探讨烟碱的抗炎作用

探讨烟碱的抗炎作用 Nicotine As An Anti-Inflammatory Alkaloids 梁文涛 赵静静 郑智浩 翟滨 【摘要】 目的 探讨烟碱的消炎效果。 方法 建立大白鼠角叉胶性足跖肿胀、小鼠二甲苯性耳廓水肿、大白鼠纸片肉芽肿增生这几种炎症模型，分别用烟碱与皮炎平、生理盐水对比观察疗效，比较全面地探讨烟碱的抗炎作用。 【关键词】烟碱 抗炎 【Abstract】 Here we construct three inflammatory models including hind paws swelling induced by carrageenan, Xylene-induced ear oedema and maekedly proliferation of granuloma induced by implantation of pieces. To evaluate the anti-inflammatory effect of nicotine. Rats among the three models mentioned above are treated with nicotine, Compound Dexamethasone Acetate Cream and NaCl as comparision. 【Key Words】 nicotine, anti-inflammatory effect 1 引言 作为一种药物来说，烟碱有很多副作用。除了固有的成瘾性，它还可能导致心血管问题，甚至引发癌症。但最新的研究成果表表明:烟碱能够遏制老鼠体内的过激炎症反应，与现有 [1]的消炎疗法相比，它的能力更强。其机制是烟碱与巨噬细胞表面的烟碱受体结合，能阻止[2]细胞释放炎症细胞因子，并且抑制作用异常强大。研究人员还辨别出，在烟碱抑制细胞因[3]子产生时，它结合的位点是位于巨噬细胞表面的α-7 乙酰胆碱受体。 2 材料 关于××同志的政审材料调查表环保先进个人材料国家普通话测试材料农民专业合作社注销四查四问剖析材料 与方法 2.1 材料 2.1.1 对象:大白鼠24只，体重130-150g，雄性;昆明种小鼠12只，体重25-30g，雄性 2.1.2 药物:烟碱，1%角叉胶(10ml)，100%二甲苯(10ml)，乙醚，生理盐水，碘酒，皮炎平 2.1.3 器材:常规手术器械(手术刀、手术缝针、医用缝线等)，9mm直径打孔器，电子称，软皮尺，#26针头注射器，市售测定抗菌素活性的滤纸片 [6]2.2 方法 [5]2.2.1大白鼠角叉胶性足跖肿胀 [操作步骤] (1) 实验常用的致炎剂:角叉胶。注入量为0.05ml，浓度为1% (3) 选用体重130-150g健康大白鼠12只(随机分成4组，每组3只)，实验前灌水5-10ml。 (3) 将动物右后肢拉直，用#26针头注射器先自足跖中部皮下向上注入一部分，然后掉转针头向下注完。30分钟后每组大鼠分别搽生理盐水、不同量的烟碱、皮炎平。 (4) 分别于注入后1-5小时每小时按下列方法测定其肿胀程度，观察到达高峰时间和消退时间，比较给药组和对照组的差异情况。 (5) 分别用特制软皮尺测量踝关节周长，测量周长的软皮尺不能有弹性，刻度以1/5mm左右为宜。测量部位尽量少变动，每次测量的宽紧度必须一致。测量动作要熟练，要由专人 1 负责，尽可能减少误差。 [4]2.2.2 小鼠二甲苯性耳廓水肿法 [操作步骤] (1) 将体重25-30g雄性小白鼠12只(随机分成4组，每组3只)，用二甲苯涂于动物左耳前后两面(100%二甲苯0.02ml/只)。半小时后再涂受试药物，用皮炎平作阳性对照药。 (2) 隔4小时，将小白鼠颈椎脱臼致死，沿耳廓基线剪下两耳，用9mm直径打孔器分别在同一部位打下圆耳片，电子称称重。 (3) 每鼠左耳片重量减去右耳片重即为肿胀度。将对照组与给药组的肿胀程度进行统计学处理。 [6]2.2.3大白鼠纸片肉芽肿增生法 (1) 采用大白鼠12只(随机分成4组，每组3只)，纸片为市售测定抗菌素活性的滤纸片(直径8mm、厚1.5mm)，干燥灭菌30分钟。 (2) 在乙醚麻醉下，将纸片植入动物左右肩部或上胸部皮下各1片，用碘酒消毒伤口，缝合皮肤。在室温20—24?、湿度55?5%环境下饲养。 (3)于纸片植入后第6日起用烟碱搽伤口，连续给药3日。用皮炎平作阳性对照药。 (4)植入纸片第10日处死动物，将纸片与肉芽组织一并摘出。于60?干燥24小时后称重，减去原有纸片重量，即为肉芽净重。 3 实验结果 记录 混凝土 养护记录下载土方回填监理旁站记录免费下载集备记录下载集备记录下载集备记录下载 表一 大白鼠角叉胶性足跖肿胀法 右足周径(mm) 剂量 左足周两足周径肿胀度组别 只数 (mg/只) 径(mm) 差(mm) (%) 1h 2h 3h 4h 5h 3 空白对照组 3 皮炎平组 3 烟碱组 3 表二小鼠二甲苯性耳廓水肿法 左耳片重量右耳片重量耳片重量差肿胀度组别 剂量(mg/只) 只数 (mg) (mg) (mg) (%) 空白对照组 3 皮炎平组 3 3 烟碱组 3 表三大白鼠纸片肉芽肿增生法 组别 剂量(mg/只) 只数 纸片重量(mg) 总重量(mg) 肉芽净重(mg) 空白对照组 3 皮炎平组 3 3 烟碱组 3 [6]4 可行性 4.1 大白鼠角叉胶性足跖肿胀法 2 (1) 角叉胶属于中效致炎剂，应用广，其肿胀模型可靠，差异性小，有高度重现性。 (2) 可作定量测定，结果可进行统计学分析 (3) 大白鼠易于得到，动物种属间差异小 (4) 唯一缺点是大白鼠足跖部有丰富的易释放的5-羟色胺，对5-羟色胺有拮抗作用的受 试药物可获得片面的抗炎效果阳性的结论。 4.2 小鼠二甲苯性耳廓水肿法 (1) 涂致炎剂的部位应与取下的耳片相吻合。 (2) 打孔器应锋利，可选用由碳钢制的皮带冲。 [评价] 本法不需要特殊设备，方法简便，见效快，用药量少，且复制成功率高，适用于新 抗炎药常规筛选法。 4.3 大白鼠纸片肉芽肿增生法 本法优点在于纸片形成的肉芽易于分离，并能精确定量。 除测定肉芽肿重量，还可测定其中的羟脯氨酸含量，由此算出胶原蛋白含量。 4.4 实验性炎症应根据实验模型的不同采用不同种属的动物。目前尚不能确证性别对炎症 模型的影响，且药理剂量的雌激素有抗炎与免疫抑制的作用，故一般宜选用雄性动物。 5 创新性 烟碱因其毒理作用，临床应用较少，而其消炎作用是最近才发现的。研究表明，烟碱的 结构与乙酰胆碱(acetylcholine)非常相似，能在免疫调节中模仿乙酰胆碱。乙酰胆碱具有 衔接神经系统和免疫系统的巨大作用，神经系统通过乙酰胆碱控制人体内产生的炎症。乙酰 胆碱的受体不仅存在于神经末梢，也存在于免疫细胞表面。烟碱与巨噬细胞表面的烟碱受体 结合，阻止细胞释放炎症细胞因子，并且抑制作用异常强大，所以想通过这几项实验来检验 烟碱的消炎作用。希望通过实验能证明其消炎作用的存在，为新药研制和临床用药提供一些 线索。 6 预期效果 烟碱对大白鼠角叉菜胶性足跖肿胀、小鼠二甲苯性耳廓水肿及大白鼠纸片肉芽肿增生均 有显著的抑制作用，提示烟碱具有抗炎作用。 参考文献 [1] Luis Ulloa,the vagus nerve and the nicotinic anti-inflammatory pathway,nature reviews drug discovery,4,673-684,(2005) [2]Hong Wang, Man Yu, Mahendar Ochani, Carol Ann Amella,Mahira Tanovic, Seenu Susarla, Jian Hua Li, Haichao Wang,Huan Yang, Luis Ulloa, Yousef Al-Abed, Christopher J. Czura Kevin J. Tracey, Nicotinicacetylcholine receptorα-7subunit is an essential regulator of inflammation,NATURE,421,384-388,(2003) [3]Leonard, S.Bertrand,D. Neuronal nicotinic receptors: from structure to function. Nicotine Tob. Res.,3, 203-223,(2001). [4]Vogel, H.G., Vogel,W.H., Drug Discovery and Evaluation, Pharmacological Assays,402-403,(1997) [5]Winter, C.A., Risley, E.A., Nuss, G.W., 1962. Carrageenan-induced oedema in hind paw of the rat as an assay for anti-inflammatory drugs. Proceedings of the Society for Experimental Biology Medicine 111, 544-547 [6] 徐叔云、卞如濂、陈修主编，药理实验方法学(第二版)，人民卫生出版社，1991 3 附: 药品、器材 量 烟碱(针剂) 待定 1%角叉胶 10ml 100%二甲苯 10ml 乙醚 30ml 生理盐水 50ml 碘酒 2瓶 皮炎平(市售) 3支 9mm直径打孔器 3个 电子称 1台 #26针头注射器 15支 市售测定抗菌素活性的滤纸片 20片 手术刀(刀片) 20 手术缝针 30 医用缝线 棉球 2包 4