生物化学实验
报告
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供检验护理专业使用
班级
姓名
郑 州 大 学 护 理 学 院
实验一 血清蛋白质醋酸纤维薄膜电泳
[目的]
[原理]
[仪器组成]
[操作与结果]
[结果粘贴]
实验二 酶的特异性
[目的]
[原理]
[操作与结果]
加入物
1号试管
2号试管
3号试管
pH6.8缓冲液
20
20
20
1%淀粉
10
10
-
1%蔗糖
-
-
10
稀释唾液
10
-
10
煮沸唾液
-
10
-
结果(颜色)
将以上1、2、3号试管置于37℃水浴箱保温10分钟。然后向各管中加班氏试剂20滴,沸水中煮沸10分钟,取出勿振摇试管,观察结果并
记录
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。
[分析]三管结果及原因。
实验三 温度、pH、激活剂、抑制剂
对酶反应的影响
[目的]
[原理]
[操作与结果]
(一)温度对酶反应的影响
加入物
1
2
3
1%淀粉
10滴
10滴
10滴
pH6.8缓冲溶液
20滴
20滴
20滴
稀释唾液
10滴
10滴
10滴
温度
0℃
37℃
100℃
在上述温度下放置10分钟后,每管各加入稀碘液1滴
结果
[分析各管的颜色变化原因]
(二)pH对酶反应的影响
加入物
1
2
3
pH5.0缓冲溶液
20滴
-
-
pH6.8缓冲溶液
-
20滴
-
pH8.0缓冲溶液
-
-
20滴
1%淀粉
10滴
10滴
10滴
稀释唾液
10滴
10滴
10滴
上述各试管混匀置于37℃水浴箱中保温10分钟
稀碘液
1滴
1滴
1滴
结果(颜色)
[分析各管的颜色变化原因]
(三)激活剂、抑制剂对酶反应的影响
加入物
1
2
3
4
pH6.8缓冲溶液
20滴
20滴
20滴
20滴
1%淀粉
10滴
20滴
20滴
20滴
蒸馏水
10滴
-
-
-
1%NaCl
-
10滴
-
-
1%CuSO4
-
-
10滴
-
1%Na2SO4
-
-
-
10滴
稀释唾液
10滴
10滴
10滴
10滴
上述各试管混匀置于37℃水浴箱中保温10分钟
稀碘液
1滴
1滴
1滴
1滴
结果(颜色)
[分析各管的颜色变化原因]
实验四 721型分光光度计的使用
[目的]
[原理]
[构造]
[使用]
实验五 血清葡萄糖的测定
[目的]
[原理]
[操作]
加入物
空白管
标准
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管
测定管
蒸馏水
10μl
-
-
葡萄糖标准液5.55mmol/L
-
10μl
-
血清
-
-
10μl
酶酚试剂
1.5ml
1.5ml
1.5ml
将上述各管混匀,置于37℃水浴箱中保温15分钟,取出分别倒入0.5cm的比色杯中,选择波长λ=505nm,用空白管调节“0”及“100”,分别读取标准管及测定管的吸光度
A标、A测。
[计算]
[临床意义]
实验六 琥珀酸脱氢酶的作用及抑制
[目的]
[原理]
[操作]取三支试管按下表操作
加入物
1
2
3
4
匀浆液
10滴
10滴
-
10滴
1.5%琥珀酸钠
10滴
10滴
10滴
10滴
1%丙二酸钠
-
10滴
10滴
10滴
蒸馏水
20滴
10滴
20滴
-
0.02%甲稀兰
1滴
1滴
1滴
1滴
各管混匀,加入少量液体石蜡覆盖表面,置37℃水浴保温15-20分钟,取出勿振摇,观察。
结果(颜色)
[思考]
1、液体石蜡起什么作用?
2、各管颜色变化的原因?
实验七 肝脏中酮体的生成作用
[目的]
[原理]
[操作]
加入物
1
2
3
4
肝匀浆
20
-
-
-
肌匀浆
-
20
-
20
蒸馏水
-
-
20
30
pH7.6 磷酸盐缓冲液
15
15
15
15
洛克液
15
15
15
15
丁酸
30
30
30
37℃保温30分钟后取出各加15%三氯醋酸10滴,静止数分钟,各取出清液数滴于显色板上,加入显色粉显色。
结果(颜色)
[分析各管颜色变化的原因]
实验八 血浆CO2CP测定
[目的]
[原理]
[操作]
[计算]
[意义]
实验九 血清谷丙转氨酶测定
[目的]
[原理]
[操作]
加入物
空白管
测定管
蒸馏水
0.1ml
-
血清
-
0.1ml
基质液
0.5ml
0.5ml
将空白管、测定管分别混匀,置入37℃水浴箱保温30分钟,取出加入2.4二硝基笨肼的盐酸溶液各0.5ml混匀后再置入37℃水浴保温20分钟。取出加入0.4M的NaOH5ml,混匀。
选择波长λ=505nm,用空白管调节“0”及“100”,读取测定管的吸光度A测。查标准曲线。
[结果]
[意义]
实验十 血清钾、钠测定
[目的]
[原理]
[操作]
1、钠测定
计算
2、钾测定
计算
[思考题]血清K+、Na+ 测定有何临床意义?
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