高效液相色谱法测定丹芪降糖胶囊中丹参酮_A的含量

2008年 第9卷 第1期 丹芪降糖胶囊是由黄芪、丹参、生地黄、桑叶、麦冬 等12味中药经过粉碎、提取、精制等工艺加工而成的硬 胶囊剂,多年临床实践证明有调补气血,益气养阴,健脾 补肾的作用。用于糖尿病引起的倦怠乏力、心悸气短、头 晕耳鸣、自汗盗汗、心烦失眠、口渴喜饮、胸腹胀满、纳呆 便溏、肢体麻痛等疗效确切。方中丹参含丹参酮Ⅰ、丹参 酮ⅡA、丹参酮ⅡB、隐丹参酮、丹参素、原儿茶酸以及丹 参酚酸A等成分[1]。为控制本品质量,我们研究了丹参 中有效成分之一丹参酮ⅡA含量的测定 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 ,现报道如 下。 1 实验材料 1.1 实验仪器 Waters(美国)高效液相色谱仪,色谱柱为 Symmetry C18柱(4.6mm×150mm);515泵;2996紫外检测器。 1.2 药品与试剂 丹参酮ⅡA对照品(批号:0810-200004)购自中国 药品生物制品检定所;丹芪降糖胶囊制剂由山西省闻喜 县红十字会心脑血管病专科医院委托运城市安国中医 结核病医院制剂室配制,许可证号:晋Z20050039;流动 相所用甲醇为色谱纯,水为双蒸水,其他试剂均为分析 纯。 2 方法与结果 2.1 色谱条件 固定相:C18色谱柱(4.6mm×150mm);流动相:甲 醇-水(80∶20),流速:1mL/min;柱温:室温;检测波 长:270nm。在此条件下丹参酮ⅡA与样品中其他组分 能基线分离,丹参酮ⅡA与其相邻色谱分离度大于 1.5。 按丹参酮ⅡA峰计算,理论塔板数为 2000以上。阴性 对照无干扰。结果见图1～图4。 2.2 溶液的制备 2.2.1 供试品溶液的制备 精密称取本品2g,置烧瓶 中,加入甲醇 50mL,密塞,称定重量,加热回流 1h,放 冷,密塞,称定重量,用甲醇补足减失的重量,摇匀,滤过, 取滤液,即得。 2.2.2 对照品溶液的制备 精密称取丹参酮ⅡA对照品 10mg,置50mL棕色量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀;精密 量取 2mL,置 25mL棕色量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀, 即得(每1mL中含丹参酮ⅡA16μg)。 2.3 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 曲线的制备 精密称取丹参酮ⅡA对照品10mg,置50mL棕色量 [作者简介]张广萍,女,实验师,从事中药研究 [收稿日期]2007-10-16 高效液相色谱法测定丹芪降糖胶囊中丹参酮ⅡA的含量 张广萍,何刘平,何宝平,冀小君 (山西省生物应用职业技术学院,山西 太原030031) 摘要 目的:建立高效液相色谱法测定丹芪降糖胶囊中丹参酮ⅡA含量的方法。方法:采用 SymmetryC18色谱柱 (4.6mm×250mm),以甲醇-水(80∶20)为流动相,流速为1mL/min,检测波长270nm。结果:丹参酮ⅡA的线性 范围为0.064mg～0.320mg,(r=0.9998),平均回收率为99.4%(RSD=2.58%)。结论:本方法简便、准确,可作为丹芪降 糖胶囊的质量控制依据。 关键词 丹芪降糖胶囊;高效液相色谱法;丹参酮ⅡA 中图分类号:R286 文献标识码:A 文章编号:1671-0258(2008)01-0047-02 DeterminationofTanshinoneⅡAinDanqiJiangtangCapsulebyHPLC ZhangGuangping,HeLiuping,HeBaoping,JiXiaojun (ShanxiBiologicalApplicationVocationalTechnicalCollege,TaiyuanShanxi030031) Abstract Objective:ToestablishamethodfordeterminingthecontentoftanshinoneⅡAinDanqiJiangtangcapsuleby HPLC.Method:HPLCwasperformedonSymmetryC18(4.6mm×250mm)columnwithmethanol-water(80∶20)asmo- bilephaseatflowrateof1mL/min.Thedetectionwavelengthwas270nm.Results:ThelinerrangeoftanshinoneⅡAwas 0.064mg～0.320mg(r=0.9998),theaveragerecoveryratewas99.4%andRSDwas2.58%.Conclusion:Themethodis simple,sensitiveandcanbeusedfortheanalysisoftanshinoneⅡAinDanqiJiangtangcapsule. Keywords DanqiJiangtangcapsule,TLC,tanshinoneⅡA 中药制剂工程与技术 47 2008Vol.9No.1 图1丹参酮ⅡA对照品的光谱图 图2丹参酮ⅡA对照品的色谱图 图3供试品溶液色谱图 图4阴性对照溶液色谱图 瓶中,加甲醇至刻度,摇匀;精密量取 4mL,置 25mL棕 色量瓶中,加甲醇至刻度,摇匀,即得(每1mL中含丹参 酮ⅡA32μg);同法制成不同浓度的对照品溶液。精密吸 取不同浓度丹参酮ⅡA对照品溶液(6.4μg/mL、12.8μg/ mL、19.2μg/mL、25.6μg/mL、32μg/mL)各10μL分别进 样,测定峰面积积分值。结果见图5。 图5丹参酮ⅡA的标准曲线图 2.4 精密度试验 精密吸取丹参酮ⅡA对照品溶液(12.8μg/mL)10μL, 分别进样 5次,测定峰面积积分值,其峰面积分别为 1046237、1049356、1051187、1052087、1044403, 平均峰面积为1048654;平均加样回收率为0.31%。 2.5 稳定性试验 取供试品溶液(批号∶051211)在 0h、2h、4h、8h、 12h分别进样 10μL,测得样品中丹参酮ⅡA峰面积积 分值,分别为 1317569、1322453、1298635、1356894、 1396780,平均峰面积为1338466,平均加样回收率为 2.90%。试验结果 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明,供试品溶液在 12h内稳定性良 好。 2.6 重复性试验 按拟定的含量测定方法,对同一批样品 (批号: 051211)分别制备 5份供试品溶液,精密吸取 10μL,进 样,测定峰面积积分值并计算含量,RSD=3.31%。结果见 表1。 5 试样号 1 2.1243 样重(g) 1.9733 峰面积(A) 1381243 1623066 2 1.9891 1421717 3 2.0222 1475280 4 2.0766 1514967 含量(mg/粒) 0.142 0.155 0.145 0.148 0.148 含量均值(mg/粒) 0.148 RSD(%) 3.31 表1 样品重复性试验结果 2.7 回收率试验 采用加样回收法试验,精密称取已知含量的样品 (批号:051211)6份,分别精密添加丹参酮ⅡA对照品溶 液(0.5mg/mL),按样品测定项下操作,结果见表2。 回收率=丹参酮ⅡA总量-样品中丹参酮ⅡA含量 加入丹参酮ⅡA含量 ×100% 6 编号 1 1.2801 取样量 (g) 1.0456 样品中含 量(mg) 0.4684 0.5735 2 0.9693 0.4342 5 1.1796 0.5285 加入量 (mg) 0.5 0.5 0.5 0.5 测得量 (mg) 0.9787 0.9436 1.0105 1.0603 回收率 (%) 102.05 101.78 96.40 97.36 平均回收 率(%) RSD(%) 3 1.0694 0.4791 0.5 0.9667 97.51 99.40 2.58 4 0.9708 0.4349 0.5 0.9413 101.28 表2 回收率试验结果 2.6 样品含量测定 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各 10μL, 注入液相色谱仪测定,即得。3批样品测定结果见表3。 051211 批号 051208 0.132 丹参酮IIA含量(mg/粒) 0.147 均值(mg/粒) 051208 0.149 051210 0.162 0.147 051210 0.149 051211 0.145 表3 样品中丹参酮IIA含量测定结果 根据 3批样品含量测定结果,规定本品每粒(每粒 装 0.33g)含丹参以丹参酮ⅡA计(C19H18O3)不得少于 0.115mg。 3 讨 论 单味药及复方中丹参酮ⅡA的含量测定方法已有 报道 [2],本文参考文献方法,根据样品实际情况,首次报 道了丹芪降糖胶囊中丹参酮ⅡA的含量测定方法。本文 采用的样品前处理及高效液相色谱测定法,经考察,方 法简便易行,准确可靠,为本品的质量控制提供了依据。 参考文献 [1]康廷国.中药鉴定学[M].北京:中国中医药出版社,2003:128. [2]国家药典委员会.中华人民共和国药典[M].北京:化学工业出版 社,2005:52. 中药制剂工程与技术 48