长江江豚某些血清生殖激素的初步研究

长江江豚某些血清生殖激素的初步研究 () 兽类学报 1997, 17 1: 43—47 A c ta T h e r io log ica S in ica ? 长江江豚某些血清生殖激素的初步研究 陈道权赵庆中 刘仁俊 ( ) 中国科学院水生生物研究所, 武汉, 430072 摘要 ()某些血清生殖激素的研 本文首次报道了3, 4月份长江江豚N eop h ocaena p h ocaenoid es 究结果。性成熟雄性江豚血清睾酮浓度在2164 ƒ和9140 ƒ之间波动。雌性未成熟个 ngm l ngm l 体不能测出血清雌二醇, 性成熟个体均能测出血清雌二醇, 妊娠个体血清孕酮浓度可达30159 ƒ以上。ngm l 关键词 江豚; 血清生殖激素; 睾酮; 孕酮和雌二醇 ( 过去一些学者对江豚生殖和生殖器官进行过许多研究 张先锋, 1992;等, C h en )1982; , 1979; , 1926; , 1971。自应用放射免疫法测定血清生殖激 K a su yaP in gH a r r iso n ()() 素以来, 许多鲸类学家通过血清睾酮 , 、 雌二醇 , 2、 孕T e sto ste ro n eT E st rad io lE )(() 酮 , 和黄体生成素 , 浓度的变化研究了动 P P ro ge ste ro n eL u te in izin g H o rm o n eL H ( 1971; 物的性周期 王克雄,1995; 陈德勤, 1991; 陈道权等, 1994;H a r r iso n , Co rn e ll 等, 1987; 等, 等, 1975; 2等, 1983; 等, 1984; K irb y Saw ye rsteffan Sch ro ede r R ich k in d ) 1989; 等,1986; 等, 1984, 为准确诊断雌性动物的妊娠过程提供了可Yo sh io k a W e lls 靠依据。到目前为止未见有长江江豚血清激素研究的报道。本文主要是通过自然生态下长江江豚某些生殖激素浓度的测定, 了解春季长江江豚血清生殖激素的分泌状况来探讨江 豚的生殖规律, 为长江白暨豚和江豚的保护生物学研究提供依据。 材料与方法 ( 1. 实验材料 血样采自我所1990, 1993年分别从长江捕获的4批共12头江豚 见表) 1, 其中6头运回中科院水生所饲养, 除当天采血样外, 还在死亡之前的饲养过程中采集 血样。 () () 2. 采血样方法采血样参照 和陈道权等 1985白暨豚血液有形 1968R idgw ay 成分测定的方法 。 (3. 血浆和血清的制备 从江豚尾静脉取血, 注入含有肝素钠抗凝剂015 1% 肝 m l ) ) (() 素钠 于10 3 000转用玻璃吸ƒ15 , 血液的离心管中, 充分摇匀, 离心m lm in m in 管吸取上层血浆, 分装于小塑料管内, 编号, 放入液氮内或者 - 20? 冰箱内保存。血清 ? 国家自然科学基金资助项目 “白暨豚的物种保存和增殖研究”的部分工作本实验采血样得到白暨豚研究室全体同志支持, 在完成 论文 政研论文下载论文大学下载论文大学下载关于长拳的论文浙大论文封面下载 的过程中得到王丁博士和王克雄同志帮助; 湖北医科 大学第一附属医院同位素室主任邹性初教授和蔡韵琴医师对本工作给予指导和帮助, 一并致谢 本文于1995年8月30日收到, 1996年5月27日收到修改稿 制备与血浆制备略有不同, 取出血液样品后立即注入无肝素钠抗凝剂的离心管中, 离心 (() ) 转静止一段时间, 弃去纤维蛋白, 再离心3 000转3 000ƒ15 , ƒ15 , m in m in m in m in 取上层血清, 贮存方法同上。血清或血浆样品被测定之前, 室温化冰。表 1 实验江豚的背景资料 1 T ab le B a sic m a te r ia ls o f N eop h ocaena p h ocaenoid es fo r exp e r im en t s 动物代号和性别体长体重 标本号放养水域备注Bo dy leng th Bo dy w h e igh t Co ded an im a l . N oSp ec im en P u t in w a te r a rea R em a rk ()() and sex cm k g 长江天鹅洲白暨豚自然保护区 性成熟22203201 16010 90T ian ezho u B a iji na tu re re se rve M 1 M a tu re in th e Yang tze R ive r 90203202 10 同上同上154Id. M 2 Id. 白暨豚馆同上 90204201 14710 . 310 46M IdA qua r ium o f B a iji do lp h in in W uh an 同上 . 493203201 15210 5710 同上IdM Id. 同上 同上 . Id5. 93203202 15510 5410 M Id 同上 同上 .Id . Id93203203 14210 4110 6M 同上 性未成熟.Id 90204202 12910 3315 1F Imm a tu re 同上 .Id 93203205 13110 3615 2同上 Id.F 长江天鹅洲白暨豚自然保护区 性成熟203203 15110 9022T ian ezho u B a iji na tu re re se rve F 3 M a tu re in th e Yang tze R ive r 妊娠 同上 .Id 90204203 10 145F 4 P regnancy 5 90204204 14610 F 同上同上Id. Id. 长江同上 90204205 14710 6.F Id Yang tze R ive r 4. 测定方法和仪器江豚血清和血浆生殖激素睾酮、雌二醇、孕酮、黄体生成素、卵 ()()泡刺激素, 、泌乳素 , 和绒毛膜Fo llicu la r S t im u la t in g H o rm o n eF SH P ro lac t in PRL () 促性腺激素 , 测定的试剂和方法, 按照中国天津利科生物 C ho r io n ic Go n ado t rop in C G 技术与医学用品有限公司提供的放射免疫测定血清生殖激素含量的药盒和常规方法进行 的。血清激素含量用西安262厂制造的 2603型放射免疫测定仪测定。F T 结果 表2列出了1990年和1993年3, 4月份长江江豚某些血清生殖激素的平均值和波动范 (围。结果表明, 雌雄性江豚体内存在有 、、、、、和 雄性豚为绒 2TE PPRL L HF SH C G ) 毛膜促性腺激素类似物 激素, 两性之间和同性, C ho r io n ic Go n ado t rop in S im ila r ityC GS 不同生理状态下各类激素含量明显不同。雄性成熟江豚血清睾酮含量在2164, 9140 ƒn g 之间波动, 其平均含量为5176 。由此可见, 3, 4月份性成熟雄性江豚的性腺都处 ƒm l n g m l 于活动状态。 性成熟雄性江豚不同健康状况下血清睾酮激素含量明显不同。刚从长江捕 起的健康 江豚和血清睾酮激素含量分别为5111 ƒ和6195 ƒ。在人工饲养条件下,46M M n g m l n g m l () 豚体皮肤被水霉菌 球菌严重感染, 体重极度下降, 行为活动异常, 在死亡前一周内 采血样分析, 江豚和血清睾酮含量分别降为01094 和01434 。可见江46ƒƒM M n gm l n g m l 豚的健康状况可以直接影响睾丸分泌睾酮的活动, 进而影响其生殖功能。 表2 3, 4月份长江江豚血清生殖激素平均含量 2 T ab le A ve rage leve ls o f se rum rep ro duc t ive ho rm o ne o f N eop h ocaena p h ocaenoid es in Yang tze R ive r du r ing M a rch and A p r il, 1990 and 1993 成熟未成熟未妊娠妊娠 激素名称M a tu r ity Imm a tu r ity N o n p regnancy P regnancy H o rm o ne nam e ( )( )( )( )6? 2? 1? 3? 睾丸酮176 10070 11917 50011145 0T e sto ste ro ne ( ( ( )))2164, 9140 0, 01014 011312, 012339 () ngm l雌二ƒ 醇 8143 ( )0 E st rad io l 170 0, 8105 1136 3( )0133, 24133 ()p gƒm l 孕酮 0179 115 0p ro ge ste ro ne ( )0106 106 30159, 41119 36( ( ))0141, 1128 0105, 0125 ()ngƒm l 黄体生成素 3117 180 144 34L u te in izing ho rm o ne 183 5( ( ( )))0108, 81440 011, 6150 3133, 6155 ()m IU ƒm l 卵泡刺激素 0124 182 196 01Fo llic le st im u la t ing ho rm o ne 160 0(( ( ( ))))m IU ƒm l 0, 0165 0, 1164 1116, 2157 泌乳素 () ƒP ro lac t in ngm l绒毛膜促性1120 1245 166 01116 3( ( ( )))0, 2146 0, 0149 0163, 2132 腺激素和绒毛膜促 性腺激素类似物C h r io n ic go nado t rop in and C h r io r ic go nado t rop in sim ila r ity 3106 193 7190 418 4( ( ))0, 712 512, 1012 () ƒ m IU m l 雌性江豚 、和 血清孕酮激素的含量分别为36140 、 41119 和 45 6 ƒƒF F F n g m ln g m l 30159 ƒ其他江豚血清孕酮均低于110 ƒ前者为妊娠个体, 后者为非妊娠个体。 , , n g m ln gm l 性未成熟江豚 和 与性成熟未妊娠江豚 血清孕酮激素含量比较, 略有不同。123F F F 雌性江豚雌二醇激素含量变化大, 性成熟个体和妊娠个体血清雌二醇激素含量均较未成熟个体高。雌性未成熟个体血清雌二醇激素含量很低, 以致于仪器检测不出来。解剖 结果证实这些江豚为未成熟个体。 讨论 () 根据张先锋等 1992报道, 雄性江豚性成熟体长为140 , 本文研究的雄性江豚 cm () 体长为142, 160 , 均为性成熟个体。发现人工饲养下的雄性宽吻海 1989cm Sch ro ede r () 豚 血清睾酮的水平存在季节性变化, 血清睾酮浓度与其精子浓度T u rs iop s t ru n ca tu s 不同步, 血清睾酮含量高时, 精子数量少, 质量亦差。一般情况下, 江豚血清睾酮含量3月份较4月份略高。按照 的观点推断江豚3月份精子的数量和质量可能较4月份 Sch ro ede r 差。江豚血清睾酮与精子数量和质量之间的关系是否象宽吻海豚一样, 还是与宽吻海豚不 () () 一样, 有待研究。也认为长吻原海豚 血清睾酮浓度 1984W e lls S ten e l la lon g iros t ris与其交配行为没有明显的联系。人工饲养下白暨豚“淇淇”血清睾酮含量与其性行为活动 (() ) 有一定联系 陈道权等,1994。根据 等 1982研究, 自然条件下江豚妊娠期一般C h en 为1015个月。根据我们从长江移养到石首天鹅洲白暨豚自然保护区的3头妊娠江豚分别于 4月底、5月初和5月底产仔事实来反推, 江豚的交配期在6, 8月份。因此3, 4月份江豚血 清睾酮分泌高峰期也许不是其交配受孕期。 () 据报道,雌性江豚性成熟体长133 cm张先锋, 1992, 我们研究的2头雌性江豚未 达性成熟体长, 未能测出血清雌二醇, 血清孕酮含量亦很少, 解剖结果证实卵巢很小, 既 () 无黄体又无白体。一头性成熟江豚能测出雌二醇 1136 ƒ但是孕酮含量比未成熟个 , p gm l 体还低, 可能采血样时这头江豚正处于排卵周期的起始阶段或结束阶段, 卵泡发育处于 初级滤泡期, 而那头未成熟个体此时可能处于次级滤泡期。由于资料有限, 不能做出准确 () () 结论, 需进一步研究。陈德勤 1991和 分别报道了宽吻海豚血清孕酮含 1987Co rn e ll 量低于110 ƒ为未受孕个体, 孕酮含量高于310 ƒ时, 并能维持4, 6周以上示为 n gm l n gm l () 怀孕个体的研究结果。根据雌性宽吻海豚妊娠期间血清孕酮含量的变化,1975R ich k in d 把宽吻海豚的妊娠期分为早期、中期、晚期三个阶段,其孕酮激素含量分别为10140 ƒn g 、15160 和4116 。本文收到三头妊娠个体的孕酮含量最高达30159, 41119 ƒƒm ln g m l n g m l ƒ与宽吻海豚妊娠晚期的孕酮含量基本一致, 从而可以认为判断宽吻海豚妊娠的标 , n g m l 准也适宜于长江江豚。据此, 我们可以根据血清雌二醇和孕酮含量的多少来判别江豚的成 熟个体和怀孕个体, 但其成熟个体和怀孕个体血清雌二醇和孕酮含量的确切 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 , 还有 待研究。 我们的研究结果表明, 雄性江豚血清睾酮含量的变化除了与固有生理季节有关外, 也 与健康状况有密切联系。 雌雄性江豚血清中均可测出上述7种生殖激素, 但它们随江豚各发育阶段不同, 其浓 度变化的规律还有待进一步积累资料和深入研究。 参 考 文 献 王克雄.日本国水族馆海豚的饲养与繁殖技术. 海洋湖沼通报, 2: 70, 77.1995. ( ) 陈道权, 官之梅. 1985. 白暨豚血液有形成分测定. 动物学杂志, 20 6: 8, 11. 陈德勤. 1991. 海洋哺乳类饲养管理与疾病之诊断及治疗. 八十年野生动物疾病诊疗研讨会, 24, 29. 陈道权, 赵庆中, 刘仁俊. 1994. 人工饲养条件下白暨豚雌雄个体某些血清生殖激素初步研究. 水生生物学报, 18 ( ) 3: 292, 295.( ) 张先锋. 1992. 江豚的年龄鉴定、生长和生殖的研究. 水生生物学报, 16 4: 289, 297. , , . 1982. C h en P e ixun L iu R en junH a r r iso n R JR ep ro duc t io n and rep ro duc t ive o rgan s in N eop h ocaena p h ocaenoid es ( ) , 9 1: 9, 16.. f rom th e Yang tze R ive rA qu a tc m am m a ls 1987. : 2P ro g re ss repo r tR e su lt s o f a lo ng Co rne ll L H , A sp e r E D , A n t r im J E , Sea r le s S S, Yang W G, Go ff T. range cap t ive b reed ing p ro g ram fo r th e bo t t leno se do lp h in, T u rsiop s tru nca tu s and T u rsiop s tru nca tu s g il l i. Z ool , 6: B iology 41, 53. 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