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GABA的测定GABA的测定Berthelot显色反应:利用苯酚和次氯酸钠与游离氨的反应,生成有色化合物来测定不同体系中微量氨及其盐类,灵敏度高。标准γ-氨基丁酸溶液经Berthelot显色反应可在645nm附近出现最大吸收峰。y=0.4408X-0.0077,相关系数R2=0.9945选择甲醇作为脱色剂,加入AlCl3有效地除去叶中的水溶性色素后,用分光光度计测出。1、样品测定:称取研磨后的荞麦叶粉末0.5g,加入装有3mL甲醇的离心管中,室温振荡10min,5000r/min离心15min,弃上清;再加入2mL甲醇,室温振荡...

GABA的测定
GABA的测定Berthelot显色反应:利用苯酚和次氯酸钠与游离氨的反应,生成有色化合物来测定不同体系中微量氨及其盐类,灵敏度高。标准γ-氨基丁酸溶液经Berthelot显色反应可在645nm附近出现最大吸收峰。y=0.4408X-0.0077,相关系数R2=0.9945选择甲醇作为脱色剂,加入AlCl3有效地除去叶中的水溶性色素后,用分光光度计测出。1、样品测定:称取研磨后的荞麦叶粉末0.5g,加入装有3mL甲醇的离心管中,室温振荡10min,5000r/min离心15min,弃上清;再加入2mL甲醇,室温振荡10min,5000r/min离心15min,弃上清;待沉淀完全干燥后,加3mL去离子水,40℃水浴中振荡提取10min,5000r/min离心15min,取上清;再加2mL去离子水,40℃水浴中振荡提取10min,5000r/min离心15min,取上清;两次提取的上清液合并定容至10mL,低温(4℃)保存备用。每次取2mL低温保存液,加入0.5mol/L的AlCl3溶液8mL,待沉淀完全后,室温振荡5in,12000r/min离心5min,取上清液加入1mol/L的KOH溶液1.2mL,室温振荡5in,12000r/min离心5min,上清液即为待测样品提取液。用相同的操作将10mL低温保存液全部提取完毕。取全部叶样品提取液,稀释至25mL,在630nm波长下测得吸光度。2、标准曲线的绘制:分别称取γ-氨基丁酸标准样品1.250g、1.000g、0.750g用去离子水溶解,定容至250mL,配置成不同浓度的标准样品溶液。每次取不同浓度γ-氨基丁酸标准样品溶液1mL,依次加入pH8.0的缓冲液4mL、6%苯酚1.4mL,混匀移入40℃水浴锅,加滴5%次氯酸钠2.2mL,恒温显色20min后用水稀释至10mL。然后从低到高,依次测量吸光度,绘制标准曲线。纵坐标为吸光度,横坐标为浓度。
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