检验科实习记录(医学检验)

检验科的实习记录（医学检验专业）1免疫室输血前九项Elisa（乙肝两对半+丙肝抗原+丙肝抗体+梅毒抗体+艾滋）乙肝五项化学发光时间分辨定量检测肝炎病原学Elisa（甲+乙+丙+戊）自身抗体全套检测(欧蒙试剂+免疫印迹法)自身免疫性肝病（欧蒙+免疫印迹法：自免肝膜条）抗核抗体抗中性粒细胞胞浆抗体ANCA(欧蒙+膜条)CCP检测Elisa过敏原测定（欧蒙免疫印迹法）食入性+吸入性肥大氏反应（诊断伤寒O，H副伤寒甲乙丙）红细胞冷凝集试验结核抗体检测（金标渗滤法）呼吸道病原学检查全套梅毒{Elisa+→TPPA+TRUST}HBSAG+→金标条复查具体操作乙肝两对半Elisa（一步法）（12345，第5项HBCAb需稀释血清50ul+1.5ml生理盐水0.9%NaCl） 空白对照 阳性（P） 阴性（N） 样本血清 加样 50ul阳 50ul阴 50ul血清 加酶 50 50 50 混匀，37℃温育25min，洗板5次，最后一次尽量扣干 显色液A显色液B 5050 5050 5050 5050 混匀，避光显色15min 加终止液 50 50 50 50双波长测定注：HBeAb加样后，需加入中和抗原50ul梅毒螺旋体抗体Elisa 空白对照 阳性（P） 阴性（N） 样本血清 加酶 100ul 100ul 100ul 加样 20 20 20 混匀，37℃温育30min，洗板5次，最后一次尽量扣干 显色液A显色液B 5050 5050 5050 5050 混匀，避光显色15min 加终止液 50 50 50 50双波长测定丙肝抗体（同戊肝抗体） 空白对照 阳性（P） 阴性（N） 样本血清 加稀释液 100ul 100ul 100ul 加样 10 10 10 混匀，37℃温育30min，洗板5次，最后一次尽量扣干 加酶 100 100 100 混匀，37℃温育30min，洗板5次，最后一次尽量扣干 显色液A显色液B 5050 5050 5050 5050 混匀，避光显色15min 加终止液 50 50 50 50双波长测定丙肝抗原（没有质控品） 空白对照 阳性（P） 阴性（N） 样本血清 加稀释液 100ul 100ul 100ul 加样 100 100 100 混匀，45℃温育40min，洗板6次，最后一次尽量扣干 加酶 200 200 200 混匀，37℃温育30min，洗板6次，最后一次尽量扣干 显色液A显色液B 100100 100100 100100 100100 混匀，避光显色10min 加终止液 50 50 50 50双波长测定艾滋（北京万泰）甲肝 空白对照 阳性（P） 阴性（N） 样本血清 加样 50ul阳 50ul阴 50ul血清 37℃40min，洗板5次，最后一次尽量扣干 加酶 100 100 100 37℃20min，洗板5次，最后一次尽量扣干 显色液A显色液B 5050 5050 5050 5050 混匀，避光显色15min 加终止液 50 50 50 50双波长测定戊肝TPPA 1号标本 2号标本 3号标本 A 100ul稀释液(1:5) 100ul稀释液 100ul稀释液 B 25ul(1:10) 25ul 25ul C 25(1:20)(1:40) 25 25 D 25(1:40)(1:80) 25 25 E 25(1:80)(1:160) 25 25 F 25(1:160)(1:320) 25 25 G 25(1:320)(1:640) 25 25 H 25(1:640)(1:1280) 25 25 分别向以上A横排孔加入25ul血清，吸走25ul加入B排,依次作倍比稀释。C排加入25ul未致敏粒子，ABDEFGH加入致敏粒子注:粉红色(最终稀释倍数)混匀，静置两小时后观察结果。TRUST 1号 2号 原倍血清 50ul血清+50ul抗原悬液 50ul血清+50ul抗原悬液 1:2 稀释血清+50ul抗原悬液 稀释血清+50ul抗原悬液 1:4 ….. …..乙肝五项化学发光时间分辨定量检测IFFA（同个批号，每天只需做两个浓度的校准品，两点定标）HBsAg,HBsAb,HBeAg B D 样本血清 加样 50ulB校准品 50ulD校准品 50ul血清 室温下振荡器上孵育40min，洗板4次，最后一次尽量扣干 加铕标记物（稀释后） 100 100 100 室温下振荡器上孵育40min，洗板6次，最后一次尽量扣干 加增强液 100 100 100 测定HBeAb,HBcAb加样后，需加入中和抗原50ulHBcAb血清样品+1ml生理盐水稀释肥达氏反应4.875ml生理盐水+125ul待测血清（1：40稀释）加入第一竖排，此时试管内还剩2.5ml稀释血清，+2.5ml生理盐水补足5ml（1:80稀释）加入第二竖排，依次稀释下去 1:40 1:80 1:160 1:320 对照管（NaCl） 甲500ul 500ul 500ul 500ul 500ul 乙500ul 500ul 500ul 500ul 500ul 丙500ul 500ul 500ul 500ul 500ul O500ul 500ul 500ul 500ul 500ul H500ul 500ul 500ul 500ul 500ul向以上各管加入500ul相应的菌液。最后稀释倍数为; (1:80) (1:160) (1:320) (1:640) 红细胞冷凝集试验（两管血：抗凝全血+血清）将全血洗涤3次，制成洗涤红细胞，取30ul+2970ul生理盐水制成1%红细胞悬液倍比稀释血清 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 生理盐水 200 200 200 200 200 200 200 200 200 200 待测血清 200→1:2 200→1:4 200→1:8 200→1:16 200→1:32 200→1:64 200→1:128 200→1:256 200→1:512 200→1:1024向以上各管加入已制成的1%红细胞悬液200ul.全自动免疫分析仪(瑞士TECAN)时间分辨仪洗板机酶标仪超声波清洗仪连续加样枪2微生物染色革兰染色(真菌，一般检查)龙胆紫1min，水洗，甩干碘液1min，水洗，甩干脱色液（丙酮，乙醇）30s，甩干沙黄溶液复染30s，干燥抗酸染色（结核杆菌检查）石碳酸复红20-25min，水洗，甩干盐酸酒精（1-2次）脱至无色，水洗，甩干亚甲蓝复染5min，水洗，干燥墨汁染色隐孢子球菌黑色荚膜被染成？KOH用于检出头发,皮屑等中的真菌?转种1血平板2麦康凯3沙保氏（制作该平板时，不需要调节PH，偏酸，倒平板前加入氯霉素抑制细菌，用于分离真菌及对氯霉素耐药且耐酸的细菌）血液培养及鉴定（自动血液培养仪）[需氧+→血平板，麦康凯。厌氧+→两个血平板，一个麦康凯，一血平板放入孵箱中，另一血平板放入烛缸（厌氧环境）中培养]（都是三区划线法）若需氧厌氧都长菌，则转种两个血平板(O2,O\2)，两个麦康凯(O2,O\2)尿液培养及鉴定（1，2）尿液本来是无菌标本，但因为生理环境，采集时极易被污染，临床以有菌标本对待。血平板：棋盘法划线(用接种环取一环,连续作横、竖接种,期间不用灭菌(用于菌落计数，<10^5/L为污染菌,>10^5/L认为是感染菌)麦康凯:分区划线痰培养及鉴定（1，2，3）分区划线(直接取标本画)大便培养及鉴定(2,3)分区划线（直接画）真菌芽管实验：200ul健康人血清+第一区取菌种约1\3环鉴别真菌?上鉴定卡全自动血培养仪放瓶密码1取瓶positivebottle密码12345，打开机门后，可以连续取瓶——esc——yes——扫条码——扫完后——esc—yes——退出配制培养基称量：XX*1XX*0.X溶解：蒸馏水加热：搅拌调节PH：滴加NaOH,慢慢调节分装沙保氏培养基加入氯霉素？不用调PH原因？只有耐酸又对氯霉素耐药的细菌才能生长，抑制细菌生长，选择性生长真菌。绿脓杆菌（铜绿假单胞菌）特点：全自动微生物鉴定仪GPI(革兰阳性菌鉴定卡)GPS（革兰阳性菌药敏卡）GNI（革兰阴性菌鉴定卡）GNS（革兰阴性菌药敏卡）3体液室1尿常规（组合）尿液分析仪H-800质控：编号0500——阳性质控分析尿沉渣分析仪i质控（高值和低值）手动分析进样2尿常规（门诊）尿液分析仪BW-500质控3粪便常规（组合）涂片镜检：生理盐水涂片（保护红细胞原有形态）红细胞：皱缩红细胞、膨胀的红细胞（微调感受包膜同心圆感）、正常红细胞（圆圆的双凹圆盘形，吹动能翻转），大多可泛灰红色。白细胞：圆圆的，是红细胞体积的1—3倍，微调可见泛绿光，颗粒感。真菌（霉菌）：多见芽生孢子1）葵瓜子样，多见有一小点，微调亮亮的，泛绿光2）椭圆形较葵瓜子样大，微调亮亮的，体内多有一小点，常泛绿光（注意与泛黄光的那种鉴别，其内多没有小点）寄生虫：最常见钩虫，蛔虫，鞭虫隐血试验（OB）:原理：胶体金法检测粪便中的血红蛋白蒸馏水溶解（破换红细胞，释放血红蛋白？）4阴道分泌物常规（白带常规）Ⅱ的临界条件：E++,WBC<=15例：E++,WBC<=15,霉菌少量。则为Ⅲ5前列腺液检查乳白稀薄卵磷脂小体80%-90%（圆圆的，像闪光的星星，注意与变形的白细胞相区别）查见颗粒细胞（可能是吞噬了卵磷脂小体的吞噬细胞）查见淀粉样小体（同心圆）白细胞XX-XX/HP红细胞XX-XX/HP精子XX-XX/HP6精液常规检查例颜色：乳白性状：稀薄量：5ml镜下所见：A级精子20%。。。。。。快速直线运动B级精子35%。。。。。。缓慢运动C级精子20%。。。。。。缓缓运动或原地打转D级精子30%。。。。。。不动死精子精子活动率=(A+B+C)%白细胞XX-XX/HP红细胞XX-XX/HP精子计数：XX*10^9注;精液超过2h不液化，则不用计数。精子计数(稀释20倍)：20ul液化精液+0.38ml精子计数用稀释液，冲池后静置5分钟后计数。例：20*10*10^6*207胃液检查隐血检查颜色：棕红性状：粘稠量：10ml镜下所见（见到什么报告什么）：白细胞、红细胞、真菌、细菌、结晶等8其他穿刺液检查颜色性状量镜下所见。。。。。。9尿本周氏蛋白定性检查第一步：取小试管加入样本尿液1-2ml,滴加磺基水杨酸1-2滴，若出现白色浑浊或沉淀，则继续第二步。第二步：取1/3大试管其体积的尿液，加热至沸腾，使蛋白质变性沉淀，过滤取其滤液，冷却后加热滤液，若出现：沉淀——澄清——沉淀的连续现象，则为尿本周氏蛋白定性阳性。10尿乳糜试验检查4门诊生化室OlympusAU640试剂舱R1和R2电解质分析测定装置（K、Na、Cl）进样系统比色系统JA0001需要预处理后再上机的标本1糖化血红蛋白测定10ul全血（取之前务必混匀）+400ulHbA1cR3试剂，至少静置5分钟，上机检测。周一和周四做质控（高值和低值），质控时取样10ul需要保证精确。2血清总铁结合率测定1）200ul血清+200ul铁测定 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 液，混匀后孵育10分钟2）取一勺约绿豆大小碳酸镁加入，震荡混匀孵育10分钟3）离心5分钟，取上清液上机测定5八楼生化室Backmancoulter高速离心机（越高速要求配平越严格）1、AU2700(LJ)内生肌酐清除率（标本要求：一管血，一杯尿液）上架；血清+离心后尿液尿液标本条码号写在相应检验单上，没有单子的，记录下条码号、患者姓名、所做项目在纸上。24小时尿蛋白定量：写上24小时尿量总铁结合率（组合）：血清铁测定（抗凝离心血清）+总铁结合率测定（小杯上写上患者姓名）1、200ul血清+200ul铁标准液2、37℃孵育10分钟3、加入MgCO3，37℃孵育10分钟4、离心5分钟，吸取上清液上机做总铁结合率2、特定蛋白测定Ⅴ内风湿因子+抗“O”+C反应蛋白若只有C反应蛋白，则上Olympus生化项目3、微量元素测定（铜锌钙镁铁）火焰原子吸收光谱法微量元素测定BH-5300S博晖全血血清多元素分析仪绿色全血管试剂（子弹壳）处理液+40ul全血，混匀4、蛋白电泳○血清蛋白电泳仪器:SEBIAHYDRASYS试剂:sebia1、琼脂糖凝胶2、点样架3、滤纸（用于吸去琼脂糖凝胶表面的水分）4、固定条（2条）：用于固定琼脂糖凝胶上电泳仪6二楼血液室迈瑞BC5380血液分析仪试剂耗材：迈瑞原装稀释液、迈瑞溶血剂（四种）800i血液分析仪（适用于末梢血）动脉血气分析仪Backmancoulteraccess2心机标志物分析仪(每日质控+保养)赛科西德血沉仪7八楼血液室迈瑞血液分析仪BC5500ABX-120血液分析仪（含网织红细胞计数）赛科西德血粘度仪SA-6000SysmexCA-7000全自动血凝仪BC5500(JQ)质控编号9001（高值）9002（中值）开放-全血WBC+DIFFABX-120（JI）1）质控手动进样仓——当上下指示灯都为黄色时——进样——响声后才能移开标本网织红计数原理（荧光染料染色法）2）WBC无法进行分类时，先在仪器上手工分类方法：esc——memory——移动上下光标找到所需要分类的标本号如JI20（则仪器读取条码号为0001。。。r0010）——回车——F8——再按F8——在WBC分类散点图上——按Tab键使光标移到最上面那根临界线———移动上下键直到分出类为止（可以明显看出散点图分为五个区为最佳分类处）。——回车——（保存）按字母“Y”——（密码）esc退出——F10——选择2sending——回车确认传送数据3)ABX-120上查找数据，传输数据？Esc—memory—移动上下光标找到所需要传送的标本号———回车——F10——选择2sending——回车确认传送数据4)ABX-120上在原号上复测？Esc—memory—移动上下光标找到所需要复测的标本号———手动进样？自动覆盖？5）ABX-120上手动进样与自动条码识别进样不需用人工模式转换？（迈瑞53805500需要转换模式）编号原则：急诊干部病房，血液科的血常规(组合)第一次用0000JI1——100001JI11——200002JI21——300009JI91——100第二次用0000JI101——1100001JI111——1200009JI191——200第三次用急诊架0009JI291——300手动进样急诊编号;JI8001….8011…..SysmexCA-7000全自动血凝仪(LK)质控大样品杯+200ul用M方式做编号：QC01(蓝色盖)质控原液+1ml双蒸水801（紫色盖）质控原液+1ml双蒸水901（DD质控）质控配制：用1ml稀释液复溶冻干粉，再稀释10倍Menu——worklist——next——编号（identry）——例：701——点击项目（profile1（1）设置为凝血四项）——R（演算fib）或M（微量吸样）方式——repeat（一架上重复标本数）——enter——quit——上架(一定要拔去盖子！！！)PT凝血酶原时间测定APTT部分活化凝血活酶时间测定TT凝血酶时间测定FIB纤维蛋白原测定