【doc】光合细菌抗脂质过氧化功能的研究

【doc】光合细菌抗脂质过氧化功能的研究 光合细菌抗脂质过氧化功能的研究 老年医学与保健2001年6月第7卷第2期C,eriatrHeahhCare,Jun.2001.Vol7,N02 光合细菌抗脂质过氧化功能的研究 俞吉安顾琪张承康范小兵 【摘要】目的评价RhedobaeterSphaeroidesNo.I体内外抗脂质过氧化功能.方法体 外试验.侧定在脂质易氧化 系统中(脑匀浆一Fen)超弱发光值(cP),代 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 脂质过氧化强弱的程度.体内试验,用 TBA荧光法硼定小鼠血清中脂质过 ,用轻胺法测定全血SOD的活性结果在体外氧化最终产物之一丙二醛(MDA)含量 系统中,当菌体浓度为5txg/L时, 脂质过氧化抑制率达到74.1%.当灌喂菌体悬液剂量为5ml/kg体重.d,四局后,血清 MDA含量下降了I3.7%(P< 005).小鼠全血超氧化物岐化酶(SOD)活性提高了694吼(P<0.叭)结论光台细菌 No1具有较强的抗脂质过氧化 功能.这种功能不仅是通过菌体内存在抗氧化剂的直接作用,而且可通过促进体内 抗氧化物酶活性而实现的. 【关键词】光台细菌;脂质过氧化;抗氧化物酶;丙二醒 STUDYoNANTI—PERO? DATIoNFUNCTIoNoFRHODoBACTERSPHAERomESNO.1 YuJianZhangChkn.Dept,Scienec.ShanghaiJiaotongb%iv200030Shat~ghai,China GuQ,,Shanghaitn.~tituteofGerontology,HuadongHospital,etaL 【Abstract】ObjecfiveAnevaluatlonofRhodabactersphaeroidesNo1irtthefunctionofanti —peroxidationwasstudied MethodsThebrainhomogent—Fe".thatfichedwitheaslyoxidizedlipid.w? usedirtvitromeasuringsystem.Ultraweak ehemJ.1umineseerteevalues(CP3,,.)rept'eserttedthestrengthoflipidperoaidafioa.Inrive,t heconcentrationofMDA {malondlahyedle),whichisterminalsubstanceoflipidperoxidationinbloodserum,couldbe measuredbyTBAfluorescentmethod TheactivityofSOD 【superoxidedlmutase)inwholebloodwe,istTleaSLiFedbyusinghydroxy—aminemethodResultsWhenNo1 cellconcentrationw8165/Linvitromeasuringsystem,therateofinhibitinglipidperoxidatio nreached741%Whensus? pendedNo.1cells(5ml/kgbodyweightday)werefedtomicefor4weeks,theconcentrationof MDA~dueed137%(P< 0O5)andtheSODraised694%(P<001JThefunctionworldbestrongerwithincreasingdos ageConclusionsNo1cell hadastrongfurtetJonofanti—— lipidperoxidationwhichcouldbemMizedbythee~ectofsomeanti——lipidperoxidationmatter~in No.1cellsandalsobystimulatingtheaelixitiesofsomeanti—oxidationenzymes 【Keywords】Photosyntheticbacteria;Lipid—peroxidatlon;Enzymeofanti—oxidation;MDA 光合细菌中含有丰富的色素,它主要通过光合磷 酸化获取能量而生长繁殖,在接受光能同时,细胞内会 产生大量自由基(如氧自由基,羟自由基等)为保护细 胞膜.DNA等自身细胞的重要组份不受损伤,细胞内 含有丰富的胡萝h素,卟啉类化合物,泛醌等活一胜物 质,它们除行使合成色素,获取光能,电子传递功能外, 也是一类有效清除自由基,具有抗辐射,抗脂质过氧化 功能的活性物质,光合细菌作为一种新的微生物资源, 国内外已开发为一类新型的保健品.. 作者单位20~30上海交通大学生命科学技笨学院(俞t安,张席成) 昂立生物医药研究所(范小兵)华东医院上海老年医学研究所(胤琪) 本文为上海市科学技术发展基金项目:沪科鉴[200O]G023O3 本文在体外用典型富含易氧化脂质成分的测定系 统,分析光合细菌No.1株对脂质过氧化直接的抑制 作用.对老年鼠灌喂不同剂量光合细菌悬液4周岳分 析其血清中丙二醛(MDA)的含量并测定全血中超氧 化物岐化酶的活性(SOD)活'胜的变化来分析Rd sphaemidesNo.1在体内对机体抗氧化作用的影响,从 而探讨1号株的抗氧化活一胜.为其开拓光台细菌应用 于由氧自由基引发的心血管,肿瘤等疾病的治疗和预 防提供实验依据. 材料与方法 一 ,菌种及其培养类球红细菌1号株 (RhodebattersphaeroidesNo1)由上海交通大学生命 老年医学与保健2001年6月第7卷第2期GerlatrHealthCare,Jua2001,Vol7,No.2 科学技术学院分离保存,培养浓度为10/ml为试验 样品. 二,实验动物昆明种小鼠.雌性,老年鼠为l5月 龄,少年鼠为2月龄,由复旦大学医学院动物部提供. 三,光合细菌对脂质过氧化抑制作用测定"取 新鲜小鼠大脑组织1g匀浆,加人9mlPH74磷酸缓冲 液制成含10%脑匀浆的悬液,每份样品取400tzl,加人 不同浓度光合细菌菌体悬液20(对照用缓冲液代 替),用缓冲液将总体积补至900~1,37?;温育30min 然后加成lOmmol/L的FeSO溶液1O01~L,继续温育 15min.用化学发光仪SGH—I(由上海上立监测仪器 厂生产)测定3O秒内累积脉冲数(CP) 四,血清丙二醛(MDA)含量测定"用改良TBA 法(硫酸巴比妥法)测定. 五,全血超氧化物岐化酶(SOD)活性测定采 用羟胺法. 结果与讨论 一 ,在脑匀浆一F测定系统中,光合细菌对脂质 过氧化的抑制作用 脑组织中含有丰富的磷脂和不饱合脂肪酸等一类 极易氧化的物质,加人Fe离子后,引发和加速脂质 过氧化作用,并由此产生的生物材料超弱发光,其强度 代表了脂质过氧化程度,可由化学发光仪直接测定. 本实验采用光合细菌1号株培养液经5000转/分离 心得湿菌体,再加入pH7.4磷酸缓冲液,在低温下,进 行超声波破碎,制得不同浓度菌体悬液,离心所得上清 部分也待测定抗氧化活性. Table1TheinhibitingfunctionofNo.1cellsonlipid—peroxMafion inthebrainhom~gent—Fdsystem CP30S4978?351293?321053?22965?I5877?26 Inhibiti…ate%74.I79OSI8B31 C空白测量杯平均为8,根据表l测得cPm计 算,当系统中加人光合细菌悬液浓度为0.25rng/L时 (系统中实际浓度为0.25mg/L×20t~L?lml:5/ L),其抑制作用就十分显着,高达74.1%. 在体外测定系统中,光合细菌中一些活性成分如 类胡萝I-素,卟啉类化合物(合成色素前体),泛混(电 子传递链重要成员)等有机化合物中均含有共轭双键 等一类特殊结构,可能具有淬灭和稳定氧自由基的作 用,而培养物上清液中,一些自溶菌体及一些复杂代谢 物也显示了微弱的抗脂质过氧化活性. 为阐明菌体在机体内抗氧化能力,我们设计了以 下实验. 二,光合细菌对小鼠血清丙二醛含量影响 取老龄鼠(15月龄)40只,随机分成4组,每组l0 只.其中一组为老龄对照组,其余三组灌喂低,中,高三 个剂量光合细菌悬液,另取少龄小鼠(1O只)为少龄对 照组对照组不灌喂光合细菌悬液,而灌喂蒸馏水代 替,4周后实验末期取血测定各项实验指标 Table2TheeffectofNo.1cells0ntheconcentrationofMDA inblood~erlllll[i?) Gmup1.oldeontmlGroupGroup5-young00atGroup 丙二醛(MDA)是体内不饱和脂肪酸和脂质等过 氧化终产物之一,其含量的多少可反映组织细胞的脂 质过氧化的强度,用光台细菌给小鼠灌喂后,各组血 液中MDA的含量均有不同程度的下降,特别是3组, 4组与老龄对照组相比,统计上差异显着,表明光台 细菌El服后可提高老龄小鼠的体内抗氧化能力 三,光合细菌对小鼠体内抗氧化酶活性的影响 光合细菌在上述实验中表明它在体内外均有抗脂 质过氧化活性,在体外可以断定它作为抗氧化剂直接 发挥抗氧化作用,但生物体内一些抗氧化酶是抗氧化 重要的防御体系,故我们测定了用光合细菌喂小鼠后 对血清中超氧化物岐化酶(SOD)活性的影响. Table3TheeffectofN玑1cells0?theactivityofSODinwholeblood Comparing髓chgroupwiththeold~ntm]groupP(00 87 耋生堕堂堡壁1年6月第7卷第2期GeriatrHealthCare,Jun.2001,Vol7,No2 以上实验中对照组灌喂蒸馏水,实验组灌喂不同 剂量光合细菌培养液(10/L)连续灌喂28天后,取全 血测定SOD活性,实验表明用光合细菌灌喂小鼠后, 其体内SOD活性显着增高,当灌喂剂量为1ml/kg体 重.d时,SOD酶活平均值提高仅为5%,但当剂量达 5ml/kg体重.d时,SOD酶活提高69.4%,且差异有 显着性 因此可以肯定光台细菌在体内有促进抗氧化酶活 性的作用.光台细菌抗氧化活性不仅是菌体内的抗氧 化活性剂(如胡萝素,卟啉等)对脂质过氧化直接抑 制作用,而且具有促进抗氧化酶活性的功能.两者协 同作用下,发挥其抗氧化活性. 参考文献 1JagieloPJQuinnTJ,Qure~hiGraindusl—inducedlunginflammalion isreducedRhodobaeterspaeroid~diphosphoryllipidAAmJPhys- iol,1998,274(1Pt1)L26,L3I 2刘倥清,王梦亮,齐延兵,等.康强硒(CONSE)对恶性肿瘤的辅助治 疗的临束观察.山西医科大学,I997,28(1):48,50 3俞吉安,叶永铸.林志新,等光台细菌中娄胡萝紊对脂质过氧化 抑制作用上海变通大学,I998,32(3):107,1II 4八国木夫.过酸化酯质测定临床检验,I979.23(2):1I5I16 5鄱从平.罗方华几种检测趣氧化物岐化酶活性反应比较植物生 理学通讯.1983.I9(5):46,49 6罗娈明.朱莲珍血种组织中过氧化物酶括力测定方j击一IYI'I~D直 接j击.卫生研究,1987.16(4):457,458. (收稿:2000—11—13修回:2001—05—11) 作者简介俞吉安男1946年出生上海变通大学生命科学 技术学院教授.占L事馓生物代谢调控研究丑教育 应用无张力疝修补术治疗老年腹股沟疝 杨威余静李春花 我院从1999年2月到2000年8月采用成套产品疝环充填 物和成型朴片(Bard~Mash&PerFix~Pl),对17例老年腹股 掏疝患者进行了无张力疝修补术,治疗效果满意,现 报告 软件系统测试报告下载sgs报告如何下载关于路面塌陷情况报告535n,sgs报告怎么下载竣工报告下载 如 下. 临床 资料 新概念英语资料下载李居明饿命改运学pdf成本会计期末资料社会工作导论资料工程结算所需资料清单 奉组l7侧患者,年龄62,84岁.平均年龄743岁;均为男 性.斜疝l2例.直疝5例.其中双侧疝7例,复发疝2侧,1例为 第三次复发.单侧疝1O例.复发疝2例.台并有前列腺增生症. 慢性支气管炎和肺气肿,l2例.该17侧患者均在连续硬膜外麻 醉下施行疝环充填式无张力疝修补术.使用的修补材料为成套 的疝环充填街和成型补片(Bard0Mesh&PerF;x0Hug).术式 采用 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 疝环充填式无张力疝修补术.手术均成功. 结果 手术时间为18,65分钟,平均375分钟.术后伤口常规沙 袋压迫4—6小时.6小时后允许患者下床括动.24小时内伤口 有轻度疼痛.3倒患者应用止痛剂一次.术后尿潴留1例无伤 口持续性疼痛,1侧伤口有硬结和隆起.并伴有异物感.无阴囊 积液,切口血肿和感染.元一例困手术而造成原有疾病加重.术 后住院4,10天.随访3,18个月,无短期复发. 讨论 疝环充填式无张力疝修补术的优点在于真正达到丁疝外科手 术所 要求 对教师党员的评价套管和固井爆破片与爆破装置仓库管理基本要求三甲医院都需要复审吗 的元张力.手术操作简单,损伤小.术后疼痛轻.饿复 快,并发症少和复发率低(<I%J.因此对于老年患者或伴有其 台并症而无法耐受传统疝修补手术者,该术式应为最佳的术 式选择l.本组的治疗结果可很好地说明这一点. 本组1侧尿潴留.可能与手术时间较长及硬膜外麻醉有 关.经留置导尿24小时后缓解.1倒切口硬结和隆起.分析原因 与早期手术经验不足有关.疝环充填物未完全置八疝环内而高 于腹横筋膜水平或补片未放置平整产生卷曲所致.一般可暂时 观察而无需特殊处理. 按常规要求,术后可不用沙袋进行局部压迫止血,但考虑 到老年患者的凝血机制较差.恐有血肿发生,如一旦发生血肿. 又有异物植^体内,会对术后康复产生不利影响.但随着手术 经验的进一步提高.术中仔细止血.今后可简化该步止血措 施. 总之.由于疝环充填式无张力疝修补术有着更符台人体正 常生理解剖结构的特点.及其众多优点.是治疗老年愎股沟疝 较理想的手术方式. 参考文献 传统疝修补手术困其不符号人体正常的生理解剖结构,埘 于老年患者的禁忌症鞍多,效果较差(复发率>10%上I.而2 作者单位:610031四』II省第五人民医院外科 ? 88t RuikowIM.RobbinsAWMeshplugherniarepair:^follow—up~porl Surgeu'.1995.177(3):597,601. 王康.李平,刘勇疝环充填式无张力疝修补术30例报告 四【医学.1999,20(4):361—362 (收藕:2001OI27修回:2001—04—23)