[说明]MS培养基的配制

[说明]MS培养基的配制[说明]MS培养基的配制 MS培养基的配制 1、配制几种母液 (1)配制MS大量元素母液一般将大量元素分别配制成100倍的母液，使用时再分别稀释100倍。分别称取名称重量名称重量 NHNO 165g KHPO4 17g 432 KNO 190g CaCl?2HO 44g 322 MgSO?7HO 37g 42 各自配成1L的母液。各自倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。 (2)配制MS微量元素母液一般将微量元素配制成100倍母液。依次称取(注:溶好一个后，再加下一个) 名称重量名...

[说明]MS培养基的配制 MS培养基的配制 1、配制几种母液 (1)配制MS大量元素母液一般将大量元素分别配制成100倍的母液，使用时再分别稀释100倍。分别称取名称重量名称重量 NHNO 165g KHPO4 17g 432 KNO 190g CaCl?2HO 44g 322 MgSO?7HO 37g 42 各自配成1L的母液。各自倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。 (2)配制MS微量元素母液一般将微量元素配制成100倍母液。依次称取(注:溶好一个后，再加下一个) 名称重量名称重量 KI 0.083g NaMoO?2HO 0.025g 242 HBO 0.62g CuSO?5HO 0.0025g 33 42 MnSO?HO 1.69g CoCl?6HO 0.0025g 4222 ZnSO?7HO 0.86g 42 配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。注:CuSO?5HO和CoCl?6HO 由于称取量很小，如果天平精确度没有达到万分之一，4222 可先配成调整液。分别称取CuSO?5HO 0.05g，CoCl?6H2O 0.05g 422 各自配成100ml的调整液，然后取5ml就还有0.0025g的量。 (3)配制MS有机母液一般配制成100倍MS有机母液。依次称取(注:溶好一个后，再加下一个) 名称重量名称重量肌醇 10g 盐酸硫胺素(VB1) 0.01g 烟酸 0.05g 甘氨酸 0.2g 盐酸吡哆醇(VB6) 0.05g 配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。 (4)配制MS铁盐母液一般配制成100倍MS铁盐母液。依次称取EDTA二钠 3.73g，FeSO4?7H2O 2.78g(注:溶好一个后，再加下一个) 配成1L母液，倒入1L试剂瓶中，存放于冰箱中。所以MS母液有5种大量元素母液，加上MS微量元素母液、MS有机母液和MS铁盐母液，共8种母液。 (5)激素母液的配制各种生长素和细胞分裂素要单独配制，不能混合在一起，生长素类一般要先用少量95%的酒精或1当量的NaOH溶解，细胞分裂素一般要先用1当量的盐酸溶解，然后再加蒸馏水定容。一般取100mg配成100ml母液。 2、配制培养基以配置1L MS培养基为例，按顺序进行如下操作: (1) 先在烧杯中放入一些蒸馏水。 (2) 分别取上面八种母液10ml倒入。 (3) 一般称取30g蔗糖倒入，搅拌溶解。 ) 加蒸馏水用量筒定溶至1L。 (4 (5) 按设计好的方案添加各种激素，由于激素的用量很小，而且激素对组培植物的生长至关重要。所以有条件的话最好用微量可调移液器吸取，减少误差。 (6) 用精密试纸或酸度计调整PH至5.7-5.8。(有条件的话使用酸度计，比较精确) 可配1当量的HCL和1当量的NaOH用来调溶液PH值。 1当量HCL配制:用量筒量取8.3ml配成100ml溶液。 1当量NaOH配制:称取NaOH 4g 配成100ml溶液。 (7) 称取5g左右琼脂粉(质量好的琼脂粉),倒入上面配好的溶液中，放在电炉上加热至沸腾，直到琼脂粉熔化。 (8) 稍微冷却后，分装入培养容器中。无盖的培养容器要用封口膜或牛皮纸封口，用橡皮筋或绳子扎紧。 ) 放入消毒灭菌锅灭菌，灭菌20分钟左右。(9 (10) 灭菌后从灭菌锅中取出培养基，平放在实验台上令其冷却凝固。

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