三种方法测定消癌平注射液中吐温80含量的试验方案

南京圣和药业试验文件编号：三种方法测定消癌平注射液中吐温80含量的试验方案起草人:日期年月日审核人：日期年月日批准人：日期年月日圣和药业SANHOME®三种方法测定消癌平注射液中吐温80含量的试验方案目录一、试验背景1二、试验依据1三、试验设计及组织1四、试验参与人员及职责1五、试验目的1六、试验内容1试验用材料1试验仪器及设备1试验过程2七、试验结果2圣和药业SANHOME®第1页共页三种方法测定消癌平注射液中吐温80含量的试验方案一、试验背景：消癌平注射液是一种广谱抗癌药物，不管是单独用于抗癌治疗还是联合放化疗都有较好的疗效，其处方是通关藤浸膏和吐温80，其中通关藤浸膏是主药，吐温80为药用辅料，做增溶剂用，能够改善注射剂的澄明度，有文献记载中药注射液中吐温80的用量一般为0.02%～2%，本品不能盲目使用，高纯度的吐温80近无色，但一般市售的多为浅黄色，其间含有较多杂质，医学界 证明 住所证明下载场所使用证明下载诊断证明下载住所证明下载爱问住所证明下载爱问 ，含吐温80的注射剂可能会引起过敏反响，有争辩说明这些不良反响并非吐温80造成，而是吐温80中的杂质造成的，所以其杂质不彻底去除，单靠增加用量难以到达药用目的，不仅起不到很好的增溶效果，甚至会影响药物的吸取。其次吐温80因加热及贮藏会造成PH值下降，可使溶液变浊，起不到很好的增溶效果，这就 要求 对教师党员的评价套管和固井爆破片与爆破装置仓库管理基本要求三甲医院都需要复审吗 我们要对吐温80的质量探究，以明确其用量，本试验首先建立消癌平注射液中吐温80含量的测定方法。二、试验依据：依据查阅有关文献，目前有三种方法来测定消癌平注射液中吐温80的含量，分别是用液相和比色法，其中液相测定方法包括两种子方法。三、试验设计及组织：1.本次试验选取三批消癌平注射液〔参加量的吐温80〕，利用三种方法测定注射液中吐温80的含量，测出的含量与参加量做比照，筛选出专属性强、准确度高的试验方案。2.依据1中筛选出的方法，建立消癌平注射液中吐温80含量测定的 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 方案。四、试验参与人员及职责：消癌平攻关工程组分析人员负责试验方案及报告的起草工作。消癌平攻关工程组分析负责人负责试验方案及报告的审核、检验和监视等工作。消癌平攻关工程组副组长负责试验方案及报告的审核批准。五、试验目的：筛选出专属性强，准确度高的试验方案，建立消癌平注射液中吐温80含量测定的标准方案。六、试验内容：方法一.HPLC-ELSD法测定消癌平注射液中吐温80的含量仪器设备高效液相色谱仪WatersHPLCsystem(e2695-Empower2)，AlltechELSD2023检测器，微量注射器，容量瓶，移液管，胶头滴管，电子天平试剂药品聚山梨酯80比照品(符合欧洲药典标准，Sigma-AldrichChemieGmbH，批号：13904405170P01，纯度：100%)；消癌平注射液样品，乙酸铵，乙腈〔色圣和药业SANHOME®第2页共页三种方法测定消癌平注射液中吐温80含量的试验方案谱纯〕，无水乙醇试剂〔分析纯〕，氮气，蒸馏水色谱条件:色谱柱：TSK-GELG2023SWXL柱(7.8mm×300mm，5µm)；流淌相：20mmol·L-1乙酸铵-乙腈(90∶10)，柱温：30℃，流速：0.6mL·min-1；ELSD条件：漂移管温度103℃，氮气流速2.3L·min1；进样量：10µL。在此条件下样品中的聚山梨酯80与其他组分能到达基线分别试验过程比照品溶液的制备周密称取聚山梨酯80比照品300.0mg〔加无水乙醇制成3.0mg·mL-1的比照品溶液〕置100mL棕色量瓶中，参加无水乙醇溶解并稀释至刻度，即得。供试品溶液的制备周密量取消癌平注射液1.0mL至100mL量瓶中，加无水乙醇稀释至刻度，摇匀，离心取上清液，即得。方法学考察：线性关系考察：周密量取比照品溶液0、2、4、6、8、10、12ml到25ml容量瓶中，分别移取10µL注入色谱仪，按上述色谱条件测定，以聚山梨酯80进样量的常用对数值(X，ng)为横坐标，峰面积的常用对数值(Y)为纵坐标进展线性回归，可得回归方程，其结果说明其线性关系的好坏。周密度试验：周密吸取聚山梨酯80比照品溶液5µL，按上述色谱条件，重复进样6次，测定峰面积，测定聚山梨酯80峰面积常用对数值的RSD，保存时间，推断仪器周密度。中间周密度：周密吸取聚山梨酯80比照品溶液5µL，按上述色谱条件，重复进样6次，测定峰面积，测定聚山梨酯80峰面积常用对数值的RSD，保存时间，推断仪器周密度。重复性试验：周密量取消癌平注射液1mL，共6份，按上述供试品溶液制备方法制备供试品溶液，测定峰面积并计算含量和RSD。稳定性试验：分别周密量取上述供试品溶液10µL，依上述色谱条件，于0、2、4、6、8、2、24h分别进样，测得24h内峰面积的RSD。推断供试品溶液在室温下放置24h的稳定性。加样回收率试验：周密量取未加吐温80的消癌平注射液1mL9份于10ml容量瓶中，周密参加比照品溶液3、4、5ml，用无水乙醇定容至刻度，测定峰面积并计算回收率及RSD。圣和药业SANHOME®第3页共页三种方法测定消癌平注射液中吐温80含量的试验方案1.5样品测定分别周密吸取比照品溶液10µL，供试品溶液10µL，注入液相色谱仪，测定，以外标一点法对数方程计算样品中聚山梨酯80的含量。方法二.分光光度法测定消癌平注射液中吐温80的含量仪器设备分液漏斗、旋蒸仪、试管、容量瓶、紫外分光光度器试剂药品乙酸乙酯、硫氰酸钴铵试液、三氯甲烷、消癌平注射液，生理盐水，不含吐温80的消癌平注射液，吐温80溶液3.00g/L,丙酮，蒸馏水。试验过程供试品制备：所需检测样品分为消癌平注射液，阴性比照组(生理盐水)和阳性比照组(浓度3.00g/L,吐温80溶液).取消癌平注射液20ml于60ml分液漏斗中,参加10ml乙酸乙酯萃取2次,合并萃取液,于旋蒸仪上收干,残渣加少量丙酮溶解,置于旋蒸仪上再次收干。标准曲线的绘制:周密称量比照品溶液吐温80300.00mg用蒸馏水定容于100ml容量瓶中.分别周密量取0,0.6,1.5,3.0,4.5,6ml置于试管中,蒸馏水补足至6.0ml,周密参加硫氰酸钴铵试液9.0ml,摇匀,周密参加三氯甲烷12.0ml,摇匀,放置7h,每隔30min振摇一次,吸取三氯甲烷层,以参加0ml吐温80的样品溶液为空白,在620nm的波长下测定A值.以A值为纵坐标、吐温80浓度为横坐标,绘制标准曲线。方法学考察线性关系考察：周密量取比照品溶液0、2、4、6、8、10、12ml到25ml容量瓶中，分别移取10µL注入色谱仪，按上述色谱条件测定，以聚山梨酯80进样量的常用对数值(X，ng)为横坐标，峰面积的常用对数值(Y)为纵坐标进展线性回归，可得回归方程，其结果说明其线性关系的好坏。周密度试验参加制作标准曲线的第四份吐温80溶液,连续测定6次,计算其RSD.中间周密度参加制作标准曲线的第四份吐温80溶液，连续测定6次,计算其RSD.稳定性试验:周密量取消癌平注射液1.2ml,置于试管中,加蒸馏水补足至6.0ml,周密参加硫氰酸钴铵试液9.0ml,摇匀,周密参加三氯甲烷12.0ml,摇匀,每隔15min振摇一次,每1h测定一次A值,测定7h.重复性试验:周密量取消癌平注射液1.2ml,置于试管中,加蒸馏水补足至6.0ml,周密参加硫氰酸钴铵试液9.0ml,摇匀,周密参加三氯甲烷12.0ml,摇匀,每隔30圣和药业SANHOME®第4页共页三种方法测定消癌平注射液中吐温80含量的试验方案min振摇一次,放置7h,测定A值,计算其RSD.加样回收率试验:周密量取不含吐温80消癌平注射液样品6份,每份0.6ml,置于试管中,参加吐温80纯品溶液(3.00g/L)5.4ml,周密参加硫氰酸钴铵试液9.0ml,摇匀,周密参加三氯甲烷12.0ml,摇匀,每隔30min振摇1次,放置7h,测定A值,按公式计算回收率,回收率=测得的总值/参加比照品的量×100%。样品测定消癌平注射液在一样试验条件下重复测定3次,结果用X±s 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 示.方法三.HPLC-ELSD法测定消癌平注射液中吐温80的含量仪器设备高效液相色谱仪Agilent1200系列，AlltechELSD2023检测器，微量注射器，棕色量瓶，移液管，胶头滴管，电子天平试剂药品聚山梨酯80比照品(符合欧洲药典标准，Sigma-AldrichChemieGmbH，批号：13904405170P01，纯度：100%)；消癌平注射液样品，乙腈〔色谱纯〕，无水乙醇试剂〔分析纯〕，氮气，乙酸铵，蒸馏水色谱条件:色谱柱：TSK-GELG2023SWXL柱(7.8mm×300mm，5µm)；流淌相：5mmol·L—1乙酸铵-乙腈(90∶10)，柱温：30℃，流速：0.6mL·min−1；ELSD条件：漂移管温度110℃，氮气流速2.3L·min−1；进样量：10µL。在此条件下样品中的聚山梨酯80与其他组分能到达基线分别试验过程试验工作曲线绘制和最低检测限周密取吐温80比照品0.5000g，置于50ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，得10.000mg·mL-1的溶液，作为储藏液。分别周密量取上述储藏液1，2，3，4，5，6ml，置10ml量瓶中，分别加流淌相稀释至刻度。取上述溶液10µL，注入液相色谱仪，记录峰面积。以吐温80浓度X为横坐标，峰面积Y为纵坐标进展线性回归。将比照品逐级稀释，以信噪比S/N=3，测定本品的最低检测限。方法学考察线性关系考察：周密量取比照品溶液0、2、4、6、8、10、12ml到25ml容量瓶中，分别移取10µL注入色谱仪，按上述色谱条件测定，以聚山梨酯80进样量的常用对数值(X，ng)为横坐标，峰面积的常用对数值(Y)为纵坐标进展线性回归，可得回归方程，其结果说明其线性关系的好坏。周密度试验取标准曲线项下3.0000mg/ml浓度样品，连续进样6次，考察圣和药业SANHOME®第5页共页三种方法测定消癌平注射液中吐温80含量的试验方案进样周密度。中间周密度取标准曲线项下3.0000mg/ml浓度样品，连续进样6次，考察进样周密度。重复性试验取本品〔批号：202309181〕6份，作为供试品溶液。取10μl注入液相色谱仪，照高效液相色谱法〔中国药典2023版二部附录VD〕测定峰面积。另取吐温80比照品适量，同法测定，计算出供试品的含量。溶液稳定性试验取本品〔批号：202309181〕，分别于0、2、4、8、12小时进样，按含量测定项下方法测定，记录峰面积，计算RSD。回收率试验周密称取吐温80比照品75.5mg置于25ml量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，做为比照品溶液，另周密量取消癌平注射液5ml〔批号：202309181〕三份，分别参加吐温80比照品溶液〔3.0mg/mL〕4，5，6ml，依据含量测定项下的方法测定，计算平均加样回收率。含量测定取供试品溶液10μl注入高效液相色谱仪，照液相色谱法〔中国药典2023版二部附录VD〕测定；另取吐温80比照品适量，加水配制成1ml含3mg的溶液，同法测定，计算供试品的含量。七、试验结果表一三种方法测定吐温80含量的结果比较批次1方法一231方法二231方法三23测定量量回收率〔%〕表二方法学考察的试验结果比较批次线性周密度重复性稳定性加样回收率%方法一〔RSD〕123方法二〔RSD〕123方法三(RSD)123圣和药业SANHOME®第6页共页三种方法测定消癌平注射液中吐温80含量的试验方案圣和药业SANHOME®第7页共页