固态法生产益生素中二级液体菌种培养基配方筛选_cropped

固态法生产益生素中二级液体菌种培养基配方筛选_cropped 摘 要 利用正交试验 ,对固体法生产益生素中菌株 N YS22 的二级液体菌种的培养基配方进行筛选 ,确定了一组 最佳组合 :蛋白胨 1 . 0 % ,葡萄糖 1 . 0 % ,酵母膏 0 . 5 % ,牛肉膏 1 . 0 % , KHPO0 . 06 % , NaCl 0 . 3 % ,p H 7 . 2, 2 4 7 . 4 。5 () 关键词 菌株 N YS22 ;二级液体菌种 ;最佳培养基配方 ;L4正交 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 16 () 文章编号 1005 - 7021 200204 - 0062 - 02 中图分类号 Q939 . 96 文献标识码 A 益生素是一种微生态制剂 ,是近年来新兴起的 10 mL 至带玻璃珠及 90 mL 无菌水的三角 培养液 一种饲料添加剂 。该产品是 通 过 菌 种 发 酵 产 生 的 瓶中 ,置转速为 200 r/ min 的摇床振荡 30 min ,然后 - 6 - 7 - 8 - 9 酶 、维生素 、氨基酸及生长因子和活菌来调整动物肠 稀释至 10 , 10 , 10 , 10 四个浓度 , 各吸取 1 道内微生物菌群平衡 ,进而增强动物的免疫功能 ,促 mL 加到直径 9 cm 的平板上 ,再倒入 20 mL 融化后 进动物的生长发育 ,提高饲料转化率 。产品主要用 冷却至 50 ?的固体培养基 , 平摇均匀 , 待培养基凝 于饲料行业替代抗菌素 ,并在畜禽类腹泻病的防治 固后 ,倒置于 32 ?恒温箱中培养 20 h ,计数 。 上具有较明显效果 。过去的几十年 ,曾用抗菌素作 1 . 2 . 2 OD 值的测定 利用 722 型分光光度计测 为饲料添加剂 ,但是 ,随着抗菌素的广泛应用 ,副作 OD 值 ,测定时二级种子培养液需进行稀释 。 用越来越明显 ,抗药菌株的出现 ,同时畜产品中药物 1 . 2 . 3 p H 测定 p H 试纸法 。 的残留给人们的食品造成污染 。因此 ,我们对益生 1 . 2 . 4 生产工艺 流程图 破产流程图 免费下载数据库流程图下载数据库流程图下载研究框架流程图下载流程图下载word 素这种新型绿色饲料添加剂的研制开发是必要的 。 试管斜面 ?一级液体菌种 ?二级液体菌种 ?本试验是以固态法培养生产益生素为前提 ,对二级 液体菌种的培养基配方进 行 正 交 试 验 , 优 化 配 方 。 原料 ?拌料 ?灭菌 ?冷却 ?接种 ?培养 ? 成未优化前的培养基配方为 : 蛋白胨 0 . 5 % , 葡萄糖 ) ( 0 . 4 % , N HSO0 . 02 % , 牛 肉 膏 1 . 0 % , 品 ?包装 ?粉碎 ?低温烘干 4 2 4 KHPO0 . 03 % ,NaCl 0 . 3 % ,p H 7 . 2,7 . 4 。由此 1 . 2 . 5 一级液体菌种的制备 将新转接的斜面菌 2 4 种挑取 1 环 ,接入一级种子瓶 , 37 ?摇床培养14 h , 配方得到的培养液菌数为 10 亿/ mL 。通过本次正 摇床转速 160 r/ min 。 交试验 ,欲筛选出一组最佳配方 ,使菌体在该培养基 1 . 2 . 6 二级液体菌种的制备 将培养好的一级液 中的生长状态有所改善 ,并提高活菌数 ,缩短生长周 体菌种进行镜检 ,确定无杂菌后 ,按 5 %接菌量转接 期 ,降低生产成本 ,提高经济效益和社会效益 。 入二级 种 子 瓶 中 , 37 ?摇 床 培 养 14 h , 摇 床 转 速 1 材料与 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 160 r/ min 。二级液体菌种的培养基配方见表 1 。1 . 1 材料 1 . 2 . 7 二级液体菌种的检测指标 测定培养好的 二级液体菌种的活菌数 、OD 值 、p H , 并通过显微镜 1 . 1 . 1 菌株 供试菌株为本研究室筛选的适合大 观察菌体状态 。生产用的菌株 ,编号为 N YS22 。 ( 1 . 1 . 2 培养基 ?一级液体菌种培养基 质量分2 结果与讨论 ) , %:蛋白胨 0 . 5 ,葡萄糖 0 . 4 ,牛肉膏 0 . 4 , NaCl 数 2 . 1 培养基配方筛选的实验 方案 气瓶 现场处置方案 .pdf气瓶 现场处置方案 .doc见习基地管理方案.doc关于群访事件的化解方案建筑工地扬尘治理专项方案下载 及结果 ( ) 0 . 3 , N HSO0 . 02 , MgSO0 . 02 , KHPO0 . 03 , 4 2 4 4 2 4 对 N YS22 的二级液体菌种的培养基配方筛选 ( p H 7 . 2,7 . 4 ; ?固体培养基 用于混合平板培养计 采用 5 因 素 、4 水 平 的 正 交 试 验 方 法 , 即 采 用 L ) 数用 ,质量分数 , %: 蛋白胨 0 . 6 ,葡萄糖 0 . 3 ,牛肉 16 5 ) () ( 膏 0 . 5 , NaCl 0 . 3 , N HSO0 . 02 , MgSO0 . 02 , 4正交表 。实验方案及结果见表 1 。4 2 4 4 KHPO0 . 03 ,琼脂粉 0 . 8 ,p H 7 . 2,7 . 4 。 从表 1 看出 ,第 9 号试验中活菌数最高 ,它的试 2 4 验条件是 ABCDE;同时 ,可看出 OD 值随菌数增 31 34 2 1 . 2 方法 加而上升 ;又由显微镜观察得出 ,培养基中牛肉膏的 1 . 2 . 1 活菌计数 利用混合平板计数法 ,吸取待测 收稿日期 :2002 - 01 - 31 实验指标 A B C D 实验组 E KHPO/ % 蛋白胨/ % 葡萄糖/ % 酵母膏/ % 牛肉膏/ % 活菌数 OD 值 镜检结果 2 4p H ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) 12345亿/ mL 1 0 . 2 0 . 5 0 0 0 1 . 5 0 . 230 8 . 0 菌体分散 2 0 . 2 1 . 0 0 . 2 0 . 2 0 . 02 12 . 5 0 . 725 8 . 0 菌体分散 3 0 . 2 1 . 5 0 . 5 0 . 5 0 . 06 14 . 8 0 . 760 8 . 0 菌体稍有聚集 4 0 . 2 2 . 0 1 . 0 1 . 0 0 . 1 7 . 7 0 . 580 7 . 8 菌体聚集 5 0 . 5 0 . 5 0 . 2 0 . 5 0 . 1 9 . 3 0 . 614 8 . 0 菌体稍有聚集6 0 . 5 1 . 0 0 1 . 0 0 . 06 18 . 3 0 . 790 8 . 0 菌体聚集 7 0 . 5 1 . 5 1 . 0 0 0 . 02 12 . 9 0 . 730 8 . 0 菌体很少聚集8 0 . 5 2 . 0 0 . 5 0 . 2 0 8 . 8 0 . 604 7 . 8 菌体聚集9 1 . 0 0 . 5 0 . 5 1 . 0 0 . 02 19 . 6 0 . 807 8 . 0 菌体聚集10 1 . 0 1 . 0 1 . 0 0 . 5 0 13 . 4 0 . 744 8 . 0 菌体聚集11 1 . 0 1 . 5 0 0 . 2 0 . 1 9 . 9 0 . 638 7 . 8 菌体稍有聚集12 1 . 0 2 . 0 0 . 2 0 0 . 06 13 . 5 0 . 752 7 . 8 菌体分散13 1 . 5 0 . 5 1 . 0 0 . 2 0 . 06 18 . 7 0 . 797 8 . 2 菌体稍有聚集14 1 . 5 1 . 0 0 . 5 0 0 . 1 15 . 4 0 . 781 7 . 8 菌体分散15 1 . 5 1 . 5 0 . 2 1 . 0 0 7 . 8 0 . 601 7 . 8 菌体聚集 16 1 . 5 2 . 0 0 0 . 5 0 . 02 9 . 5 0 . 632 7 . 8 菌体稍有聚集 注 :各培养基配方中 NaCl 浓度为 0 . 3 % ,p H 7 . 2,7 . 4 2 . 2 培养基配方筛选的正交试验结果分析验的结果进行分析 。现以活菌数为主要试验指标来 () 为了筛选一组最好的培养基配方 ,需对正交试做结果分析 见表 2。 正交试验结果分析表 表 2 E. KHPO 因素 A. 蛋白胨 B. 葡萄糖 C. 酵母膏 D. 牛肉膏 2 4K1 36 . 50 49 . 10 39 . 20 43 . 30 31 . 50 K2 49 . 30 59 . 60 43 . 10 49 . 90 54 . 50 K3 56 . 40 45 . 40 58 . 60 47 . 00 65 . 30 51 . 40 39 . 50 52 . 70 53 . 40 42 . 30 K4 k9 . 13 12 . 28 9 . 80 10 . 83 7 . 88 1 k12 . 33 14 . 90 10 . 78 12 . 48 13 . 63 2 k14 . 10 11 . 35 14 . 65 11 . 75 16 . 33 3 k 12 . 85 9 . 90 13 . 18 13 . 35 10 . 58 4 R 4 . 97 5 . 00 4 . 85 2 . 52 8 . 45 ( 从表 2 中的 R 值可看出 ,在该正交试验的 5 个 ABCDE也可能是较 好 的 配 方 组 合 见 表 3 第 32 34 3 因素中 , E 为主要因素 ,D 为次要因素 ,从主到次依 ) 17 ,18 实验组,可通过进一步的验证试验来确定最 次 排 列 为 : E , B , A , C , D 。因 此 , 除 配 方 组 合 佳的二级液体菌种培养基的配方 。 ABCDE外 , 由正交分析可得出 ABCDE和 () 31 34 2 32 32 3 2 . 3 验证试验的 设计 领导形象设计圆作业设计ao工艺污水处理厂设计附属工程施工组织设计清扫机器人结构设计 方案及结果 见表 3 表 3 培养基配方筛选的验证试验方案及结果 实验指标 实验组 A B C D E KHPO/ % p H 蛋白胨/ % 葡萄糖/ % 酵母膏/ % 牛肉膏/ % 活菌数 OD 值 镜检结果 2 4 ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) ( ) 12345/ 亿/ mL 9 1 . 0 0 . 5 0 . 5 1 . 0 0 . 02 19 . 2 0 . 805 8 . 0 菌体聚集 17 1 . 0 1 . 0 0 . 5 0 . 2 0 . 06 21 . 5 0 . 813 8 . 0 菌体稍有聚集 18 1 . 0 1 . 0 0 . 5 1 . 0 0 . 06 22 . 1 0 . 826 8 . 0 菌体聚集 注 :各培养基配方中 NaCl 浓度为 0 . 3 % ,p H 7 . 2,7 . 4 从表 3 看出 ,试验组 18 所培养的活菌数最高 , ,筛 通过对培养基配方的正交试验及验证试验 为 22 . 1 亿/ mL ,即 ABCDE是最佳的二级液体 选出一组最佳配方组合 ,适用于菌株 N YS22 的二级 32 34 3 菌种培养基配方组合 。 液体 菌 种 培 养 , 配 方 为 : 蛋 白 胨 1 . 0 % , 葡 萄 糖 1 . 0 % , 酵 母 膏 0 . 5 % , 牛 肉 膏 1 . 0 % , KHPO 2 4结 论 3 0 . 06 % ,NaCl 0 . 3 % ,p H 7 . 2,7 . 4 。 参 考文献 陈天寿. 微生物培养基的制造与应用 M . 北京 : 中国农业出版1 1993 ,61,71 . 3 社 ,1995 ,250,299 .中国科学院数学研究所数理统计组. 正交试验法 M . 北京 : 人 2 宋大新. 微生物学实验技术教程 M . 上海 : 复旦大学出版社 , 民教育出版社 ,1976 ,6,24 .