β2微球蛋白免疫比浊法在日立全自动生化分析仪上的应用

国际医药卫生导报 2009年 第 l 5卷 第 24期 IMHGN，December 2009，Vo1．15 No．24 l3 微球蛋白免疫比浊法在 日立全自动 生化 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 仪上的应用 田一娟 · 临床检验 · 【摘要】 目的 探讨免疫比浊法在 日立 7170A全自动生化分析上检测血清 B 微球蛋白的 应用。方法 在日立7170A全自动生化分析仪上建立8，微球蛋白测定参数，采集100例做体检 的健康人空腹血液标本，分离血清测定p，微球蛋白含量，建立实验室参考值；收集健康人测定 B，微球蛋白后余下的血清制备成混合血清，用来做批内、批间、回收试验和室内质量控制试验 标本，进行批内、批间、回收实验和室内质量控制测定。结果 实验室参考值设立为：0．46 2． 34 mg／L。混合血清的测定批内结果为 (1．390±0．010)mg／L，CV=0．719％；批问测定结果为 (1． 40±0．017)m L，CV=I．2l％。三个不同浓度的标准品与混合血清混均后检测 p，微球蛋白的回 收率分别98．25％、98．29％、99．24％，平均回收率为98．59％。结论 在H立7170A全自动生化分 析仪上采用免疫比浊法测定血清B，微球蛋白，实验结果重复性和准确性均能满足临床要求，具 有操作方法简单 、快速等特点。 【关键词】 B，微球蛋白；全 自动生化分析仪；测定 目前测定 p z微球蛋白 (p 一MG)的方法 有免疫酶标法、放射免疫法、毛细管电泳免疫分 析法和最新文献 报告 软件系统测试报告下载sgs报告如何下载关于路面塌陷情况报告535n,sgs报告怎么下载竣工报告下载 的微流控芯片电泳免疫法等 等；这些检测方法均有各自的特点和不足：免疫 酶标法重复性不高；放射免疫法试剂有效期短， 试剂有放射性易造成环境污染；放射免疫法、毛 细管电泳免疫分析法均需要昂贵的免疫测定仪； 微流控芯片电泳免疫法虽然具有微型化 、集成 化、分析速度快、试剂消耗少等显著特点，但仪 器到 目前为止没有得到普及 ，只有在极少部分大 学和研究机构的实验室能开展检测，因此开展 血、尿 B：微球蛋白分析均会受到一定的限制Il_ 1 。 全自动生化分析仪在医院是一种常规分析仪 器而且非常普及，采用免疫比浊法在全自动生化 分析仪测定B 微球蛋白将具有广泛的前景。现 将我们采用免疫比浊法在日立7170A型全自动生 化分析仪，检测 B z微球蛋白的一些实验参数和 对这种方法进行的初步评价结果报告如下。 1 材料与方法 DOI：l0．3760／cma．j．issn．1007—1245．2009．24．022 作者单位 ：52841 5 中山市陈星海医院检验科 1．1 试剂检测原理 人血清中的 B 微球蛋白与 包被在胶乳颗粒上的抗人 B 微球蛋 白结合反应 产生混浊 ，其浊度程度与 8 微球蛋 白浓度成正 比，并且通过生化分析仪器可进行比浊法测定。 1．2 仪器检测参数的设立 日立7170A生化分析 仪测定参数的设定：标本量为2 l，试剂 I用 量为 180 l，试剂Ⅱ的用量为20 l，检测方法 为两点终点法(2Point End)，校准模式为Logit Log 4P，主波长为546nm，副波长为800nm，反应方向 为正反应方向，反应时间为 10分钟 ，仪器第一 点读数第 l8点，终点读点为第 34点，温度为37 cc。 1．3 实验室参考值的建立 随机收集2007—2008 年来院进行健康体检人员血样共 100例，其中男 50例，女 50例 ，年龄 18～60岁。健康者血液学 检查 ：肝 、肾、心功能指标 、血糖 、血脂结果均 正常。标本采集方法：空腹采集静脉血3ml，分 离血清后测定 p 微球蛋白，根据测定的平均值 和标准差来建立实验室参考值。 1．4 精密度测定、回收试验和室内质量控制的 建立 1．4．1 精密度测定 收集测定 B 微球蛋白后的健 国际医药卫生导报 2009年 第 l5卷 第 24期 IMHGN，December 2009，Vo1．1 5 No．24 康人标本余下的血清，做成混合血清作为批内、 批间试验和室内质量控制试验标本；将混合血清 标本连续检测 20次作为批内试验结果；然后将 混合血清分成若干小份保存于 一20℃冰箱条件 下，每天取出一份混合血清测定 1次，并记录实 验结果，连续检测 20天作为批间实验结果 ，计 算批内及批问检测B 微球蛋白的精密度 (变异 系数 )。 1．4．2 回收试验 吸取250 l稀释后浓度分别为 6．25mg／L、3．12mg／L、1．56mg／L的标准品溶液加入3 支试管中，然后在每支试管中再分别加入已定值 的混合血清250 l，混均将其当普通标本，每份 标本重复检测 3次，取平均值，最后计算它们的 回收率 。 1．4．3 室内质量控制的建立 将所收集到的混合 血清定值后作为室内质量控制血清，并将其分装 成小份额标本，保存于一2O℃冰箱；混合血清靶 值和标准差的设立：取前面批内及批间共40次 测定的结果，将计算得出的平均值和标准差作为 本批混合质控血清的靶值和标准差。室内质量控 制的测定：每天取出一份混合血清检测 B 微球 蛋白的含量，判断本批实验结果是否在控。 1．5 统计学处理 所有数据均用 SPSS10．0软件进 行统计 。 2 结果 2．1 血清 B 微球蛋白实验室参考值 随机收集 的100例健康人血样测定 B：微球蛋白实验结果 为(1．40±0．47)mg／L。实验室参考值范围设立为： 0．46～2．34mg／L。 2．2 精密度测定结果 混合血清测定的批内结果 (重复检测20次)为 (1．390±0．010)mg／L，CV= 0．719％；混合血清测定的批间测定结果 (检测 20 批次 )为 (1．40士0．017)mg／I ，CV=I．21％。 2．3 回收试验 三个不同浓度的标准品加混合 血清后混均检测 B 微球蛋白结果，计算得出的 回收率分别98．25％、98．29％、99．24％，平均回收 率为98．59％。 2．4 室内质量控制结果 将混合血清作为室内质 控物其靶值的建立：用批内、批问共40个B：微 球蛋白测定结果，取它们的平均值作为靶值，经 统计学处理靶值为 (1．40±0．020)mg／L；经实验 观察采用小批量的混合血清作为室内质量控制标 本 ，测定的结果均在正负两个标准差范围内。 3 讨论 B 微球蛋白是人体内的一种低分子量蛋白 质，由淋巴细胞、血小板、粒细胞产生，广泛存 在于血浆、脑脊液、尿液等体液中；正常人 B 微球蛋白的合成及从细胞膜上的释放量是相当稳 定的，南于其分子量小能通过肾小球滤过并被近 端肾小管重吸收，因此血、尿G 微球蛋白的测 定可作为检测肾小球滤过率和近端肾小管重吸收 功能的敏感指标；在肾脏疾病、恶性肿瘤及各种 类型的白血病患者的血、尿B 一MG会有不同 程度的升高[4_51。 采用免疫透射比浊法在日立7170A全自动生 化分析仪开展 B 微球蛋白的测定，使用的试剂 是抗人 6 z微球蛋白抗体，试剂有很高的特异 性，试剂无放射性污染，实验结果重复性、准确 性、回收率和室内质量控制结果均能满足临床及 实验室要求；因为生化分析仪在一般医院普及率 非常高，所以不需要另外投资特殊的检测设备就 能开展B 微球蛋白试验。因此，免疫比浊法在 日立 7170A全自动生化分析仪上测定血清 B 微 球蛋白，具有操作方法简单、可快速得出实验结 果等特点，值得推广应用。 参考文献 【1】 潘爱平 ，王惠民，金庆辉，等．微流控芯片电泳免疫 法检测 B，微球蛋 白fJ1．南通大学学报 ，2008，28 (1)：17—19． 【2] 林敏，朱柳君 ，李辉．尿微量蛋白检测及尿蛋白电泳 在肾脏疾病诊 断中的应用【J]．放射免疫学杂志 ， 2006，19(6)：502—502． 13l3 周新．临床生物化和生物化学检验[MI．3版．北京：人 民卫生出版社，2002：266—267． 14J 李素平，孙秀华，温琥玲．血清 p，微球蛋白与常用 肾功能检测指标的临床应用及相关性分析fJ1．安徽 医学 ，2009，30(6)：648—649． [5] 王焕君，林美珊，郑字琼．血、尿p，微球蛋白测定 的临床意义『JI_实验与检验医学 ，2008，26(5 515— 516． (收稿日期：2 0 0 9—0 9 2 0) (本 文 校 对 ：谢 丹 ) 59