【doc】 在哈尔滨地区使用液体菌种栽培红平菇技术初探

【doc】 在哈尔滨地区使用液体菌种栽培红平菇技术初探 在哈尔滨地区使用液体菌种栽培红平菇技 术初探 菌物研究2005,3(1):22—26 JournalofFungalResearchVo1.3,No.1,2005ISSN1672—3538 在哈尔滨地区使用液体菌种栽培红平菇技术初探 池玉杰厂,刘智会,何建国2 1.东北林业大学林学院,黑龙江哈尔滨150040 2.东北林业大学材料科学与工程学院,黑龙江哈尔滨150040 摘要:从福建三明真菌研究所(福建省三明市3750(30)购入红平菇优良菌株,在哈尔滨地区对其进行了用液 体菌种代替固体原料的栽培技术研究.包括一级种培养基的筛选,液体菌种培养基的筛选,栽培种制作与培 养以及出菇管理技术.结果表明:对于一级种,红平菇在PDA和马铃薯半组合培养基上都生长良好,茵丝洁 白,粗壮,浓密,7,8d长满斜面;红平菇在玉米粉一葡萄糖一蛋白胨和麦麸一葡萄糖一蛋白胨液体培养基上生长较 好,7d时菌丝长满培养液,茵丝量较多;用与平菇相似的常规方法制作栽培种,养茵处理与出菇管理,红平菇 的产量达100%,150%.由于采用了液体菌种的栽培模式,从制种到采收的整个过程共需要50,60d,比二 级种为固体菌种的常规方法缩短26,31d,大大地缩短了生产周期, 提高了经济效益. 关键词:红平菇;二级液体菌种;栽培技术;哈尔滨 中图分类号:$646.19文献标识码:A文章编 号:1672.3538(2oo5)01—0022—05 红平菇(Pleurotusdjamor)是色泽鲜艳(水红 色)的食用菌,是热带和亚热带地区的一种木腐 菌,夏秋季节生于阔叶树的枯干上,也能生长在棕 榈,橡胶树和竹子上….目前红平菇在国内的研 究开发还不多,仅在河北,浙江,湖南,广西等地进 行了人工栽培试验.迄今为止在黑龙江及东北地 区,红平菇尚未被栽培利用. 红平菇,味道鲜,有蟹味,风味特别,因此也叫 蟹味菇.老时纤维化改用油炸是很好的纤维性食 品.这种美味可食的珍稀食用菌和平菇一样,适 应性很广,能在粗放的环境条件下种植,产量与生 物学效率高,栽培方式和平菇非常相似,而东 北地区栽培红平菇的原料来源广,大力发展红平 菇产业化研究具有光明的前景和生产应用意义, 因此在东北地区红平菇栽培技术也亟待认真研究 并应充分开发推广应用,以进一步实现对红平菇 进行集约化的生产和经营,使这一优良品种成为 食用菌升级换代的后继品种. 由于液体菌种生长周期短,接入栽培袋后栽 培袋发菌迅速,研究液体菌种的栽培技术具有重 要的生产应用意义,经济效益显着,赖万年曾进 行过红平菇深层发酵培养的研究,但红平菇液体 菌种栽培技术的研究还未见报道,本文进行了红 平菇在哈尔滨地区用液体菌种代替固体原种的栽 培技术研究. 1试验材料与方法 1,1菌种来源 本项试验所用红平菇菌种从福建三明真菌研 究所购入,菌株3H1. 1,2一级培养基的筛选 选择PDA培养基和马铃薯半组合培养基培 养母种,从中筛选出最适于红平菇一级种的培养 基.PDA培养基配方:马铃薯(去皮,洗净)200g, 琼脂20g,葡萄糖20g,水1000mL,pH自然;马铃 薯半组合培养基配方:马铃薯(去皮,洗净)200g, ? 基金项目:黑龙江省博士后落户科研启动资金资助项目(2oo4—2oo6) 作者简介:池玉杰(1964.),女,博士后,教授,主要从事林木病理学和菌 物学的教学与科研工作. 收稿日期:2004-08—30 ?通讯作者:池玉杰,E—mail:chiyujie@yahoo,c0fn. 第3卷第l期池玉杰等:在哈尔滨地区使用液体菌种栽培红平菇技术 初探 琼脂20g,葡萄糖20g,蛋白胨5g,磷酸二氢钾 1g,水1000mL,pH自然. 1.3二级液体菌种培养基的筛选 因为液体菌种生长速度快,在短期内能获得 大量的菌体;并且用液体菌种代替固体原种接种 栽培袋,栽培袋内的茵丝体生长速度也比用固体 原种接种栽培袋内的菌丝体生长速度快,养菌的 时间也会缩短.因此用液体菌种作为二级菌种就 会使整个栽培过程的生产周期大大地缩短,能显 着地提高经济效益,所以本项试验二级种采用了 液体菌种代替固体原种来研究红平菇在哈尔滨地 区的栽培技术.选用了材料来源广,价格低廉,容 易配制的5种常用液体培养基配方,并对这5种 液体培养基进行了筛选,每天观察和记录菌丝生 长的情况,从而筛选出红平菇菌丝生长速度最快, 成本最低的液体培养基.将同质等量的一级斜面 菌种接入到含有液体培养基的三角瓶内,每 100mL的三角瓶含有60mL的培养液,为了在相 对短期内能获得较多的菌体,每瓶内接种数量较 多的小菌块0.3cm的菌块8块,置于25?, 120r/min的摇床上培养,培养7d. 配方1(玉米粉一葡萄糖一蛋白胨培养基):玉米 粉5%,葡萄糖2%,蛋白胨0.2%,磷酸二氢钾 0.15%,硫酸镁0.075%,pH值自然. 配方2(马铃薯一葡萄糖一蛋白胨培养基):马铃 薯5%,葡萄糖2%,蛋白胨0.2%,磷酸二氢钾 0.15%,硫酸镁0.075%,pH值自然. 配方3(麦麸一葡萄糖一蛋白胨培养基):米糠 5%,葡萄糖2%,蛋白胨0.2%,磷酸二氢钾 0.15%,硫酸镁0.075%,pH值自然. 配方4(玉米粉蔗糖一蛋白胨培养基):玉米粉 1%,蔗糖2%,蛋白胨0.2%,酵母膏0.3%,磷酸 二氢钾0.1%,硫酸镁0.05%,pH值自然. 配方5(酵母膏一葡萄糖一蛋白胨培养基):葡萄 糖3%,蛋白胨0.3%,酵母膏0.2%,硫酸铵 0.2%,磷酸二氢钾0.1%,硫酸镁0.05%,pH值自 然. 1.4栽培袋的制作与培养 红平菇与平菇一样,在多种农林有机废料上 都能生长,本试验采用了木生食用菌常用的木屑 米糠培养基和常规方法制作栽培袋,配方如下:阔 叶树木屑78%,米糠20%,蔗糖1%,石膏1%,培 养基含水量60%,70%. 将液体菌种摇匀后,倒入已灭菌的栽培袋中, 每一栽培袋10mL,将接好种的培养袋转入黑暗 的恒温培养箱中进行培养.放置栽培袋时,袋与 袋之间留下一点空隙,以利于空气的流通和温度 的传递.根据红平菇的生物学特性,红平菇菌丝 生长的温度范围是18,34?,最适温度在26, 28?之间,要求培养箱黑暗无光照,因此箱内保 持恒定的温度26?,平稳的60%,70%的相对湿 度,同时保证温箱内通风和充足的氧气. 1.5出菇管理 当栽培袋已长满菌丝,并达到生理成熟时就 进入出菇阶段,即可把菌袋搬进菇房排架进行出 菇管理,排架方式与平菇相同.这时要注意开袋 的时问,当发现茵袋上有红色的小菌斑时, 证明 住所证明下载场所使用证明下载诊断证明下载住所证明下载爱问住所证明下载爱问 时 机已成熟应立即开袋,如果开袋不够及时,菌丝会 被迫顶破瓶盖中央的海绵后形成干枯的原基,影 响出菇量.当有的菌袋在侧面先形成原基时,要 用灭过菌的刀片在形成原基附近,划”v”形小口, 但要避免伤到原基,这样子实体就会从小口处长 出.当原基出现后要特别注意光线的控制,如果 光线太弱,长出的红平菇子实体的颜色会变淡,甚 至变成白色,严重影响菇体的外观,降低其商业价 值,影响经济效益.总之,红平菇子实体发育阶段 的管理是非常重要的,是夺得早产,高产,稳产和 优产的重要保障. 2结果与分析 2.1红平菇的形态特征 采收后获得的红平菇子实体的形态特征如 下:红平菇形似平菇,子实体单生,叠生.子实体 的颜色随其生长发育期问的光线强弱而呈现水红 色,粉红色,奶油色.光线强,颜色红;光线弱,颜 色变浅发白.菌盖幼时勺形或贝壳形,边缘内卷, 后逐渐展开呈扇形,直径3,8cm,边缘外卷,波 状.菌柄侧生.菌盖下方长着许多密集与狭长的 菌褶,菌褶幼时特别红,后逐渐褪色为水红色,奶 油色至浅褐色.菌肉菌丝有锁状联合.有缘囊 体,无侧囊体.孢子椭圆形,光滑,(6,10)f肌× (4,5)脚,与菌褶同色. 2.2两种母种斜面培养基对菌落生长的影响 菌落在两种试管斜面培养基上的生长情况见 表1. 24菌物研究2005年 蠢盖菌丝白色粗壮,长满斜面, 马铃薯半组合培养基菌丝白色粗壮,比在PDA培养基上菌丝更浓 Halfsynthesized—potatomedium密,遍布整个斜面及其上部空间. l3,14 l2一l3 由表l可以看出,在两种试管母种培养基上也易取得,因此PDA培养基适合作为红平菇一级 7,8d后菌丝可长满整个斜面.红平菇的一级种种的培养基. 在PDA培养基上生长良好,比在马铃薯半组合培2.35种不同二级液体菌种生长状况的比较 养基上生长得稍快.此外,从经济效益上考虑,5种不同二级液体菌种培养7d后菌丝生长 PDA培养基较马铃薯半组合培养基成本低,材料情况见表2.. 表25种不同液体菌种菌丝生长状况 Table2.Growthsituationofhyphaein5kindsofsecond-classliquidmedia 配方菌丝生长状况 FormulaGrowthsituationofhyphae 配方l:玉米粉.葡萄糖.蛋白胨培养基 Formula1:commea—glucose-peptonemedium 配方2:马铃薯.葡萄糖.蛋白胨培养基 Formula2:potato-glucc~e—peptonemedium 配方3:麦麸.葡萄糖.蛋白胨培养基 Formula3:wheatbran—uc0se—peptonemedium 配方4:玉米粉.蔗糖.蛋白胨培养基 Formula4:maizepowder-saccharose—peptone mediurn 配方5:酵母粉.葡萄糖.蛋白胨培养基 FormldaS.veastoo~cler.ll】co6e-t~eDtonemedIl】m 菌丝长势良好,生长迅速,为小粒菌球,7d时菌丝长满培养液,使培养液成为糊状, 菌丝量最多. 菌丝长势最差,有零星碎屑状小菌球分布,7d时菌丝量最少. 菌丝长势良好,菌球大,直径5mm左右,规则的圆形,7d时菌丝长满培养液,菌丝量 较多. 菌丝生长最快,4d时长满培养液,且都为0.3—0.5crrl大小不等的菌球,夹杂少许 1cr左右的大菌球,但以后生长势减缓,7d时菌丝量中等. 菌丝长势一般,只有底部有一层细小的菌球,7d时菌丝量少. 由表2可以看出,配方1的菌球较小,但菌液 中菌丝丰富,成糊状;配方2虽有菌球生长但数量 少;配方3菌丝生长较快,菌球大成规则的圆形, 菌丝量较多;配方4菌丝最初长势良好,约4d形 成0.3,0.5cm大小不等的菌球,夹杂少许约1cm 的大菌球,但是以后菌丝量增加少;配方5菌丝长 势一般,只有底部有一层细小的菌球.因此,最适 合红平菇生长的液体培养基是配方1(玉米粉一葡 萄糖一蛋白胨培养基)和配方3(麦麸一葡萄糖一蛋白 胨培养基).由表2还可以看出,所有液体菌种长 满菌液的时间大都为7d,7d后若继续进行摇瓶 培养,菌量不会增加,菌丝生长势反而衰退,因此 液体菌种比常规固体原种长满菌袋的时间30d 减少23d,从而大大地缩短了整个栽培过程的生 长周期,显着地增加了经济效益.在生产栽培时, 可根据栽培袋的多少培养足够的二级液体菌种. 2.4栽培袋发茵情况 由于二级种用液体菌种接种栽培袋,栽培袋 在培养箱中只需经过22,27d的培养,就已长满 菌丝.这时菌丝粗壮,浓密,饱满,洁白,长势良 好,表明菌丝已达到生理成熟.同时进行了用固 体菌种作为二级种的对比试验,如用固体二级种 接种栽培袋,栽培袋需要30d长满菌丝,达到生 理成熟.可见用二级液体菌种制作的栽培袋比用 固体菌种制作的栽培袋发菌缩短3,8d. 2.5出菇管理措施 红平菇子实体的生长发育与平菇相似,基本 上可分为桑椹期,珊瑚期,成菇期和菌丝恢复生长 期,要分别对这几个时期进行管理,根据各个时期 的不同生理特点采取相应的措施. 桑椹期的管理:把已长满菌丝的栽培袋搬入 菇房内,并有序地排放在铁架上,留有适当的空 隙.当发现菌袋上有红色的小菌斑时就开袋,或 在侧面用灭过菌的刀片在形成原基附近划”v”形 小口.此时往地上洒水并向空气中喷水,保证菇 房的湿度在85%,95%.早晨和晚上开窗2次, 第3卷第l期池玉杰等:在哈尔滨地区使用液体菌种栽培红平菇技术 初探 每次2O,30min,以便菇房有持续的昼夜温差,保 证空气流通,同时保证菇房内有充足的散射光. 菇房内保持菇蕾分化的最适温度在l8,25cC之 间,从而有效地保障菌丝的分化,促进原基的形 成. 珊瑚期的管理:桑椹期之后的2,3d便进入 珊瑚期,出现小而红的菌盖,珊瑚期一般持续1, 2d.这时要把温度严格控制在2O,3OcC之间, 保持湿度达到85%,95%.此时,除往地上喷水 外还要往空气中喷雾状水,做到每次喷水量适当. 在喷水前多开窗,保证菇房的供氧量. 成菇期的管理:成菇期又称子实体形成和发 育期,是子实体生长发育快速的时期.这一时期 是提高成菇率的关键,也是管理的关键时期.成 菇期一般持续2,3d.此阶段的管理着重解决好 通风与湿度的矛盾,可根据不同时期不同外部条 件的影响而灵活地改变通风和湿度条件,从而保 证红平菇的子实体正常快速生长的需要.要把空 气湿度提高到9o%,95%,此时若空气中湿度太 小,低于90%,会导致培养料失水,子实体会变硬 而降低质量,也会影响第2批菇的产量.要采用 正确而有效的方法,保证湿度时往地上洒水,通风 之后立即喷雾状水,尽量使子实体从空气中吸收 水分,减少培养料中水分的消耗.在空气干燥的 时候多喷水,潮湿时少喷.应特别注意通风,早晚 各通1次风,保证空气新鲜.此外,还要加强散射 光照,如果光线太弱,长出的红平菇子实体的颜色 会变淡,甚至变成白色,严重影响菇体的外观,降 低其商业价值,影响经济效益.此时还要保持子 实体发育的最适温度在22,3OcC之间.当菇长 到七八分成熟时采菇,以后马上进入菌丝恢复期 的管理. 菌丝恢复期的管理:采菇次日,向裸露的袋端 喷1%复合肥溶液,数小时喷1次,连喷3到4次. 待料吃透溶液后,再喷适当的营养液,此时的湿度 可以降低些,大概在80%,85%,等待发菌和 第2批菇的生长. 2.6在哈尔滨地区红平菇栽培季节的选择 红平菇是原产于热带和亚热带地区的一种木 腐菌,对温度和湿度等气候条件有特定的要求,但 红平菇生命力极强,在粗放的条件下也容易出菇 和成活,很容易管理,是一种适宜在国内推广的优 良食用菌种.在东北地区栽培与在南方栽培的差 异之处就是掌握好制种和栽培季节,因此掌握红 平菇在东北不同地区的栽培管理技术,选择红平 菇生长的最适季节和最适合栽培期非常重要,不 同的地区可根据当地的气候条件灵活地选择制种 的时间和栽培期,从而达到利用自然温度或人为 简单地创造一些条件就可满足红平菇生长发育的 需要. 就哈尔滨地区来讲,为使出菇时的温度条件 符合红平菇的要求,一级种最早的制种时间可选 在4月中旬,二级液体菌种的制种时间为4月下 旬,这样到5月下旬大约经过一个月的养菌阶段, 出菇时的温度就可达到红平菇所需的22cC以上, 可以在自然的温度条件下出菇,无需人工加温,能 够节省很多的人力,物力,增加经济效益.整个栽 培季节从4月中旬一级种制作起,经过6月,7月, 8月持续到9月上旬. 2.7红平菇的生物学效率和经济效益评估 红平菇的 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 栽培袋每袋平均重0.5kg,每 袋平均产鲜菇0.50,0.75kg,则产量为100%, 150%. 红平菇的标准栽培袋每袋成本0.80, 1.00元,按鲜菇3,4元/kg计算,每袋扣除成本 后可纯获利0.5,2.0元.因此经济效益显着. 3结论 适合红平菇一级种的培养基为PDA培养基, 一 级种长满试管斜面的时间是7d.适合红平菇 二级液体菌种的培养基为玉米粉一葡萄糖一蛋白胨 培养基和麦麸一葡萄糖一蛋白胨培养基,7d时菌丝 长满培养液. 液体菌种与固体菌种相比具有生产周期短的 特点.因为液体菌种菌龄较整齐一致,为小球状 菌丝体和许多菌丝片段,分散度大,接种于固体培 养料中,可随培养液下渗到固体培养料的各个部 位,形成许多发菌中心,所以用液体菌种接种栽培 袋,接种后菌丝能迅速恢复生长,栽培袋在培养箱 中只需经过22,27d的培养,就长满菌丝,用液体 菌种比用固体原种制作的栽培袋缩短3,8d.以 后出菇也比较整齐,便于采收,管理.如果采用传 统的斜面母种一固体原种.固体栽培种的生产方式 生产红平菇,一个生产周期需要60,70d,而采用 斜面母种.液体原种一固体栽培种的生产方式生产 红平菇,整个栽培环节可减少26,31d,从而显着 菌物研究2005链 地提高栽培效率. 红平菇生命力极强,在粗放的条件下也容易 出菇和成活,很容易管理,是一种适宜在国内推广 的优良食用菌种.在哈尔滨地区适合红平菇栽培 的季节是4月中旬至9月上旬.红平菇的生物学 效率为100%,150%,每袋刨除成本后可纯获利 0.5,2.0元,因此经济效益显着. 参考文献: [1]黄年来.18种珍稀美味食用菌栽培[M].北京:中国农业 出版社,1997. 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PreIimjnaStudyonCultivatingTechniqueofPleurotusdjamorUsingLiquidI solatein Harbin CHIYu.jie,LIUZhi.hui,HEJian.gtlO2 1.c0如ofForestry,NortheastForestryUniversity,Harbin,Heilongjiang150040,Ch/n a 2.CollieofMaterialScienceandEngineering,NortheastForestryUniversity, Harbin,Heilongjiang150040, China Abstract:ChoiceisolateofPleurotus 如,n0r(IsolateNo.H1)inHarbinwasdeveloped,theworkof whichincludedscreeningofmediumoffirst—classisolate,screeningofmedi classliquidiso— umofsecond— late,culmleofcultivatingsacksandmanagementtechniqueofmushroomgrowth.Theresultsshowedthat Pleurotusa,n0rcouldgrowvery-wellbothinPDAmediumandinhalfsynthesized—PDAmedium.The hyphaewerewhite,stronganddense,fullintesttubeonthe7thto8thday,Pleurotus如,norcould growvery-wellandgrowfastincornmeal—glucose—peptoneandwheatbra n—gtucose—peptoneliquidmedia, hyphaewerefullinmediumonthe7thdayandmyceliumamountsweremolethanthoseintheotherthree liquidmedia.Theconventionalmethodtoproducecultivatingsacks,developinghyphaeandmushroom growthmanagementtechniquesimilartothoseofPleuromsostreatuswereused.TheoutputofPleurotus djamorWasupto100%, 150%.Theentireprocessfromproducingfirst—classisolatetoharvestingonly needs50,60dbyadoptingtheliquidcultivatingtechnique,whichis26, 31dshorterthanthatofcon— ventionalsecond.classsolidisolate. Keywords:Pleurotusu 咖,nor(thepinkoystermushroom);second—classhquidisolate;cultivating technique;Harbin