AB液法检测粪便隐血试验分析

AB液法检测粪便隐血试验 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 AB液法检测粪便隐血试验分析 检验医学与临床2010年7月第7卷第14期LabMedC— li—n,::!!: AB液法检测粪便隐血试验分析 陈世凤(广西壮族自治区北海市卫生学校附属医院检验科536100) 【关键词】粪便;潜血;指示剂和试剂;AB液法;甲苯胺法 DIO:10.3969/j.issn.1672—9455.2010.14.073 中图分类号:R446.133文献标志码:B文章编号:1672—9455(2010)14—153l一02 粪便隐血试验是临床上诊断消化道出血的一项重要指标, 是普查筛选消化道肿瘤的有效手段,尤其对中老年人早期发现 消化道恶性肿瘤有重要价值.其检验方法主要分为化学方法 和免疫学方法两大类.多年以来,临床上隐血试验一直是以联 苯胺,邻甲苯胺,愈创木脂法,还原酚酞法,匹拉米洞法,无色孔 雀绿法等还原性物质为主体的化学试验.邻甲苯胺法为1983 年中华医学会全国l临床检验方法学术讨论会推荐方法,但易出 现假阳性结果.作者在临床实际工作中利用乙肝两对半酶联 免疫吸附试验(EI1SA)试剂盒显色剂A,B液来检测粪便隐血 (简称"AB"液法).通过近1年的试验,认为该法具有快速简 便,精确灵敏,经济实用的特点.本文采用AB液法及邻甲苯 胺法对临床200例患者进行对比试验,并用免疫胶体金法确 证,现将结果报道如下. 1材料与方法 1.1材料 1.1.1AB液试剂英科新创产品,批号20080310. 1.1.2邻甲苯胺法按《全国临床检验 操作规程 操作规程下载怎么下载操作规程眼科护理技术滚筒筛操作规程中医护理技术操作规程 》(第3版)_】 配制试剂.1o邻甲苯胺溶液:取邻甲苯胺1g溶于冰醋酸及 无水乙醇50ml的混合液中,置棕色瓶保存于4.C冰箱,若变 为暗色,应重新配制.3过氧化氢. 1.1.3免疫胶体金法试剂盒北京万华普曼生物技术有限公 司生产的便潜血一步法检测试纸(FOB),批号801l5021. 1.2方法 1.2.1AB液法(1)试验原理:四甲基联苯胺(TMB)是一种 优于邻苯二胺(OPD)的新型辣根过氧化物酶(HRP)色原底 物,其氧化产物联苯醌在450nm处有最大消光系数,由于其高 检测灵敏性及无致癌作用,现国内EIISA试剂盒已基本上采 用TMB取代OPD作为HRP最常用的色原底物,乙肝ElISA 试剂盒中的显色剂"A"是3%过氧化氢,尿素B液的主要成分 是0.5g/1TMB,粪便血红蛋白中的亚铁血红素有类似过氧 化物酶特性,能催化过氧化氢放出新生态氧与色原性底物 TMB结合生成联苯醌而呈现蓝色,且呈色稳定不用避光.(2) 操作方法:用白色棉拭子挑取少量粪便或涂于白色背景的玻片 上,加底物"A"1,2滴,再滴"B"1,2滴,混匀后立即观察结 果.(3)结果判断:?(一) 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 示加入AB液2min后不显色;? (+)表示加入AB液1Os后呈浅蓝色;?(4-4-)表示加入AB 液后立即呈现浅蓝色逐渐呈明显蓝色;?(4-4-4-)表示加人 AB液后立即呈深蓝色;?(4-4-4-4-)表示加入AB液后立即 呈现蓝褐色. 1.2.2邻甲苯胺法严格按《全国临床检验操作规程》操 作[. 1.3标本来源200例均来自本院门诊及住院患者需做隐血 试验的粪便 样本 保单样本pdf木马病毒样本下载上虞风机样本下载直线导轨样本下载电脑病毒样本下载 . 2结果 2.1敏感性对比试验用AB液法及邻甲苯胺法同时分别检 测粪便隐血样本,再用免疫胶体金法确证,结果见表1. 表1AB液法与邻甲苯胺法检测粪便隐血结果 2.2灵敏度试验取健康人粪便2g加入刻度离心管中,加 入蒸馏水至5mI刻度并调成糊状,现加入纯化的血红蛋白质 控品(浓度为100g/i),取1OI其中血红蛋白含量为200g/ mI,然后再吸出含血红蛋白粪便混合物用蒸馏水稀释成血红 蛋白100,5O,25,12.5,6.25,3.13,1.56,0.78,0.39,0.20g/ mI的系列混合物用AB液法测定血红蛋白含量.结果除 0.39,0.20g/mI粪便含量的混合物血红蛋白阴性外,其他混 合物均为阳性. 3讨论 3.1粪便隐血试验是粪便常规检验项目之一,也是急诊检测 项目,对于消化道出血及消化道肿瘤的诊断与鉴别诊断有重要 参考价值.传统的联苯胺法因有致癌作用已被淘汰,近来新建 立的免疫学方法——免疫胶体金法特异性强,灵敏度高,但试 剂价格较贵,是化学方法试剂的10430倍,本文使用的AB液 法试剂取自乙肝两对半EIISA试剂盒中剩余显色剂A,B液, 无需再增加成本,无需配制,直接使用,且显色稳定,易于观察 结果. 3.2本文灵敏度试验结果显示,AB液法可检出粪便含量为 0.78~g/mL的血红蛋白,其结果与文献[2]报道的邻甲苯胺灵 敏度一致(0.2,1~g/mL). 3.3AB液法与邻甲苯胺法同时测定200例粪便隐血,结果显 示两法均为阳性109例,两法均为阴性84例,AB液法阳性,邻 甲苯胺法阴性6例,邻甲苯胺法阳性,AB液法阴性1例,经统 计学处理,两法检出率差异无统计学意义(P>O.05). 3.4传统的邻甲苯胺法,匹拉米洞法等化学法常使用3过 氧化氢溶液,容易失效,保质期短,而AB液法试剂中A液是含 3过氧化氢一尿素溶液,用过氧化氢一尿素代替过氧化氢不易 失效,保存期可达半年以上,且试剂B液是含TMB,无致癌 作用. 3.5在日常检验中,乙肝两对半ElISA试剂盒中的显色剂 A,B液总有剩余,通常弃之,如果采用AB液来做隐血试验,则 充分利用资源,变废为宝,节省成本,增加效益.AB液法经济 堕堕堂与l堕床2010年7月第7卷第14期LabMedClin,July2010,Vo1.7,No.14 实用,操作简单,灵敏度高,特异性较强,检测快速,显色稳定, 结果易于判断,试剂稳定易保存,不失为一种临床上实用的粪[2] 便隐血试验试剂. 参考文献 [1]叶应妩,王毓三.全国临床检验操作规程EM].南京:东南 骨髓细胞形态学检查的质量控制 大学出版社,1997:142—143. 熊立凡.临床检验基础[M].北京:人民卫生出版社, 2005:243—246. (收稿日期:2010—01-30) 陈海斌,潘志远,洪国平.(广西壮族自治区梧t,11市人民医院:1.检验科;2.血液内科 543000) 【关键词】骨髓细胞/细胞学;骨髓检查;质量控制 DIO:10.3969/j.issn.1672—9455.2010.14.074 中图分类号:R329.24;R446.?3文献标志码:B文章编号:1672—9455(2010)14— 1532—02 骨髓细胞形态学检查是检验医学中灵活性,难度均较大的 特殊性检验,是血液病及临床疑难病患者的重要检查项目之 一 ,对确诊血液病及判断疗效,预后和骨髓移植造血功能的恢 复具有重要意义.从骨髓采取部位的选择,抽取过程,制作涂 片,瑞氏染色,特殊化学染色,阅片,会诊,资料保存等各个环节 都十分关键,影响每一个操作步骤的因素都会对最终的诊断报 告产生影响.因此,做好骨髓细胞学检查的分析前,中,后各个 环节的质量控制十分重要. 1分析前质量控制 1.1专业人员的配置由于阅片人员对细胞形态学的认知带 有一定的经验性和主观性,同一个细胞或同一份标本由多人或 多个实验室检验,可有多种报告结果的现象屡屡可见.根据卫 生部临床检验中心2000年第2次和第3次全国医院细胞形态 学室间质量评价反馈,回报结果的平均符合率为6O.因 此,从事骨髓细胞形态学检验的人员必须经过定向和专业培训 方可上岗. 检验申请单血细胞形态学检验与临床医学密 1.2正确开出 不可分,诊断疾病有的依赖形态学,有的因形态学缺乏特征性 则以临床为主.因此,临床医生开出的检验申请单中应包括足 够的信息,如姓名,性别,年龄,床号,住院号;可能干扰实验检 查或检验结果的服药史;主要症状和阳性体征或特殊的病理变 化;一般的血液学检查结果;与检验有关的流行病史等患者的 相关临床资料.通过分析临床资料可以找出问题所在或明确 检验的目的,使阅片人员做到心中有数.例如年龄小于35岁 的血清球蛋白增高和(或)骨痛者患多发性骨髓瘤的概率几乎 为零. 1.3正确的患者准备骨髓穿刺术成功与否除与手术医生的 临床经验有关外,还与患者的配合程度密切相关.有研究表 明,系统化口头教育和发放健康教育手册能有效降低患者坩髓 穿刺术前的紧张恐惧程度,并能有效降低骨髓穿刺过程中的疼 痛程度,使患者能更有效地配合医生进行骨髓穿刺,提高成功 率. 1.4骨髓液采集过程 1.4.1穿刺部位的选择由于髂后上棘骨皮质较薄,骨髓腔 大,骨髓液较丰富,容易刺人,尤其适于骨髓细菌培养等取材较 多时使用,为最佳取材部位;髂前上棘骨质较硬,穿刺时稍费 力,为次选取材部位;胸骨穿刺有一定的危险性,特别对经验不 足者,临床上已较少应用,但该部位骨髓细胞增生旺盛,骨髓液 较丰富,适用于早期白血病,或其他部位多次穿刺抽取不能成 功者. 1.4.2载玻片的要求载玻片的厚薄,清洁光滑和陈旧程度 都会影响检查结果,推荐使用1.O,l_2mm厚度,25.4mm× 76.2mm长度的载玻片.新玻片表面有游离碱,必须用1 mol/IHCI浸泡24h后再用清水彻底清洗,干燥后备用.旧 玻片用含氯消毒剂浸泡24h后加入合成洗涤剂煮沸20min, ,必要时可将 再用热水将血膜洗去,用清水冲洗干净,干燥备用 其用95乙醇浸泡1h,脱净载玻片油脂,用蒸馏水洗净后,干 燥备用. 1.4.3对推片的要求主要是与载玻片接触的面要整齐,平 滑则可,推荐使用专用的推片.每次使用时,必须清洁推片,以 免推片沾有他人的成分而污染本次标本,在推血片后,再推骨 髓片时,也必须清洁,反之亦然. 1.4.4抽吸骨髓量的要求最佳量为0.2t0.5mL,骨髓抽吸 过多可造成人为骨髓稀释,大大影响对骨髓正确结论的判断. 1.4.5髓涂片的要求一张良好的骨髓涂片,要求厚薄适宜, 头,体,尾分明,边缘整齐,细胞分布均匀,髓膜长度占载玻片的 2/3左右;推片厚度应适当参考外周血计数,如白细胞计数升 高明显和外周血分类出现幼稚细胞者,应适当推薄片.而三系 减少患者应当适当推厚片.每一受检病例最好能在20S内完 成6,1O张骨髓涂片,如动作迟缓,即使骨髓抽吸成功,也会因 骨髓凝固而失败. 1.5骨髓涂片的运输要求 1.5.1涂片制作完成后,可以用手拿玻片在空气中轻轻挥动 使其自然干燥,特别是在南方地区湿度很大的季节,骨髓涂片 长时间暴露在湿气中可以使红细胞形态等产生变异而影响结 果判断. 1.5.2送检时涂片要避免重叠堆放,如再生障碍性贫血患者 的骨髓涂片脂肪小滴十分丰富,重叠堆放会使脂肪或骨髓小粒 黏附在别的玻片上.从而影响对涂片中脂肪所占面积或造血岛 中造血细胞的评估. 1.5.3盛放骨髓涂片的器具必须注明能够表明该患者的惟一 标识,如姓名,床号,住院号等连同申请单一起送检,避免张冠 李戴. 2分析中质量控制 ,登记和编号实验室收到每例骨髓标本均应 2.1标本接收 认真核对,然后贴上标签,写上患者的姓名和编号,同时有外周 血涂片者应分别注明骨髓片的缩写"BM"和血片的缩写"PB". 2.2染色