HPLC法测定祛痹舒肩丸中阿魏酸的含量.doc
HPLC法测定祛痹舒肩丸中阿魏酸的含量
作者:申强 陈燕忠 吕竹芬 庄义修
【摘要】 目的:建立以高效液相色谱法测定祛痹舒肩丸中阿魏酸
含量的方法。方法:色谱柱为C18柱(4.0 mm×250 mm，5 μm)，
流动相为乙睛-0.085%磷酸溶液(17?83)，检测波长为323 nm，
流速为1.0 mL/min,柱温为室温。结果:阿魏酸在(0.001996,
0.07984)mg/mL范围内浓度与峰面积线性关系良好
(r=0.9997,n=7)，平均加样回收率为101.2%，RSD为2.9%
(n=6)。结论:本方法简便、灵敏、准确，可用于祛痹舒肩丸的质
量控制。
【关键词】 高效液相色谱法 祛痹舒肩丸 阿魏酸
Abstract Objective:To develop a HPLC method for determination of
ferulic acid in Qubi Shujian Pills.Methods:The analysis was carried out
on a Diamonsil C18 column (4.0 mm×250 mm，5 μm) with a mobile
phase acetonitrile-0.085% phosphoric acid (17?83). The flow rate was
1.0 mL/min at the room temperature and the UV detection wavelength
was 323 nm.Results:The calibration curve was linear at the range of
(0.001996,0.07984)mg/mL for the ferulic acid (r=0.9997,n=7).The average recovery rate was 101.2% and RSD was 2.9% (n=6).Conclusion:
The method was rapid, sensitive and accurate, and could be used for the
quality control of this preparation.
Key words HPLC;Qubi Shujian Pills;Ferulic acid
祛痹舒肩丸是由桂枝、羌活、黄芪、三七、当归等十四味中药组
成的中药复方制剂，临床主要用于治疗肩关节性周围炎，以治疗风
寒痹为主,,,。本品原质量标准中无阿魏酸的含量测定方法，不
利于制剂的质量控制。本文参照《中国药典》,,,，建立了
HPLC法测定祛痹舒肩丸中的阿魏酸的含量。本法操作简便，灵敏
度高，重现性好，结果准确可靠，可作为该药的质量控制标准。
1 仪器与试药
Dionex P680高效液相色谱仪，Dionex UVD170U可变波长检测
器，Chromeleon色谱工作站，Sartorius BS224S电子分析天平，UV-
1101紫外可见分光光度计，KQ-300VDE型双频数控超声波清洗
器。阿魏酸对照品(中国药品生物制品检定所，批号:110773-
200611，供含量测定用)，祛痹舒肩丸(汕头市麒麟药业有限公
司，批号:890906，9911011，20060602，20060610)，乙腈为色谱
纯，水为重蒸馏水，其它试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱为Dikma Diamonsil C18柱(4.6 mm×250 mm，5 μm)，Phenomenex C18保护柱(4.0 mm×2.0 mm)。流动相为乙睛-0.085%磷酸溶液(17?83)，流速为1.0 mL/min，检测波长为323 nm，柱温为室温，进样量为20 μL，理论塔板数按阿魏酸峰计算应不低于3 000。
2.2 溶液的制备
2.2.1 对照品溶液的制备:精密称取减压干燥过夜(室温下)的阿魏酸对照品9.98 mg，置25 mL量瓶中，加甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得0.3992 mg/mL对照品溶液。
2.2.2 供试品溶液的制备:取祛痹舒肩丸2 g，研细，精密称取粉末1 g，置具塞锥形瓶中，精密加入盐酸-甲醇(1?20)溶液20 mL，称定重量，超声处理10 min，放冷，再称定重量，用盐酸-甲醇(1?20)溶液补足减失的重量，摇匀，用0. 45 μm的微孔滤膜过滤，取续滤液，即得供试品溶液。
2.2.3 阴性对照液的制备:按制剂处方组成除去当归后，根据样品制备工艺制备阴性对照，按供试品溶液制备方法制成不含当归的阴性对照溶液。
以上3种溶液按上述色谱条件进样，测定。结果供试品色谱图中与对照品色谱图中相应位置上有一相同保留时间的色谱峰，阿魏酸峰与其他组分峰分离度良好，阴性对照无干扰。结果见图1,图3。
2.3 标准曲线及线性关系考察
上述色谱条件下，精密吸取上述对照品溶液0.05 mL，0.1 mL，0.2 mL，0.4 mL，0.5 mL，1.0 mL，2.0 mL，分别置10 mL容量瓶中，加甲醇稀释至刻度，混匀，取上述系列浓度对照品溶液，分别进样20 μL。以阿魏酸对照品峰面积积分值Y(mAU/min)对对照品溶液浓度X (mg/mL)进行线性回归，得回归方程:Y=1720.8X+0.3417，相关系数为r=0.9997 (n=7)。可见阿魏酸在0.001996 mg/mL,0.07984 mg/mL范围内线性关系良好。 2.4 精密度试验
分别吸取同一对照品溶液，连续进样6次，每次20 μL。所测得阿魏酸峰面积积分值的RSD为0.68%(n=6)，
表
关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf
明仪器精密度良好。
2.5 重复性试验
取同批丸剂样品(批号:890906)，按2.2.2项下平行操作制备成6份供试品溶液后按样品测定项下方法测定，平均含量为2.014 mg/g，RSD为0.74%(n=6),表明本方法重复性良好。
2.6 稳定性试验
取同一供试品溶液(批号:890906)，分别于制备后0 h，2 h，4 h，6 h，8 h，12 h重复进样，测得阿魏酸峰面积积分值的RSD为
3.72%(n=5)，表明供试品溶液12 h内稳定。
2.7 加样回收率试验
取上述已知含量的样品(批号:890906)，共6份，精密称定，每份精密加入一定量的对照品，按2.2.2项下处理并测定。外标法定量，结果见表1。表1 回收率测定结果
2.8. 样品含量测定
取不同批号的祛痹舒肩丸，按2.2.2项下制备，分别取对照品溶液与供试品溶液各以20 μL进样，按上述色谱条件测定，外标法定量，结果分别为1.07 mg/g，1.18 mg/g，1.15 mg/g。
3 讨论
3.1 流动相的选择
浙公网安备 33021202002483