HPLC法测定祛痹舒肩丸中阿魏酸的含量

HPLC法测定祛痹舒肩丸中阿魏酸的含量 HPLC法测定祛痹舒肩丸中阿魏酸的含量 第22卷 2008正 第4期 8月 长治医学院 JOURNALOFCHANGZHIMEDICALCOLLEGE V01.22No.4 Aug.2008253 HPLC法测定祛痹舒肩丸中阿魏酸的含量 申强陈燕忠吕竹芬庄义修.一 摘要目的:建立以高效液相色谱法测定祛痹舒肩丸中阿魏酸含量的方法.方法:色谱柱为Cl8柱 (4.0mm×250mm,5m),流动相为乙睛一0.085%磷酸溶液(17:83), 检测 工程第三方检测合同工程防雷检测合同植筋拉拔检测方案传感器技术课后答案检测机构通用要求培训 波长为323nm,流速为1.0 mL/min,柱温为室温.结果:阿魏酸在(0.001996,0.07984)mg/mL范围内浓度与峰面积线性关系良好 (r:0.9997,n:7),平均加样回收率为101.2%,RSD为2.9%(n=6).结论:本方法简便,灵敏,准 确,可用于祛痹舒肩丸的质量控制. 关键词高效液相色谱法;祛痹舒肩丸;阿魏酸 中图分类号R284.1文献标识码A文献编号1006,(2008)04—253—03 DeterminationofFerulicAcidinQubiShujianPillsbyHPLC ShenQiang,ChenYanzhong,LuZhufen,eta1. ChangzhiMedicalCollege,Changzhi Abstract0biective:TodevelopaHPLCmethodfordeterminationofferulicacidinQubiShuji anPills. Methods:TheanalysiswascarriedoutonaDiamonsilCl8column(4.0mm×250mm,5m)withamobilephase acetonitrile一0.085%phosphoricacid(17:83).Theflowratewas1.0mL/minattheroomtemperatureandth e UVdetectionwavelengthwas323nm.Results:Thecalibrationcurvewaslinearattherangeof (O.001996,0.07984) H1{mLfortheformicacid(r=0.9997,n=7).Theaveragerecoveryratewas101.2%andRSDw as2.9% (n=6).Conclusion:Themethodwasrapid,sensitiveandaccurate,andcouldbeusedforthequa litycontrol ofthispreparation. KeywordsHPLC;QubiShujianPills;Ferulieacid 祛痹舒肩丸是由桂枝,羌活,黄芪,三七,当归 等十四味中药组成的中药复方制剂,临床主要用于 治疗肩关节性周围炎,以治疗风寒痹为主[.本品 原质量 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 中无阿魏酸的含量测定方法,不利于制 剂的质量控制.本文参照《中国药典》[z],建立了 HPLC法测定祛痹舒肩丸中的阿魏酸的含量.本 法操作简便,灵敏度高,重现性好,结果准确可靠, 可作为该药的质量控制标准. 作者单位1长治医学院药学系(046000)2广东省药物新剂型重 点实验室/广东药学院药物研究所3广东食品药品职业学院 基金项目广东省科技 计划 项目进度计划表范例计划下载计划下载计划下载课程教学计划下载 地市重点引导项目(2006B35604008) *广东药学院在读研究生 **通讯作者(E—maiL:zhuangyx@gdyzy.edu.on) 1仪器与试药 DionexP680高效液相色谱仪,Dionex UVD170U可变波长检测器,Chromeleon色谱工作 站,SartoriusBS224S电子分析天平,uV,1101紫 外可见分光光度计,KQ一300VDE型双频数控超声 波清洗器.阿魏酸对照品(中国药品生物制品检定 所,批号:110773,200611,供含量测定用),祛痹舒 肩丸(汕头市麒麟药业有限公司,批号:890906, 9911011,20060602,20060610),乙腈为色谱纯,水 为重蒸馏水,其它试剂均为分析纯. 2方法与结果 2.1色谱条件 色谱柱为DikmaDiamonsilC】8柱(4.6mm× 250mm,5m),PhenomenexC】8保护柱(4.0mm× 254长治医学院 2.0mm).流动相为乙睛一0.085%磷酸溶液(17: 83),流速为1.0mL/min,检测波长为323nm,柱温 为室温,进样量为20,理论塔板数按阿魏酸峰 计算应不低于3000. 2.2溶液的制备 2.2.1对照品溶液的制备:精密称取减压干燥过 夜(室温下)的阿魏酸对照品9.98mg,置25mL量 瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得0.3992 mg/mL对照品溶液. 2.2.2供试品溶液的制备:取祛痹舒肩丸2g,研 细,精密称取粉末1g,置具塞锥形瓶中,精密加入 盐酸一甲醇(1:20)溶液20mL,称定重量,超声处 理10min,放冷,再称定重量,用盐酸一甲醇(1:20) 溶液补足减失的重量,摇匀,用0.45m的微孔滤 膜过滤,取续滤液,即得供试品溶液. 2.2.3阴性对照液的制备:按制剂处方组成除去 当归后,根据样品制备工艺制备阴性对照,按供试 品溶液制备方法制成不含当归的阴性对照溶液. 以上3种溶液按上述色谱条件进样,测定.结 果供试品色谱图中与对照品色谱图中相应位置上 有一相同保留时间的色谱峰,阿魏酸峰与其他组分 峰分离度良好,阴性对照无干扰.结果见图1,图 3. 2.3标准曲线及线性关系考察 上述色谱条件下,精密吸取上述对照品溶液 0.05mL,0.1mL,0.2mL,0.4mL,0.5mL,1.0 mL,2.0mL,分别置10mL容量瓶中,加甲醇稀释 至刻度,混匀,取上述系列浓度对照品溶液,分别进 样20.以阿魏酸对照品峰面积积分值Y(mAU/ rain)对对照品溶液浓度x(mg/mL)进行线性回 归,得回归方程:Y=1720.8X+0.3417,相关系数 为r=0.9997(乃=7).可见阿魏酸在0.001996 mg/mL,0.07984mg/mL范围内线性关系良好. 2.4精密度试验 分别吸取同一对照品溶液,连续进样6次每 次20L.所测得阿魏酸峰面积积分值的RSD为 0.68%(乃=6), 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明仪器精密度良好. 2.5重复性试验 取同批丸剂样品(批号:890906),按2.2.2项 下平行操作制备成6份供试品溶液后按样品测定项 下方法测定,平均含量为2.014mg/g,RSD为0.74% (乃=6),表明本方法重复性良好. 2.6稳定性试验 :890906),分别于制 取同一供试品溶液(批号 备后0h,2h,4h,6h,8h,12h重复进样,测得阿 魏酸峰面积积分值的RSD为3.72%(乃=5),表 明供试品溶液12h内稳定. 图l阿魏酸对照品tfPLC色谱图 图2祛痹舒肩丸供试品tfPLC色谱图 WvL:323n \ Mln 图3阴性对照HPLC色谱图 2.7加样回收率试验 取上述已知含量的样品(批号:890906),共6 份,精密称定,每份精密加入一定量的对照品,按 2.2.2项下处理并测定.外标法定量,结果见表1. 申强等.HPLC法测定祛痹舒肩丸中阿魏酸的含量255 表1回收率测定结果(n=6) 2.8样品含量测定 取不同批号的祛痹舒肩丸,按2.2.2项下制 备,分别取对照品溶液与供试品溶液各以20进 样,按上述色谱条件测定,外标法定量,结果分别为 1.07mg/g,1.18mg/g,1.15mg/g. 3讨论 3.1流动相的选择 参考文献[]对流动相进行了选择,比较了不 同组成和不同比例的流动相,最终选择乙睛一0.(185% 磷酸溶液(17:83)为流动相,使待测成份分离效果 好,且峰形较佳. 3.2波长的选择 采用uV一1101紫外可见分光光度计,以甲醇 为溶媒测定阿魏酸,在250nm,400nm波长绘制 吸收曲线,结果在323nm处有最大吸收,且在(323 ?2)nm范围内较平坦.同时阿魏酸的紫外吸收 光谱显示,以流动相为溶剂及以甲醇为溶剂时,在 323nm处有最大吸收,因此选择323nm作为检测 波长. 3.3提取方法的选择 阿魏酸化学性质极不稳定,需避光保存并低温 冷藏.本文对采用不同溶剂和不同超声处理时间 ,盐 的提取方法进行了比较[0],考察了乙醇,甲醇 酸一乙醇(1:20)溶液,盐酸一甲醇(1:20)溶液4种 提取溶剂,分别超声10rain,40min,60min,结果以 盐酸一甲醇(1:20)超声10min提取效果最好.选 用超声提取法,操作简便,提取率高,并可有效地避 免了高热对阿魏酸稳定性的影响. 用HPLC法测定祛痹舒肩丸中阿魏酸的含量, 经方法学研究表明此方法具有样品预处理简单,回 收率好,重现性好,稳定性好及专属性强等优点,作 为祛痹舒肩丸质量标准检测方法,能够更有效地控 制该制剂的质量. 参考文献 [1]国家药典委员会.国家药品监督管理局国家标准WS3—314 (z一046)一99(Z)[s].新药转正标准中药第23册,1999:752. [2]国家药典委员会.中华人民共和国药典[s].一部.北京:化学 工业出版社,2005:89. [3]罗先英.HPLC法测定调经止痛片中阿魏酸的含量[J].西北 药学杂志,2007.22(2):63,64. [4]朱艳,杨松松.rn'LC法测定大风丸中阿魏酸的含量[J].辽 宁中医药大学,2007,9(3):187. [5]冯筠,唐德才.HPLC法测定肤痒片中阿魏酸含量[J].云南 中医学院,2007,30(1):13,l4. (收稿日期:2008—06—05;修回日期:2008—06—28)