甲状腺片诱导的甲亢阴虚证大鼠模型的制备

尔药的清除轻自由基及抗 DNA氧化损伤的保护作用 研究 1中草药, 2001, 32( 3): 236-2381 [ 8] 王晓雯,蒋晓燕, 邬梨娅# 伊明,等 1肉苁蓉总甙体外清 除自由基对# OH引起 DNA的氧化损伤保护 1中国药 学杂志, 2001, 36( l): 29-331 [ 9] 廖力夫, 何玉媛,袁亚莉,等 1可见分光光度法检测 Fen- ton反应中的羟自由基 1衡阳医学院学报, 1996; 24( 2): 130-1341 [ 10] 邹国林, 桂兴芬,钟晓凌, 等 1 一种 SOD的测活方法 1 生物化学与生物物理进展, 1986, 13( 4) : 71-731 [ 11] Beaucham p C, F r idov ich Irw in1 Superox-i de dism utase: im- proved assays and an assay app licab le to acrylam ide ge ls1Ana l B iochem, 1971, 44: 276-2871 [ 12] 王爱国,罗广华 1羟自由基启动下的脱氧核糖降解及 其产物的 TBA反应 1 生物化学与生物物理进展, 1993, 20( 2): 150-1521 [ 13] 贾之慎,杨贤强 1茶多酚清除活性氧自由基的分光光 度法研究 1茶叶, 1993, 19( l): 25-271 [ 14] Dav is conferences1 Oxygen radical and hum an disease1 Ann Intmed, 1987, 107-5261 [ 15] Cutter idgem C1Tbinbarb iru ac id-reactiv ity fo llow ing iron- depenent free- radica l dam age to am ino acids and carbohy- dra tes1FEBS Letters, 1961, 128: 343-3481 [ 16] 魏朝良, 于德红,安利佳 1黄酮类化合物及清除自由基 机制的探讨 ,中成药, 2005, 27( 2): 239-2411 ( 2007- 11- 01收稿 ) 作者简介:刘婷,女,在读硕士,研究方向:新药研究与开发; Te:l 020-62787236。 * 通讯作者:侯连兵,教授,博士研究生导师,研究方向:新药研究与开发; T e:l 020-61642175。 甲状腺片诱导的甲亢阴虚证大鼠模型的制备 刘 婷,侯连兵* ,侯毅成 (南方医科大学南方医院药学部,广东广州 510515) 摘要 目的: 建立甲亢阴虚证大鼠模型。方法: 取 SD大鼠雌雄,分别随机分为 4组, 共 8组, 每组 6只, 分别为 空白对照组、甲状腺片生理盐水混悬液低、中、高剂量组。空白对照组灌胃给予等体积的生理盐水, 各给药组组分 别给予浓度为 215、5、10 m g /kg的甲状腺片生理盐水混悬液, 1次 / d, 连续给药 30 d。结果:给药组与空白对照组比 较, 除高剂量组雌性大鼠血清 T3、T 4、FT 3、FT4值显著升高 ( P< 01 01), 血清 TSH值显著降低 ( P< 01 05)外, 其余组 均无显著性差异 ( P﹥ 01 05)。 说明 关于失联党员情况说明岗位说明总经理岗位说明书会计岗位说明书行政主管岗位说明书 高剂量组雌性大鼠造模成功。结论 :灌服甲状腺片混悬液 10 m g /kg,连续给药 30 d的雌性大鼠甲亢阴虚证大鼠模型制备成功。 关键词 甲亢; 阴虚证;动物模型 中图分类号: R28515 文献标识码: A 文章编号: 1001-4454( 2008) 09-1402-03 Thyroid-induced H yperthyroid ism Yin-deficiencyM odel of Rats L IU T ing, HOU L ian-b ing, HOU Y -i cheng ( Departm ent of Pharm aceutica,l NanfangH ospita,l Southe rn M ed ica lUn iversity, Guangzhou 510515, Ch ina) Abstrac t Objective: To establish a rat model of hyperthy ro id ism Y in-de fic iency1M ethods: SD rats separate m ale and fem a le w ere random ly div ided into four g roups, a to tal o f eigh t g roups, each w ith six1 The first group for the contro l g roup, 2 to 4 for the ex- perim enta l drug- trea ted group, inc lud ing thy ro id- low, m edium and h igh-dose group1 In addition to the first group lavage vo lum e o f sa- line, the other g roups w ere g iven the concentration of 215, 5, 10m g /kg-saline suspension of the thyro id1Once a day, 30 days for deliv- e ry1Resu lts: Compared w ith the contro l g roup, w ith the exception of G roup 4 fem a le ra ts se rum T3, T4, FT 3, FT4 va luesw ere sign if-i cantly h ighe r ( P < 01 01), serum TSH was sign ificantly lowe r ( P < 01 05), the other treatm ent groups had d ifferent values no sign if-i cant difference ( P> 0105)1G roup 4 that fem a le rats m ode ling w as success1Conc lusion: Adm in istra tion o f thy ro id-Suspension 10 m g / kg fo r 30 d, fem ale rats hyperthyro id ism Y in-de fic iency ra tm ode l is success1 K ey words H ype rthyro idism; Y in-defic iency; Anim a lm ode l 甲亢是一种常见的多基因遗传自身免疫紊乱性 疾病, 女性高发, 其发病机制尚未明确。制备甲亢阴 虚动物模型对甲亢发病机制的研究及药效学方面均 有重要意义。本研究通过甲状腺片的诱导, 成功制 备具有人类甲亢主要特征的动物模型, 现报道如下。 1 实验材料 111 实验动物 60 d龄 SD大鼠 48只, 体重 180 ~ 220 g, 雌雄各半, 由南方医科大学实验动物中心 #1402# Journa l o f Ch ineseM ed icina lM a teria ls 第 31卷第 9期 2008年 9月 提供 (动物合格证号: 20060015)。 112 实验药品 甲状腺片, 40mg /片, 上海实业联 合集团长城药业有限公司,批号: 20061001。 113 主要试剂 T3、T4、FT3、FT4放射免疫试剂盒, 北京原子高科核技术应用股份有限公司; T3、T4批 号: 1601-0510; FT3、FT4批号: 200710。TSH 免疫放 射试剂盒,北京原子高科核技术应用股份有限公司, 批号: IMK-832。水合氯醛, 南方医院自制溶液, 批 号 20071226。 114 主要仪器 低速离心机, LD4-2型, 北京医用 离心机厂生产;上皿电子天平, JY6001型,上海天平 仪器总厂生产; 放射免疫 r-计数器, SN-682型, 上海 核福光电仪器有限公司生产;低温常速离心机, DL- 45RC-L型, 上海中科生物医学高科技开发有限公司 生产; 电热恒温水箱, BHW-IV型, 北京市医疗设备 厂生产。 2 方法 211 实验环境 实验前动物适应性喂养一周,室 温 18~ 22e , 相对湿度 50% ~ 70%, 动物室保持清 洁通风。 212 实验方法 取 SD大鼠 48只,雌雄各半,禁食 不禁水 12 h,按空腹体重计算给药量,将雌雄分别随 机分为 4组,每组 6只,第 1组为空白对照组, 第 2~ 4组为实验给药组。除第 1组给予等体积的生理盐 水外, 其它各组分别灌胃的浓度为 215、5、10 mg /kg 的甲状腺片生理盐水混悬液, 1次 /d,共 30 d。 213 观察指标 于灌胃第 31 d观察造模后大鼠 的外观、行为, 测量体重、体温。用放射免疫法测定 血清 T3、T4、FT3、FT4含量,用免疫放射法测定血清 TSH含量。将大鼠全部处死,并分离大鼠甲状腺、肾 上腺、脾脏进行观察与称重。 214 标本采集 于大鼠清醒状态下测量大鼠体重 和肛温。腹腔注射水合氯醛 014 mg /kg麻醉, 经腹 主动脉采血 5m ,l 1500 r /m in离心 10 m in, 将分离的 血清置于 - 20e 冰箱保存, 待测 T3、T4、FT3、FT 4、 TSH。分离大鼠的甲状腺、肾上腺和脾脏, 进行称 量。 215 统计学处理 应用 SPSS 1115版本, 对数据 进行统计学分析处理,所有数据采用 €x ? s 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 示, 运 用独立 t检验。 3 结果 311 实验组大鼠血清 T3、T4、FT3、FT4、TSH含量与 空白对照组的比较 仅第 4组雌性大鼠血清 T 3、 T4、FT3、FT4值显著升高 ( P< 0101)且血清 TSH 值 显著降低 ( P < 0105) (表 1、2) ,表明仅第 4组雌性 大鼠实验性甲亢阴虚模型造模成功。 312 实验组大鼠体重与空白对照组的比较 给药 后与空白对照组同性别比较, 第 2组雌性和雄性大 鼠的体重均无显著差异 ( P> 0105) ,第 3、4组雌性 大鼠的体重显著减轻 ( P< 0101) ,第 3、4组雄性大 鼠的体重亦显著减轻 ( P< 0105)。 313 实验组大鼠肛温与空白对照组的比较 给药 后与空白对照组同性别比较, 第 2组雌雄大鼠的肛 温均无显著性差异 ( P> 0105) ,第 3、4组雌雄大鼠 的肛温均降低 ( P< 0105)。 314 实验组大鼠外观行为与空白对照组的比较 实验组大鼠在 15d内情绪无明显变化, 摄食、饮水、 活动情况、毛色光泽均未见异常; 雌性大鼠从实验第 16 d开始, 雄性大鼠从实验第 21 d开始,陆续出现 阴虚症状,如体重下降、体温升高、烦躁不安、活动频 表 1 实验组雌雄大鼠血清 T 3 、T 4 、TSH测定值 (…x ? s, n= 6 ) 组别 剂量 ( mg / kg) T 3 ( nmo l/L ) 雌性 雄性 T 4 ( nmo l/L) 雌性 雄性 TSH ( nmo l/L ) 雌性 雄性 生理盐水组 - 0143 ? 01 17 0134 ? 01 20 44128? 17186 361 94 ? 23111 01 48 ? 0135 0120 ? 01 13 甲状腺片低剂量组 215 0165 ? 01 21 0124 ? 01 12 55183? 19166 461 43 ? 32101 01 25 ? 0108 0119 ? 01 07 甲状腺片中剂量组 5 0179 ? 01 30* 0152 ? 01 20 61186? 17184 571 25 ? 13132 01 21 ? 0107 0117 ? 01 10 甲状腺片高剂量组 10 0199 ? 01 16* * 0159 ? 01 95* * 65133? 71 93* * 651 68 ? 9142* * 01 06 ? 0103* 0108 ? 01 03 注: 同性别与空白对照组比较, * P< 0105, * * P< 0101。下表同 表 2 实验组雌雄大鼠血清 FT 3 、FT 4 值测定 (…x ? s, n= 6 ) 组别 剂量 ( mg /kg) FT 3 ( nm o l/L ) 雌性 雄性 FT 4 ( nmo l/L ) 雌性 雄性 生理盐水组 - 2132 ? 01 45 0195 ? 01 27 7173 ? 2144 5139 ? 31 07 甲状腺片低剂量组 215 3152 ? 01 69* 1148 ? 01 48* 111 62 ? 7103 6180 ? 51 81 甲状腺片中剂量组 5 4131 ? 11 36* 1183 ? 01 37* * 151 50 ? 4108* 6189 ? 21 61 甲状腺片高剂量组 10 5117 ? 01 89* * 2102 ? 01 35* * 231 79 ? 131 70* * 11186? 31 10* * #1403#Journa l o f Ch ineseM ed icina lM a teria ls 第 31卷第 9期 2008年 9月 繁、多动好斗,饮水量多,脱毛、增长缓慢, 大便干燥、 活动增加,微循环发生变化, 各类血管清晰、管径变 大,无明显渗出、出血瘀血等。至实验结束时, 多数 有震颤现象,全部明显消瘦、毛无光泽。 315 实验组大鼠甲状腺、肾上腺、脾脏重量与正常 对照组的比较 给药后与空白对照组同性别比较, 第 2、3、4组雌雄大鼠的甲状腺的重量均显著增加 (第 3、4组 P< 0105,第 2组 P< 0101) ;第 2组雌性 大鼠肾上腺重量显著增加 ( P < 0101 ); 第 2组雌性 大鼠和第 4组雄性大鼠的脾脏重量有差异性 ( P< 0105)。 4 讨论 随着中医动物模型研究的不断深入, 其技术也 日趋成熟, 使其从前沿走向常规, 从尝试其走向实 用。造模技术的发展与成熟对动物实验学及中药的 药效与毒理研究均有直接影响。甲亢大多会出现阴 虚火旺证型,采用甲状腺片造模的优点在于实施方 便、经济,可以模拟甲亢的临床症候。 本研究通过灌服甲状腺片混悬液的方法进行造 模后,与空白对照组比较,第 4组即甲状腺片高剂量 组雌性大鼠的血清 T3、T4、FT3、FT4值显著升高 ( P< 0101) ,血清 TSH值显著降低 ( P< 0105) ,体重下降、 体温升高,并出现一系列阴虚症状。说明雌性大鼠 灌服甲状腺片混悬液 10 mg /kg, 连续给药 30 d可成 功制备甲亢阴虚动物模型, 符合甲亢阴虚大鼠模型 的实验要求。同等条件下, 雄性大鼠造模不完全成 功, 可能和自身的甲状腺激素分泌水平有关。 本实验是通过单纯甲状腺素造模实现的, 满足 了实验希望条件控制单一的目的, 同时具有方法简 单、成功率高、死亡率低、稳定性强等优点。但同时 亦有不足之处: ¹ 中医证候模型的制备方法和 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 难以统一,至今甲亢阴虚症大鼠模型的制备仍未有 一个中医证候标准; º 研究工作中所采用的外源性 用药造成动物体内甲状腺激素水平增高所引起的类 似人类甲亢状态, 毕竟与人类本身存在差异。由于 二者发病机制不同,从而在一定程度上影响了中药 药理作用机制的进一步揭示; » 甲亢的发病应具有 自身免疫性疾病的特点, 在动物模型的制备过程中 如能建立自身免疫性甲状腺疾病的模型,则研究结 果更具代表性。但因实验条件等原因,希望在今后 进一步的实验研究中加以完善。 参 考 文 献 [ 1] 陈小野 1实用中医证候动物模型学 1第 1版 1北京: 北 京医科大学、中国协和医科大学联合出版社, 1993: 117- 1181 [ 2] 付晓伶, 方肇勤 1阴虚证动物模型的造模方法及评析 1 上海中医药大学学报, 2004: 18( 2) : 51-541 [ 3] 徐叔云 1药理实验方法学 1第 3版 1北京:人民卫生出 版社, 2000: 1512-15151 ( 2007- 11- 22收稿 ) 5中药材 6杂志来稿要求 1 来稿以科研 论文 政研论文下载论文大学下载论文大学下载关于长拳的论文浙大论文封面下载 、经验 总结 初级经济法重点总结下载党员个人总结TXt高中句型全总结.doc高中句型全总结.doc理论力学知识点总结pdf 、简报、译文等形式均可。科研论文及经验总结必须观点明确, 有分析,有结论, 避免材料堆积 罗列, 字数一般在 4000字以内 (包括图表 )。简报及会议消息,字数一般在 1000字以内。译文可节译或全译, 要求鄱译准确, 文字流畅。 2 凡 2000字以上的文章 ,请作者写好 200字左右的摘要,放在正文之前。研究论文, 请附上英文标题、英文摘要及关键词 (一般 3~ 5个 )。 3 稿件力求语句通顺,简明精炼,用 A4纸打印清楚; 外文用印刷体书写或打字; 表格要简炼, 两端开口, 不用纵线, 栏头左上 角不用斜线, 除栏头外,表身中不用或少用横线;插图用绘画纸黑墨水笔正确绘制, 要求黑白分明, 图注文字用铅笔标明。照 片要清晰, 尽可能附上底片。编号写成 /图 10, /表 10字样。 4 计量单位 ,应按国际统一计量单位和符号书写, 如: m, cm, mm, kg, g, h, m in, s; 等。 5 标目, 一般采用 1、111、1111 1三级,层次的序号后不用黑点。 6 参考文献请在文中引用处用方括号顺序以数字标注。文献数目过多的不必全列出, 只举重要的和新的,并按下列格式书 写。 [期刊 ]作者 1文题 1刊名,年, 卷 (期 ) :起页-迄页 1 [书籍 ]作者或编者 1书名 1版本 1出版地:出版社 (商 ), 出版年:起页-迄页 1 #1404# Journa l o f Ch ineseM ed icina lM a teria ls 第 31卷第 9期 2008年 9月