Plus苯基己基柱和稳定的键合苯基柱分离潜在的（可编辑）

Plus苯基己基柱和稳定的键合苯基柱分离潜在的（可编辑） Plus苯基己基柱和稳定的键合苯基柱分离潜在的 使用具有独特选择性的 Agilent ZORBAX Eclipse 苯基己基柱和稳定的键合苯基柱分离潜在的 Plus - 有害偶氮染料 应用 生活日用品 表 按照欧盟指定 绝对不允许在生活日用品中存在 12002/61/EC [1] 作者 的芳香胺 John W. Henderson Jr. and William J. Long 名称 美国化学文摘 号 CA Agilent Technologies, Inc. 联苯胺 92-87-5 2850 Centerville Road 联苯 胺 -4- 92-67-1 2 Wilmington, DE 19808-1610 萘胺 2- 91-59-8 USA 氯 甲苯胺 4- -o- 95-69-2 二氯 亚甲基二苯胺 2, 2'- -4, 4'- 101-14-4 摘要 氯苯胺 4- 106-47-8 二氯联苯胺 3, 3'- 91-94-1 使用具有独特选择性的 苯基己 Agilent ZORBAX Eclipse Plus - 甲氧基联苯胺 3, 3'- 119-90-4 基柱以及与 兼容的流动相,梯度分离来源于偶氮染料中的九 MS 二甲基联苯胺 3, 3'- 119-93-7 个芳香族胺。然后使用一种具有不同选择性的 亚甲基二苯胺 Agilent ZORBAX 4, 4'- 101-77-9 亚甲基邻甲苯胺 苯基柱作为第二种液相色谱方法,这两种苯基固定 4, 4'- - - 838-88-0 StableBond 甲基间苯二胺 4- - - 95-80-7 相在化学性能上有明显的差别,从而把它们结合起来可以成功地 甲氧基基苯胺 2- 90-04-0 分离含有苯基的胺类化合物。 甲氧基间苯二胺 4- - - 615-05-4 甲氧基间甲苯胺 6- - - 120-71-8 前言 氧二苯胺 4,4'- 101-80-4 硫代二苯胺 4, 4'- 139-65-1 您每天使用的彩色生活日用品中很多都含有偶氮染料 甲苯偶氮基邻甲苯胺 4-o- - - 97-56-3 (染料和色素),这些东西广泛地用于纺织品、皮革、墨 甲苯胺 o- 95-53-4 水和塑料中,并且常常用在化妆品和食品中。有些偶氮 硝基邻甲苯胺 5- - - 99-55-8 染料会分解形成胺类化合物 : 三甲基苯胺 2,4,5- 137-17-7 &A?NN?BA?NH +B?NH 2 2 含苯基固定相与含甲醇的流动相结合,与含烷基的固定 偶氮染料 胺 胺 相(如 和 ) 相比,对芳香胺具有十分不同的 C8 C18 [2] 因为生活日用品可能要和皮肤或口腔接触,偶氮染料可 选择性,含苯基固定相可用于含苯基结构的分析物,因 能会还原成有毒的胺,许多国家禁止在生活日用品中使 而对于芳香胺分析来说是首选的固定相。被分离的 种 9 用偶氮染料,表 中列出一些源于某些偶氮染料的有毒 1 胺类化合物,包括苯胺和特殊偶氮染料还原形成的 种 8 芳香胺,在本研究中将测定它们在血液中的含量。 有毒胺类化合物,图 是它们的结构以及在 1 ZORBAX苯基己基柱上按下面所述实验条件进行的洗脱 色谱柱 Eclipse ZORBAX : 次序。 苯基己基柱ZORBAXEclipse Plus - 4.6 mm x 100 mm, 5苯基柱ZORBAX StableBond 4.6 mm x 100 mm, 5实验部分 样品瓶 琥珀色螺口盖 : 分析采用 快速分离液相色谱 HPLC Agilent 1200 安捷伦部件号 5182-0716 系统进行 RRLC : 样品瓶盖 蓝色螺口盖 : 型二元泵,使用流动相 乙酸铵和乙酸G1312B SL A: 10 mM 安捷伦部件号 5282-0723 的水溶液 甲醇,流速 ,梯度为:初始 , pH 4.7; B: 1 mL/min ,在 内提高到 25% B 9 min 90% B 样品瓶插管 玻璃 聚合物支脚 : 100 ?L / 安捷伦部件号 5181-1270 自动液体进样器 进样体积为G1376C ALS SL 2.0 ?L 各种芳香胺购自 ,并溶解在 中, 型温控柱温箱,温度 Sigma-Aldrich MeOHG1316B SL 25 ? C 浓度大约为 然后混合成为试样,每种胺溶液 1 mg/mL二极管阵列 检测 工程第三方检测合同工程防雷检测合同植筋拉拔检测方案传感器技术课后答案检测机构通用要求培训 器 波长为G1315C DAD 220, 4 nm 分别取 ,然后用水稀释为 的混合物。 100-?L 1:10 带 微量流通池光程 体积 Refoff, G1315-60024 3 mm, 2 ?L. NH 2 NH NH NH NH 2 2 2 2 CH OCH 3 3 H N 2 CI Aniline o-toluidine Methoxyaniline Benzidine Chloroaniline 苯胺 邻甲苯胺 甲氧基苯胺 联苯胺 氯苯胺 - anisidine CH 3 NH NH 2 2 H C H CO N H 3 3 2 OCH 3 H N H N 2 2 二甲基联苯胺 二甲氧基联苯胺 萘胺 Dimethylbenzidine o-tolidine Dimethoxybenzidine Naphthylamine 二氯联苯胺 Dichlorobenzidine 图 芳香胺的结构 1 2 CI H N NH 2 2 CI图 是在 苯基己基柱和 2 ZORBAX Eclipse Plus - 结果与讨论 苯基柱上分离偶氮染料胺类化合 ZORBAX StableBond 针对不同的胺类化合物可以使用一个最适合的流动相梯 物的色谱图。方法 相同,只是色谱柱(固定相)不同。 度,以使它们在合适的时间里得到最好的分离,我们选 - 比较色谱图所有的被分析物都有各自的保留 因子因 k , 择甲醇做流动相的有机组分,这就让被分析物和流动相 而就有各自不同的选择性 和分离度。甚至一些被分 α 之间的苯基产生 相互作用力,甲醇的 相互作用 π-π π-π 析物有不同的洗脱次序,如联苯胺和氯苯胺,或者二甲 力要比乙腈强 ,使用乙酸铵缓冲溶液 与 [2, 3] pH 4.7 氧基联苯胺和萘胺。由于色谱柱之间的选择性不同,使 使用 甲酸 流动相相比,可以增加胺类化合 0.1% pH 2 苯基己基柱和 ZORBA XEclipse Plus - ZORBAX 物的保留时间。胺类化合物的反相分析一般使用 pH 苯基柱成为很好的一对色谱柱,用以分析 StableBond + 的流动相,因为在低 下铵 离子的水溶性更 2 pH NH 4 禁用的偶氮染料胺类化合物,因为许多法规方法中常常 好,这样它就不易在柱上保留。在 时形成质子化 pH 5 需要有两种色谱方法进行确认。使用相同的流动相和方 的 ,可以较好地在固定相上保留。由于使用接近于 NH 3 法参数,可以用利用色谱柱切换阀(安装在柱恒温室中 被分析物 的流动相使峰型变坏并不明显,这可能 pKa 的选件),在 液相色谱仪上以一个自动程 Agilent 1200 是由于把梯度集中于被分析物的谱带。缓冲溶液也有挥 序按次序运行两个方法。 发性,使其适合于 检测器。 MS mAU 8 350 Eclipse Plus Pheny苯基 lhex己基柱, yl 4.6 mm × 100 mm, 5 ?m ZORBAX Eclipse Plus - 4.6 mm x 100 mm, 5 ?m 300 250 7 9 6 200 150 2 4 3 100 1 5 50 0 123456789 min mAU 8 苯基柱, ZORBAX StableBond StableBond Phenyl 4.6 mm 4.6 mm x 100 mm, 5× 100 mm, 5 ?m m 350 1 苯胺 300 1 Aniline 2 邻-甲苯胺 2 o-toluidine 250 3 甲氧基苯胺 3 Anisidine 9 6 7 200 4 氯苯胺 4 Chloroaniline 5 联苯胺 5 Benzidine 150 6 萘胺 4 6 Naphthylamine 23 100 77 o联甲苯胺 -tolidine 1 5 88 D 二甲氧基联苯胺 imethoxybenzidine 50 9 Dichlorobenzidine 9 二氯联苯胺 0 123456789 min 流动相 乙酸铵 进样量 : A: 10 mM , pH 4.7 :2.0 ?L 甲醇 温度 B: : 25 ?C 流速: 1 mL/min 检测: UV 220 nm 梯度 时间 : %B 025 990 图 在不同的 苯基柱上分离芳香胺表现出明显不同的选择性 2Agilent ZORBAX3表 两种 苯基柱化学性质的差别会导致选择性的巨大差 异 2Agilent ZORBAX 苯基己基柱 苯基柱 ZORBAXEclipse Plus - ZORBAX StableBond 封端 是 无,但是在硅烷键上有立体的二异丁基基团 苯基连接 己基 丙基 碳载量 % 9% 6% 硅胶基 改进的 型 型 B ZORBAX B ZORBAX 两种苯基固定相选择性的不同,可以用两个因素来解释, 参考文献 碳氢化合物含量和 封端的不同,总结在表 中。 1 2 2 1. Opinion on: Report Final Draft on “ Assessment 己基和丙基连接基会影响两种固定相的选择性,没有封 of the risks to human health posed by azo 端 固定相连接有二异丙基大的立体基团与苯基己基 SB colorants in toys, writing inks and paper 硅烷上只有小的甲基以及它在硅胶上有浓集的封端相 products, and analysis of the advantages and 比,也会影响选择性的差别。总体上对色谱柱就有明显 drawbacks of restrictions on their marketing 的差别。 and use.” Opinion expressed at the 24th CSTEE plenary meeting, Brussels, 12 June 2001 结论 ////0>. /sct/docshtml/sct_out109_en.htm 苯基己基柱和 ZORBAX Eclipse Plus - ZORBAX 苯基柱是分离含苯基结构的化合物如芳香 StableBond 2. M. Yang, et al, “ Impact of Methanol and Aceto- 胺类被分析物的最佳选择。 苯 π π ZORBAX Eclipse Plus nitrile on Separations Based on - Interactions 基己基柱是一种具有特殊性能的色谱柱,例如己基连 - with Reversed Pphase Phenyl Column,” J. of 接基团和对硅醇基彻底的封端,这就造成与 ZORBAX Chromatography, 1097, 124?129, 2005 苯基柱不同的选择性。这些独特的固定相 StableBond 3. W. Long and J. Henderson, “ Unique Selectivity 与甲醇流动相的选择性相结合增强了被分析物与固定相 and High Throughput Applications of SB-Phenyl 苯基之间的化学作用力。 安捷伦科技出版物 RRHT,” 5989-6067EN, 2007 4附录 可提供的 苯基己基柱 Agilent ZORBAX - 苯基己基柱 959990-912 ZORBAX Eclipse Plus - , 5 ?m, 4.6 mm x 250 mm 苯基己基柱 959993-912 ZORBAX Eclipse Plus - , 5 ?m, 4.6 mm x 150 mm 苯基己基柱 959963-912 ZORBAX Eclipse Plus - , 3.5 ?m, 4.6 mm x 150 mm 苯基己基柱 959996-912 ZORBAX Eclipse Plus - , 5 ?m, 4.6 mm x 100 mm 苯基己基柱 959961-912 ZORBAX Eclipse Plus - , 3.5 ?m, 4.6 mm x 100 mm 959964-912 ZORBAX Eclipse Plus苯基-己基柱, 1.8 ?m, 4.6 mm x 100 mm 苯基己基柱 959933-912 ZORBAX Eclipse Plus - , 3.5 ?m, 4.6 mm x 75 mm 苯基己基柱 959946-912 ZORBAX Eclipse Plus - , 5 ?m, 4.6 mm x 50 mm 苯基己基柱 959943-912 ZORBAX Eclipse Plus - , 3.5 ?m, 4.6 mm x 50 mm 苯基己基柱 959941-912 ZORBAX Eclipse Plus - , 1.8 ?m, 4.6 mm x 50 mm 苯基己基柱 959936-912 ZORBAX Eclipse Plus - , 3.5 ?m, 4.6 mm x 30 mm 苯基己基柱 959931-912 ZORBAX Eclipse Plus - , 1.8 ?m, 4.6 mm x 30 mm 苯基己基柱 959993-312 ZORBAX Eclipse Plus - , 5 ?m, 3.0 mm x 150 mm 苯基己基柱 959963-312 ZORBAX Eclipse Plus - , 3.5 ?m, 3.0 mm x 150 mm 苯基己基柱 959961-312 ZORBAX Eclipse Plus - , 3.5 ?m, 3.0 mm x 100 mm 苯基己基柱 959964-312 ZORBAX Eclipse Plus - , 1.8 ?m, 3.0 mm x 100 mm 苯基己基柱 959941-312 ZORBAX Eclipse Plus - , 1.8 ?m, 3.0 mm x 50 mm 苯基己基柱 959701-912 ZORBAX Eclipse Plus - , 5 ?m, 2.1 mm x 150 mm 959763-912 ZORBAX Eclipse Plus苯基-己基柱, 3.5 ?m, 2.1 mm x 150 mm 苯基己基柱 959793-912 ZORBAX Eclipse Plus - , 3.5 ?m, 2.1 mm x 100 mm 苯基己基柱 959764-912 ZORBAX Eclipse Plus - , 1.8 ?m, 2.1 mm x 100 mm 苯基己基柱 959746-912 ZORBAX Eclipse Plus - , 5 ?m, 2.1 mm x 50 mm 苯基己基柱 959743-912 ZORBAX Eclipse Plus - , 3.5 ?m, 2.1 mm x 50 mm 苯基己基柱 959741-912 ZORBAX Eclipse Plus - , 1.8 ?m, 2.1 mm x 50 mm 苯基己基柱 959733-912 ZORBAX Eclipse Plus - , 3.5 ?m, 2.1 mm x 30 mm 苯基己基柱 959731-912 ZORBAX Eclipse Plus - , 1.8 ?m, 2.1 mm x 30 mm 苯基己基保护柱 个一包 820950-938 ZORBAX Eclipse Plus - , 5 ?m, 4.6 mm x 12.5 mm 4 苯基己基保护柱 个一包 821125-938 ZORBAX Eclipse Plus - , 5 ?m, 2.1 mm x 12. 5 mm 4 5