宫内瑛与蜕睦进行了3一?羟塾辔体脱氢酶(3-'14SDH)和脂娄的蛆编 化学研究.结果表明{在大鼠和小鼠的卵巢内,颗柱黄傩细胞和膜黄体细胞3?B—HSDH里强阳性反直,卵泡膜内层细胞 与间质组胞里中等程度阳性反应,大鼠与小鼠子宫内喷的袭面上皮与腺上皮璺阳性反应}^早孕期蜕睦中的子宫腺上皮 窘丑胞与大蜕曦细胞呈阳性反虚;在大鼠与小鼠的输卵中假你见到阳性反应物厅|在^的子宫盎曦中,没有见到阳性反 应.率研究订F聪,雌性大鼠和小鼠除卵巢分培甾体紊的功能外,子宫也有分泓摧体激素的功能.^卑孕期蜕膜组织中 的子宫麒与犬蜕膜细胞都能分泌甾体激素. 美t目3一B一羟基甾佳脱氲酶I脂獒}组织化学|卵巢}输卵管}子官内膜}蜕睦 雌性哺乳动物和人的性腺中具有丰富的 甾体激素合成细胞这已为人类生殖工作者 所共知.另外,在雌性生殖系统中,除性腺 以外还有哪些组织和细胞有合成甾体激素的 功能j在性骧内除黄体和卵泡膜内层细胞外 是否还有其它甾体激素台成细胞.这些也都 是人类生殖学者极感兴趣的的问 题 快递公司问题件快递公司问题件货款处理关于圆的周长面积重点题型关于解方程组的题及答案关于南海问题 . 3-一羟基甾体脱氢酶(3一:-HSDH)是蹦 体激素的标记酶.有此酶的组织(或细胞), 能够?成并且分泌甾体激嚣".因为此酶可 把lI{体激素的前身物质转变为孕酮和雄烯二 酮,尔后转化为其它甾体激素.能合成甾体 激素的细胞的另一特征是含有丰富的H目类. 由于组织化学 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 能鉴定出甾体激素合成细 胞的含有的3一—HSDH和脂质,因此,我们 试图用此方法从雌性生殖系统的其它组织中 找到新的甾体激素台成细胞. 1材料和方法 昆明系雌性小鼠20只,动情期l0只,动 情问期10只.昆明系雌性太鼠20只,动情期 牧稿日期I1989年2月20开 丰谦题经赞由国家计捌生育委员会资助 10只,动情向期10只.人子宫内瞪20例,增 殖期10例,分泌期lO例.人早孕期蜕膜2O阋 (孕30,70d). 用生理盐水l,3ml冲洗大鼠(或小鼠) 阴道,吸取冲洗液滴于载玻片上,盖上盖玻 片,干光学显微镜下检查,见大量白细胞者 为动情间期,见大量上皮细胞者为动情期. 动物处死后剖腹,1取出子宫,卵巢,输 卵管及肾上隙,迅速放入液氨内速冻.恒冷 籍切片,制扁8m厚切片,进行3一一羟基甾 体脱氢酶和脂类的研究. 取育龄妇女子宫内媵,入渡氮速冷.恒 冷箱切片,制成8~em厚切片,进行3一一羟基 描体脱氢酶及脂类的染色. 取正常人工流产蜕骥组织数块,入澈氮 内速冻.恒{孥箱切片,制成8m厚切片,进 行3一一羟基甾体脱氢酶及脂类的研究…. 1.13一—HSDH染色孵育液24ml内含 去氢表雄酮0.8mgl二甲基甲酰胺0.8ml} 0.1mol/L磷酸缓冲液(p王I7.1—7.4)2.0m1, 双蒸水5.2m】;Nifro—BT(1g/I)8.0ml; NADP(3g/L)6.4….切片人孵育渡,37? C 出 报M f学o e 院? 学 医n . 都-3 f . 眦 恒温箱,孵育11.然后用蒸馏水洗涤}10 生理盐水福尔马林液固定30rain;蒸馏水 —3min;自来水 洗涤,M7er氏苏水精复染1 冲洗5一10minj蒸馏水冲洗甘油明胶封 固.结果:3-—HsDI活性部位含深蓝色或 蓝紫色颗粒. 1.2浊红O染脂类 切片人蒸馏水洗J再人6O异丙醇内浸 洗}人油红O液染10min(子宫内膜30min)j 人6O异丙醇内浸洗J蒸馏永内洗,Mayer 苏木精复染1~3minj自来水冲洗5— 10miill;人蒸馏水j甘油明胶封固.结果: 脂滴呈桔红色,胞核呈蓝色. 2结集 2.1雌性小鼠生殖系统中3一—HSDH的分布 2.I.I卵巢在黄体的颗粒黄体细胞和 膜黄体纽胞的胞质内都充满蓝紫色的3一一 HSDH阳性颗粒,呈强阳性反应(图1). 黄体细胞间的其它组织为阴性反应. 在较大的卵泡周围可见一薄层3一— HSDH阳性反应的细胞,此层细胞为泡膜内 层细胞呈多边形胞质内充满蓝紫色颗粒.卵 泡的粒层细胞,卵丘中的卵泡细胞和啪胞 都呈阴性反应. 在小鼠卵巢的间质内,可以见到成片, 成团或单个存在的多边形上皮样细胞,这些 细胞的胞质内含有丰富的3-—IISDH阳性颗 粒,呈较强的阳性反应. 退化黄体,间质中幼稚结缔组织细胞的 3一~/-HSDH都呈阴性反应. 2.1.2输卵管输卵管的内噗,肌层与浆 膜大部分呈阴性反应,在输卵管子宫部内膜 的上皮组织中偶见阳性颗粒. 2.I.3子宫小鼠子宫内膜的表面上皮与 腺上皮3一—HSDH呈阳性反应,表面上皮比 腺上皮反应稍强(图2).内膜基质细胞呈 阴性反应,但也可见到少数阳性反应内膜基 92 质细胞. 2.2雌性小鼠生殖系统中的脂类 2.2.1卵巢颗粒黄体细胞与膜黄体细 胞质中都含有丰富的脂类,呈强阳性反应 (图A).较大的卵泡内层细胞呈阳性反应 (图B),卵泡的颗粒层细胞,卵丘的卵泡 细胞及卵细胞都为阳性反应.闻质腺为阳性 反应(图c),其他组织为阴性反应. 2.2.2输卵管输卵管子宫部的上皮细胞 含有少量腊滴,其余部有呈阴性反应. 2.2.3子富子宫肉膜的腺上皮细胞与表 面上皮细胞的胞质内含有较丰富的脂滴, 主要位于细胞的基底面.表面上皮脂滴含量 比腺上皮丰富.内膜间质内散在有极个别的 阳性细胞. 2.3雌性大鼠生殖系统中3-fl-HSDH的 分布 2.3.I卵巢颗粒黄体细胞和膜黄体 细胞的胞质内充满蓝紫色的3?—HSDH阳性 颗粒,呈强阳性反应.黄体细胞闻的其他组 织为阴性反应. 在较大的卵泡周围可见一薄层3- HSDH呈阳性反应的细胞,为泡腠内层.卵 泡的粒层细胞,卵丘中的卵泡细胞都呈阴性 反应. 在大鼠卵巢的间质内也可以见到成片, 成团或单个存在的多边形上皮样细胞,这些 细胞的胞质内含有丰富的3一.~-HSDH阳性颗 粒,呈较强的阳性反应. 原始卵泡,退化黄体,问质中幼稚结缔 组织细胞的3一—HSDH都呈阴性反应. 2.3.2输卵管输卵管的内膜,肌层与 浆膜大部分呈阴性反应,输卵管子宫部的 内膜的上皮组织中偶然可见34一HSDH阳性 颗粒. 2.3.3子官3-9'-HSDH位于子宫内膜的 表面上皮及腺上皮细胞(图8),反应稍强 于小鼠子宫内膜的表面上皮及腺上皮.有少 I?I?'???t???-, 数内膜基质细胞呈阳性反应. 2.4雌性大鼠生殖系统巾的脂类 2.4.1卵巢颗粒黄体细胞与膜黄体细胞 胞质中都含有丰富的脂类,呈强阳性反应. 较大的卵泡膜内层细胞呈阳性反应,卵泡的 颗粒层细胞,卵丘的卵泡细胞及卵细胞都为 阳性反应.间质腺为阳性反应(图4). 其他组织为阴性反应. (B)和=可质腺(C).深染为3一吕一HSDHm性反圈I太鼠卵巢:示赞体(A),?卵泡 鹿细胞 黄体呈强阳性反虚.卵泡噗内屡细胞和间质腺呈中等程度阳性反应.×1? 图2鼠子宫,予官内膜表面上班3一B—HSDH~性反应c箭头) 圈3小鼠卵巢,示黄体(A),卵泡(B)和间质腺(c).深染为FR性脂滴x400 罔t大鼠卵巢,浑染为问质晾中的脂类,足强m性反 2.4.2输卵管输卵管子宫部的上皮细胞 含有少量脂滴,其余部分呈阳性反应. 2.4.3子宫表面上皮和腺上皮细胞都呈 阳性反应,表面上皮稍强于腺上皮.脂类主 要位于上皮细胞的基底面,游离面较少. 内膜问质散在有少量呈阳性的细胞. 2.5育龄期妇女子宫内膜中3-~'-HSD]I 和脂类的分布 无论增殖期或分泌期子宫内膜表面上皮 与腺上皮,3-~'-HSDH都呈阴性反应.子宫 内膜中的脂类,无论增殖期或分泌期也都呈 阴性反应. 2.6人早孕期蜕膜组织rp3-fl-USDH和脂 类的分布 大蜕膜细胞的胞质内充满3-~?-HSDH阳 性颗粒与脂滴.小蜕膜细胞细胞呈阴性反 应.蜕膜中的子宫腺上皮细胞含有丰富的 3-~-HSDH阳性颗粒与脂浦. 5讨论 生化与组化研究证明,哪些组织(或细 胞)有3一fl-HSDH存在,哪些组织(者细胞) 就能合成甾体激素".肾上腺皮质,卵巢 黄体是合成甾体激素的重要内分泌腺,它们 对3一—HSDH与脂类应该显示强阳性反应. 我们的研究支持逸一理论.3一f6'-HSD/t与脂 90 类的分布完全一致.在肾上腺,它们位于皮 质,而髓质则为】男性;在黄体_}|它们位于颗 粒黄体细胞与膜黄体细胞,其它组织则为阴 性. 据报道,在卵巢内,除黄体能分泌甾体 激素外,次级卵泡膜内层细胞和间质腺也有 分泌甾体激素的功能",.我们的研究也证 SHDH与脂类在泡膜内 明了这一理论.3-— 层细胞和间质腺呈阳性反应;在泡膜外层细 胞与卵巢结缔呈阴性反应. 3-8一HSDH和脂类的组化特性可阻作为 鉴定某种组织或细胞有无分泌甾体激素功能 的依据.我们的研究支持这一观点. 我们用阻上的结果进一步对大鼠,小鼠 的子宫,输卵管,人的子宫内膜及早孕期蜕 膜进行了3-8一HSDH与脂类的组织化学研 究.研究发现,大鼠,小鼠子宫内膜的表面 上皮与腺上皮的胞质内含有3一一HSDtI,并 且大鼠比小鼠丰富.脂类的分布与3一一 HSDH相一致.更显着的是,脂类位于上皮 细胞的基底面,而游离面极少.腺腔与宫腔 内的分泌物都呈阴性反应.这一现象说明,这 些脂类并非是营养物质,也不阻某种形式分 泌排入腺腔与宫腔,而是经基膜排入毛细血 管.这一现象也反应了它们是激素的可能性 较大.根据阻上结果,我们认为大鼠与小鼠 的子宫内膜也能分泌甾体澈素. 我们发现,在大鼠与小鼠的输卵管的子 -8一HSDH与脂类的阳 宫部能见到很微弱的3 性颗粒,而其它部分都为阴性.根据逸一现 象,我们认为大鼠与小鼠的输卵管没有分泌 甾体激素的功能. 曾有人报道,人的子宫内膜能分淞甾体 激素.我们的研究未证明这一观点.无论增 殖期还是分泌期,3-—HSDH与脂类在人子 宫内膜的上皮细胞中呈阴性反应.这些结果 的产生,可能是由于人子宫内膜中3一一 HSDH与脂类的含量较少,组化不易显示 或我们的材料太少,这种物质未披发现.有 关人子宫内膜中3一—HSDH与脂类的存在与 否有待进一步研究. 7O年代末,80年代初,人类生殖学家们发 现蜕膜大细胞有分泌胎盘催乳素(prolactin) 的功能,经细胞分离,培养与免疫细胞化学 研究证实,分泌这种激素的细胞为大蜕膜细 胞.我们在蜕膜的组织化学研究中偶然发 现,大蜕膜细胞与蜕膜中的腺体上皮细 胞含有丰富的3一~-HSDH.根据这一现象, 我们对人早孕期蜕膜(孕30—75d)作了系 统的研究,结果表明,早孕期蜕膜中的大细 胞,表面上皮与腺上皮细胞都有分泌甾体激 素的功能. 参考文献 1BentleyPJ.方柬强译.脊稚动物比较内分泌 学.第1版.北京:科学出版社,1984.44 2武内忠男,『【和郎.朱逢春译.新酶组织牝学' 第1版.北京?人民卫生出版社,1982 3上海第一医学院主缩.组觊学.第lJi匣.北京: ^民卫生出版社,l982 4Yir~gY.Prolactinproductinbyexplants ofnormal,lutealphasedefective,and correctedlutealphasede,ectivelate 94 seeretoryendometrium.AmJObstet GyileCOi1985I15lI801. 9BraverlT~nAB,BagniA.Isolationof prolactinproducingcellsfromfirst andseCondtrimesterdecidua.JClin EndocrinolMetab1994|58?52l 6三兴翠.^早孕期蜕膜组织书的细胞的形态学及 组织化学研究.首都医学院.1988;9(2)t g0,99 1990~]:- 第1l卷第2蛳 首都医 JOul~nalofCapital 学院 1nstitute0fMedicino Vo1. 11No. 2 l9g0 HistochemicalDemonstrationof3一—HSDH ActivityintheFemaleReproductiveSystem oftheRatsandMice , WomenSEndometrium andtheHumanPrognancyDeeiduas ZhuDingshou,LUXin,WangXingcui,ShiXiaolln DepartmentofHistology,CapitalInstituteofMedicine YeDan XuanwuHospital,CapitalInstituteofMedicine IfthetiSSueororganhave3-~-hydroxySteroiddehydrogenase(3-ff-HSDt1), theycansynthesizetheSteroidhormone.Accordingtothatidea,Wehave studiedthedistributionof3一—ItSDHinthefemalereproductivesystem0r ratsandmice,hureaiitendometriumanddeciduawlthhistochemlealtechniqUeS. Theresultsasfollows:1. Thegranularluteincellsandthethecaluteincells haveshowedaStrongpositivereactlon. Theintcrnacellsandmetrialgland cellSweremiddlepositivestaininginthenvdryofratsandmice.2.The glamlularepitheli?111ndtheSllrperficiaIcpitheliumshowedmoderntcpositive reactinn.3.TheglalldularepitheliumandthebigdccidualcellSofhumman dcciduaWeremoderatepositive.. We(1idllO[1ookforapositiveendometriaI ce?sin】llt111RUenflouletrh,111. The1)reSent$tlIdyllavebeenidentifiedthatthe11teruSofratsandmice,aud theendommitrialepitheliamsandbigcellsofWomensdeciduapoSseSsedtile functiontoSecreteSteroid]lormmoneS. Weproposedthatthe11terUSofratand miceand】Illmaitdeciduamay}Ieaendocrilieorgan. Keywordslhistochem【stYi3?一HSDH1endometrium}decidua 95