蝴蝶兰的种子培养

第 ；1卷 第 4期 广 西 农 业 生 物 科 学 2002年 12月 VoI．21，No．4 JournafofGuang~ Agric．an~t"Bio1．Science Dec．．2002 文章编号 ：1008—3464(2002)04—0258—03 蝴蝶兰的种子培养 杨美纯，周歧伟，许鸿源 (广西大学 农学院，广西 南宁 53OOO5) 摘要：在 MS，KC，花宝三种基本培养基中，MS最适合蝴蝶兰种子的萌发 ，加香蕉汁 150 g／L可明显 提高种子发芽率并促进幼苗生长 ；MS+BA 3 mg／L+NAA 0．05 mg／L也有利于蝴蝶兰种子的萌发及幼苗生 长；活性炭可有效 防止幼苗变褐死亡；多效唑 1．5 mg／L可以促进幼苗根的形成，使试管苗移栽成活率达 95％ 以上 。 关键词 ：蝴蝶兰 ；种子培养；快速繁殖 中圈分类号 ：Q949．718．43 文献标识码 ：A Seed culture of Phalaenopsis YANG Mei—chun，ZHOU Qi—wei，XU Hong—yuan (Agric． College，Guangxi Univ．，Nanning 530005，China) Abstract：M S medium was the best for the germination of Phalaenopsis seeds among 3 media ， M S，KC and Hyponex．The germination rate was increased and the seedlings growth was promoted by adding 1 50 g／L of banana juice．MS+BA 3 mg／I +NAA 0．05 mg／L favoured the germination of Phalaenopsis seeds and the growth of Phalaenopsis seedlings．Active carbon were effective for prevent the seedlings from browning and dying． Key word：Phalaenopsis；seed culture；rapid propagation 蝴蝶兰 (Phalaenopsis)又称蝶兰，为兰科蝴蝶兰属花卉，其花形酷似蝴蝶 ，花色丰富艳丽，花期 持久，被誉为 “兰花之后”，具有很高的观赏价值，是一种名贵的室内装饰植物。原产于热带和亚热带 的蝴蝶兰适宜在广西南宁一带种植 ，在华南地区有很好的开发前景 。蝴蝶兰属于单茎性气生兰，用传 统的分株法繁殖年增殖系数仅为 1～3，蝴蝶兰的种子非常细小 ，不含有为种子萌发提供营养的胚乳或 其它组织，胚发育不完全，在 自然条件下很难萌发L1]，因此兰科种子的无菌培养是工厂化生产兰花种苗 的一条重要途径。另外，蝴蝶兰可以和兰科其它属的品种人工杂交，产生更加丰富多彩的花形花色，形 成新的品种 ，而兰科种子的无菌培养是杂交新品种培育的唯一途径。 1 材料 与方法 1．1 供试材料 供试材料为台湾 51号 (花瓣粉红色，上有深紫红色条纹)，五福村 (唇瓣红色，其它花瓣白色)的 三种杂交 种子 ：(A)51号 × 51号 ，(B)五福村 × 51号 ，(C)51号 × 五福村 。 收稿 日期 ：2001—08—18 基金项目：广西大学科研基金资助项 目 作者简介 ：杨美纯 (1951一)，女，壮族 ，广西河池人 ，广西大学副教授。 维普资讯 http://www.cqvip.com 第 4期 杨美 纯 等 ：蝴蝶 兰 的种子 培 养 259 1．2 人工授粉 蝴蝶兰 4月底到 5月初开花，花粉发芽力可维持 1～7 d，开花第 1 d花粉发芽力最强，雌蕊最好的 授粉 时间是 开花后 3～4 d，授 粉时用镊 子先将母本的花粉块除去 ，再将父本的花粉块轻轻放在母本的 柱头上，柱头上有粘液，可粘住花粉块，为防止已授粉的花再被昆虫传粉，可将母本花的唇瓣除去，不 用套纸袋 [2]。授粉后 ，花 冠逐渐枯萎 ，子房膨大形成 蒴果。 1．3 无菌播种 取授 粉 1 00～ 1 1 0 d未 开 裂 的 蒴 果 在 自来 水 下 冲 洗 1 0min，在 超 净 工 作 台 内 用 7 5 的酒 精 浸泡 1 min，0．1 HgC1：灭菌 15 min，无 菌水 冲洗数 次 ，然后把蒴果纵切为二 ，用镊子将粉末状的种 子撤在培养基上 ，培养基内先加入几滴无菌水 ，种子加入后轻轻摇动 ，使种子分布均匀。培养室白天 温度 28±2℃，晚上最低 15℃，每天照光 12 h，光强 1500 lx。 已开裂 2 d的蒴果装入小绸布袋，扎紧袋 口，依上法灭菌。蒴果开裂后多数种子已散落，果内的絮 状纤维上附有少量种子，接种时把纤维连同种子一并接入，培养条件同上。 2 结果 与分析 2．1 基本培养基对蝴蝶兰种子萌发和幼苗生长的影响 在 不加 激 素和 其 它物 质 的情 况 下 ，蝴 蝶兰 种 子在MS、KC两种 基本 培 养基 中 的萌发 率为 20 ～30 ，在花宝基本培养基中的萌发率为 10 ～20 (因种子为粉末状 ，非常细小，无法精确统 计萌发率)，从萌发种子的进一步发育情况看，MS组的幼苗发育较好、较快，KC组的次之，花宝组的 最差。这可能与 MS培养基含有全部植物生长发育必需的矿质元素，而花宝只含有 N、P、K三种元素 有关 。 2．2 激素对蝴蝶兰种子萌发和幼苗生长的影响 在 MS，MS+NAA 0．05 mg／I 两种培养基中分别加入 BA 1，3，5 mg／L，组成 6组培养基，播 种结果表明，6个组的萌发率都在 70 以上，其中MS+BA3 mg／L+NAA0．05 mg／L组的最高，达 100 ，播种 后 30 d，种 子变绿、膨大 ，直径约 1 mm；播种后 120 d，一半种子长 出叶片 ；播种后 200 d，小苗高约 2 cm，转入 MS+BA3 mg／L+NAA0．05 mg／L培养基中；播种后 300 d，小苗高约 5～7 cm，具 3～5条根 ，根直径约 3 mm，根长约 3～5 cm。 2．3 香蕉汁对蝴蝶兰种子萌发和幼苗生长的影响 蝴蝶兰种子在 MS+香蕉汁 10 ，MS+香蕉汁 15 两组培养基中，萌发率均高达 100 ，种子萌 发时间比加激素的各组提早 10~20 d，小苗叶数、叶绿素含量、根长、根粗等各项指标均高于激素处 理组 ，其 中 MS+香蕉 汁 15 组的小苗长势略好于另一组 。 蝴蝶兰种子播种在MS+BA3 mg／L+NAA0．05 mg／I +香蕉汁 15 培养基中，种子萌发率、萌发 时间以及小苗叶数、叶绿素含量、根长、根粗等各项指标与 MS+香蕉汁 15 组的无明显差异，从成本 上考 虑 ，还是选用 MS+香蕉 汁 15 培养基 较为经 济。 2．4 多效唑 (MET)对蝴蝶兰幼苗生长的影响 把播 种后 200 d的小苗转 入 MS+香蕉 汁 15 +MET1．5 mg／I 的培养基 中，以 MS+香蕉汁 15 的培养基作对照，90 d后观察结果表明，MET处理组小苗茎、根、叶的伸长生长受抑制，根数、根粗 比对照组的增加明显，叶片变厚变短，叶色深绿，植株健壮 ，这些形态上的变化 ，可以减少小苗移栽 时的水分蒸腾 ，扩大根尖的吸收表面积，有利于提高小苗移栽的成活率。 2．5 活性炭对防止褐变的作用 上述所有培养基中，分别加入 0．2 ～0．3 的活性炭，可以有效防止试管苗因褐变而导致的死亡。 维普资讯 http://www.cqvip.com 260 广 西 农 业 生 物 科 学 第 21卷 2．6 移栽 小苗高约 5,-~7 cm，具 3～5条根时，把培养瓶移到室外阴棚下炼苗 2～4周后，将小苗栽于水苔中， 其它组的成活率约为 80 左右，MS+香蕉汁 15 +MET1．5 mg／L组的成活率可达 95 以上，移栽 后，MET抑制伸长生长的作用逐渐消失 ，小苗以后能正常生长及抽苔开花。 2．7 杂交后代 的性状 本实验 的试管苗种 下两年后开花 ，51号 自花 授粉的 A 种子 ，花色仍然与母株一样 ，花瓣 粉红色 ， 上有深紫红色条纹。B、C两个杂交种的花色相同，唇瓣红色，其它花瓣都是 白底有浅紫红色条纹，清 新典雅 ，兼 有父 、母本 的一些特征 。 2．8 种子采收时间 用本实验方法处理已开裂 2 d的蒴果种子 (授粉后 108 d开裂)，接种后每瓶仅有极少数小苗长出， 而且污染 严重 ，因此蝴蝶 兰种子培养应选用未 开裂的蒴果 。在南 宁的气候条件下 ，授粉后 90"~100 d， 当蒴果饱 满 、果皮绿 中泛黄时即可采 收播 种。授粉后 超过 100 d，蒴果容易开裂 ，一般气温越高 ，蒴果 开裂的时 间越提前 。 3 讨论 MS+香蕉汁 15 ，MS+BA3 mg／L+NAA0．05 mg／I 培养基均有利于蝴蝶兰种子的萌发及幼苗 生长 ，MS+香蕉 汁 15 +MET2 mg／I 有利于培养健壮植株 ，提 高试 管苗移栽的成活率 。 MET是一种植物生长延缓剂，对蝴蝶兰试管苗有壮苗和促进生根的作用E引，根据我们的观察，在 使用浓度低 的情况下 ，并 不影响到试管苗 移栽后 的正常生长及抽苔开花 。 本实 验从种子播种 到开花 ，需要 3～4年 的时间，这与分株 繁殖开花所需的时 间一样 。一个饱满 的 蒴果可 以培 养出成千上万 的小苗 ，因此用人工 授粉的方法获得种子 ，再无菌培养获得小苗 ，是解决蝴 蝶兰种苗短 缺的一个快速 有效 的途径 。 参考文献 ： [13 卢恩聪，兰花栽培入门 [M]．北京 ：金盾 出版社，1990，19． [23 卢恩聪，中国兰与洋兰 [M]．北京：金盾 出版社，1994，12． [33 杨美纯 ，周岐伟，许鸿源．外部因子对蝴蝶兰叶片原球茎状体发生的影响[J]．广西植物，2000,20(1)：42~46． 遗i 一 维普资讯 http://www.cqvip.com