实验二培养基母液的配制及保存

实验二 培养基母液的配制及保存 一、目的 要求 对教师党员的评价套管和固井爆破片与爆破装置仓库管理基本要求三甲医院都需要复审吗 了解并掌握植物组织培养中MS培养基母液、生长调节剂母液配制与保存的基本知识及操作规范，能根据配方准确计算各种药品的称取量。 二、基本原理 在配制培养基之前，为了使用方便、简化操作、用量准确，减少每次配药称量各种化学成分所花费的时间和误差，常常将配制培养基所需无机大量元素、微量元素、有机物、铁盐、激素等分别配制成比需要量大若干倍的浓缩母液，置于冰箱内保存。当配制培养基时，按预先计算好的量分别吸取各种母液即可。本实训以MS培养基为例，学习培养基母液的配制 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 。 三、试剂与主要用具 1．仪器、用具 电子天平(感量0.01g和0.0001g)、药匙、玻璃棒、称量纸、吸水纸、滴管、洗瓶、标签纸、烧杯（50ml、100ml、200ml）、容量瓶（100ml、200ml、500ml、1000ml）、试剂瓶（100mL、200mL、500ml、1000ml）、量杯、量筒、移液管、移液枪、洗耳球、电炉、冰箱等。 2．试剂  （1）95%乙醇、1mol/L NaOH、1mol/L HCl （2）MS培养基各成分试剂 （3）植物生长调节剂：2，4-D、6-BA、IAA、NAA等 （4）洗涤剂、蒸馏水 四、方法步骤 1．大量元素母液的配制 按照MS培养基配方的需要量，将各种化合物称量扩大10倍，用电子天平称取，并分别用少量蒸馏水溶解，如溶解速度慢，可稍加热。完全溶解后，按 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 4-1顺序依次混合已溶解的化合物溶液，并搅拌，以免产生沉淀，注意最后加入氯化钙溶液，混匀，用量筒定容到500ml，倒入试剂瓶中并贴好标签。保存于4℃冰箱待用。 表4-1  MS培养基大量元素母液（10倍）的配制剂量 母液 化合物名称 配方用量 （mg/L） 扩大倍数 母液体积(mL) 称取量(mg) 配1L培养基吸取母液量（mL） 大 量 元 素 KNO3 1900 10 500 9500 100 NH4NO3 1650 8250 MgSO4·7H2O 370 1850 KH2PO4 170 850 CaCl2·2H2O 440 2200 2．微量元素母液的配制 按照MS培养基配方需要量，将微量元素各种化合物（如表4-2）扩大100倍，用万分之一的电子天平分别准确称取，用少量蒸馏水溶解，也可以混合溶解，混合后定容到500mL。将配制好的母液倒入试剂瓶中，并贴好标签，保存于4℃冰箱中。 表4-2  MS培养基微量元素母液（100倍）的配制剂量 母液 化合物名称 配方用量 （mg/L） 扩大倍数 母液体积(mL) 称取量 (mg) 配1L培养基吸取母液量（mL） 微 量 元 素 MnSO4·4H2O 22.3 100 500 1115 10 ZnSO4·7H2O 8.6 430 H3BO3 6.2 310 KI 0.83 41.5 Na2MoO4·2H2O 0.25 12.5 CuSO4·5H2O 0.025 1.25 CoCl2·6H2O 0.025 1.25 3. 铁盐母液的配制  常用的铁盐是FeSO4·7H2O和Na2-EDTA的螯合物，必须单独配制。配制时，按照扩大100倍的用量（如表4-3），分别称取FeSO4·7H2O和Na2-EDTA，分别溶解后，将Na2-EDTA溶液缓缓倒入FeSO4溶液中(需加热溶解)，搅拌均匀使其充分螯合，用蒸馏水定容到500mL后贮放于棕色玻璃瓶中，贴好标签，保存于4℃冰箱中。 表4-3  MS培养基铁盐母液（100倍）的配制剂量 母液 化合物名称 培养基用量（mg/L） 扩大倍数 母液体积 (mL) 称取量 (mg) 配1L培养基吸取母液量（mL） 铁盐 Na2-EDTA 37.3 100 500 1865 10 FeSO4·7H2O 27.8 1390 4．有机物母液的配制  按照表4-4 中各成分浓度扩大100倍后的用量，用感量0.0001g电子天平分别称量各有机物。分别溶解定容后装入试剂瓶中，也可以混合溶解定容，装入同一试剂瓶中，写好标签，放入冰箱中保存。一般有机物都溶于水，但叶酸（VBc）先用少量稀氨水或1mol/L NaOH溶液溶解；VH（生物素）先用1mol/L NaOH溶液溶解；VA、VD3、VB12应先用95%乙醇溶解，然后再用蒸馏水定容。 表4-4  MS培养基有机物母液（100倍）的配制剂量 母液 有机物名称 培养基用量 （mg/L） 扩大倍数 母液体积(mL) 称取量 (mg) 配1L培养基吸取母液量（mL） 有 机 物 甘氨酸 2.0 100 500 100 10 盐酸硫胺素（VB1） 0.1 5 盐酸吡哆素（VB6 ） 0.5 25 烟酸 0.5 25 肌醇 100 5000 注：表中各成分的扩大倍数与称取量仅是举例，可以根据各实际需要，确定扩大倍数、计算实际称取量。 5．激素母液的配制  激素母液必须分别配制，浓度根据培养基配方的需要量灵活确定，一般是0.1～2mg/ml，根据需要确定配制的浓度。称量激素要用感量万分之一天平。配制激素母液时应注意，各激素的溶剂不同，具体见表4-5。 表4-5  常用植物激素及生长调节物质的溶剂 中文名 缩  写 溶  剂 2，4-二氯苯氧乙酸 2,4-D NaOH/乙醇 吲哚乙酸 IAA NaOH/乙醇 吲哚丁酸 IBA NaOH/乙醇 α-萘乙酸 α-NAA NaOH/乙醇 6-苄基氨基腺嘌呤 6-BA NaOH/ HCl 腺嘌呤 Ade H2O 激动素 KT HCl / NaOH 玉米素 ZT NaOH 赤霉素 GA 乙醇 脱落酸 ABA NaOH 注：称取10mgNAA溶解后定容至100ml，即得到0.1mg/mlNAA贮备液。 称取100mg 6-BA溶解后定容至100ml，即得到1mg/ml6-BA贮备液。 激素 称配量（mg） 定容体积（ml） 浓度（mg/ml） 6．在配制母液时应注意： （1）培养基各试剂应使用分析纯，用蒸馏水溶解及定容。 （2）在称量时应防止药品间的污染，药匙、称量纸不能混用，每种试剂使用一把药匙，多出的试剂原则上不能再倒回原试剂瓶。 （3）使用电子天平时注意不要把药品撒到称盘上，用完以后，用洗耳球将天平内的脏物清理干净。 （4）母液配制好后，贴上标签，标明母液名称、试剂浓度或扩大倍数、配制日期，并存放在4℃冰箱中。使用前，要进行检查，若发现试剂中有絮状沉淀、或长菌、或铁盐母液的颜色变为棕褐色，都不应再使用。 五、结果与分析 1 为什么要配制培养基母液？ 2 在配制培养基时，配制1升MS基本培养基应吸取本实验中所配制的四种混合母液各多少毫升？ 3仔细观察在配制母液过程中的现象与遇到的问 题 快递公司问题件快递公司问题件货款处理关于圆的周长面积重点题型关于解方程组的题及答案关于南海问题 ，如是否产生浑浊或沉淀，并分析出现混浊的原因。