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PMSF配置(3)PMSF配制方法 2012-09-1410:57:36| 分类：实验室速查“手册| 标签：|字号大中小订阅PMSF是一种蛋白酶抑制剂,因为其在水溶液中不稳定，所以用异丙醇或无水乙醇溶解，一般在用之前现加入裂解液。因此他是裂解液中的一种成分，而不是裂解液PMSF　即Phenylmethanesulfonylfluoride，中文名为苯甲基磺酰氟。分子式为C7H7FO2S，分子量为174.19，纯度>99%。1）抑制丝氨酸蛋白酶（如胰蛋白酶，胰凝乳蛋白酶，凝血酶）和巯基蛋白酶（如木瓜蛋白酶）；2）10mg/mL溶于异...

PMSF配制方法 2012-09-1410:57:36| 分类：实验室速查“手册| 标签：|字号大中小订阅PMSF是一种蛋白酶抑制剂,因为其在水溶液中不稳定，所以用异丙醇或无水乙醇溶解，一般在用之前现加入裂解液。因此他是裂解液中的一种成分，而不是裂解液PMSF　即Phenylmethanesulfonylfluoride，中文名为苯甲基磺酰氟。分子式为C7H7FO2S，分子量为174.19，纯度>99%。1）抑制丝氨酸蛋白酶（如胰蛋白酶，胰凝乳蛋白酶，凝血酶）和巯基蛋白酶（如木瓜蛋白酶）；2）10mg/mL溶于异丙醇（或无水乙醇）中；3）在室温可保存一年；4）工作浓度：17~174ug/mL（0.1~1mM）；5）在水液体溶液中不稳定，必须在每一步分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF（见水分解，使用前加入）。一般配成100mM的母液/储存液，工作浓度为0.1~1mM（17~174ug/mL），所用的异丙醇或无水乙醇用普通的分析纯即可。例：配制100mMPMSF称量0.174g（174mg）PMSF（针状结晶固体）溶于10mL异丙醇或者无水乙醇，震荡混匀，保存在-20度或４度。工作浓度如果用1mM，按1：100(V/V)加入即可。样品处理超过1h，补加一次。caution：PMSF剧毒，为了安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。PMSF严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤，吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。一旦眼睛或皮肤接触了PMSF，应立即用大量水冲洗。PMSF在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快，且25℃的失活速率高于4℃。pH值为8.0时，20μmmol/lPMSF水溶液的半寿期大约为85min，这表明将PMSF溶液调节为碱性（pH>8.6）并在室温放置数小时后，可安全地予以丢弃。

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