雏鸵鸟中枢淋巴器官的形态学观察

雏鸵鸟中枢淋巴器官的形态学观察 雏鸵鸟中枢淋巴器官的形态学观察 中国兽医2008年3月第28卷第3期Chin.,&Mar.2008Vo1.28No.3291 雏鸵鸟中枢淋巴器官的形态学观察 宋卉,彭克关,李升和,王岩,位兰,唐丽,靳二辉,王家乡(华中农业大学动物科技一动物医学 学院,湖北武汉430070) 摘要:采用H.E和甲苯胺染色,对育雏期鸵鸟胸腺和腔上囊的解剖结构,组织学特点及肥大细胞在中枢淋巴器官的 并用图像分析系统对肥大细胞的数量及形态特征进行了分析.结分布进行了观察, 果显示:雏鸵鸟胸腺分叶少,仅 分布在颈部后段两侧,且聚集在一起,髓质内有典型的Hassall小体;胸腺内肥大细胞分布较广,其中髓质和皮一髓交 处数量最多.腔上囊前部形成盲端,覆盖于泄殖道和粪道后段背侧,后部构成肛界 道背外侧壁,不形成真正的囊, 其内 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 面皱褶上有密集分布的乳头;腔上囊小结单个分布并凸出于黏膜上皮;黏膜上皮为复层柱状上皮,移行至腔 上囊小结处变为单层柱状上皮;腔上囊内肥大细胞主要分布在黏膜上皮.以上结果表明,雏鸵鸟中枢淋巴器官与 其他禽类的同类淋巴器官存在明显的差异,且中枢淋巴器官内肥大细胞数量较多,不同器官或同一器官不同部位 肥大细胞的形态,大小和颗粒染色深浅均有所不同. 关键词:雏鸵鸟;中枢淋巴器官;形态结构;肥大细胞 中图分类号:$839;$852.16文献标识码:A文章编号:1005—4545(2008)03.0291—05 Histologyofcentrallymphoid0rgaIlsinostrichchicks SONGHui,PENGKe—mei,LISheng-he,WANGYan,WEIIan,TANGLi,JINEr-hui,WANGJia-xiang(College ofAnimalScienceandVeterinaryMedicine,肌 AgriculturalUniversity,Wuhan430070,China) Abstract:Theanatomicandhistologiecharacterofthymusandeloaealbursaanddistributionofmastcellsincentrallymphoid organswereobservedbyH.Eandtoluidinebluestaining.Thenumber,sizeandshapeofmastcellswereanalyzedinostrich chicks,usingImageProPlus,Theresultsshowedthethymusofostrichchickslayinthebackofneckalongtwosidesandclustered together,therewastypicalHassallcorpuscles.ThemastcellsinthymusdistributedwidelyandthenumberofitWasmostinmedulla andcommonboundaryofcortexandmedulla.TheforesideofCloacalbursaformedtheblindend,coveringthedorsalisofexcretory- genitaltractsandeoprodeum.TherearendofitstructuredthedorsalandetemalwallofproctodeumandWasnotthetruebursa, whosesurfaceinsidef0ldsdenselydistributedpapilla.Thebursanoduleprotrudedfrommucosaepitheliumsingly.Mueosaepitheli? ufnwasstratifiedcolumnarepitheliumandbecamesimpleeolunnlarepitheliumatthebursanoduleepithelium.Mastcellsmainly distributedinthemucosaepitheliumofCloacalbursa.Alltheresultsdemonstrated:Thereareobviousdifferencesincentrallym— phoidorgansbetweenostrichchicksandotherpoultries.Thenumberofmastcellsislarge,anditsshape,sizeandgrayvariesindif- ferentorgansorlocationofthesameorgan. Keywords:ostrichchicks;centrallymphoidorgans;morphology;mastcells, *Correspondingauthor 鸟类中枢淋巴器官包括胸腺和腔上囊,分别是 T,B淋巴细胞发生,分化,成熟的场所,具有维持机 体正常免疫功能和增强机体抗病力的功能,为机体 防止病原侵人提供最初的防线.淋巴细胞的分化发 育和成熟受所在局部微环境的调节和影响…l.肥大 细胞是构成机体微环境的重要细胞,参与机体的炎 症反应和免疫调节.迄今,对于肥大细胞在不同动 收稿日期:2006—05.08 基金项目:国家自然科学基金资助项目(30471249) 作者简介:宋卉(1975.),女,在读博士. *通讯作者 物机体防御中的作用及细胞化学方面已有较多资 料【2-10J,但有关鸵鸟的相关研究尚未见报道.雏鸵 鸟是指从孵化出壳到3月龄左右的幼鸟,其生长发 育的好坏直接关系到后备鸟的质量,影响种鸵鸟的 种用价值;因此,如何做好育雏期鸵鸟疾病的防治已 成为目前鸵鸟养殖业需重点解决的问题之一.目 前,有关雏鸵鸟的研究主要集中在其饲养管理及常 见病的防治等_l;本试验以雏鸵鸟为试验动物, 通过观察胸腺和腔上囊的结构特点及肥大细胞在中 枢淋巴器官的分布规律,旨在了解雏鸵鸟中枢淋巴 器官的形态位置,结构特征及发育程度,为探讨其生 292中国兽医2008年3月第28卷第3期ChinJVetSciMar.2008Vo1.28No.3 理功能,疾病预防和免疫研究提供理论依据. 1材料与方法 1.1样品采集与处理选购2月龄的健康非洲雏鸵 鸟4羽(雌雄不限),按1g/kg用20%的乌拉坦跖静 脉注射深麻醉后,从胸骨正中线剪开胸腔,暴露心 脏,左心室进针,快速灌流0.85%的生理盐水(含 2%的柠檬酸三钠),同时剪开右心耳,灌至流出清亮 液体后注入4%多聚甲醛一0.1%磷酸盐缓冲固定液, 全身灌流固定.先进行大体解剖观察,并取胸腺和 腔上囊,石蜡包埋,切片4—6tnn,H.E常规染色,甲 苯胺蓝(,rB)法对肥大细胞进行特殊染色,显微镜观 察并摄影. 1.2数据处理在10×40镜下,利用美国ImagePro Plus图像分析系统获取5个随机视野的图像,提取 测量参数,得出各项数据,所得数据均以元?表 示. 2结果 2.1雏鸵鸟中枢淋巴器官的解剖学特点雏鸵鸟 胸腺浅黄色,位于颈后部两侧,沿颈部腹外侧分布, 其后部抵至第1肋骨前缘.胸腺呈豆瓣状,数量少, 聚集成团,分叶不明显,彼此间有结缔组织相连(图 1A).右侧胸腺在食管,气管和颈静脉外部的一侧. 分叶大小不等,从前到后其体积逐渐减小,且两侧胸 腺分叶数量不同,左侧24叶,质量约2.38g;右侧 l一5叶,质量约2.41g.胸腺后部偶与甲状腺,甲状 旁腺紧密相连并穿入其中(图lB). 腔上囊位于泄殖腔后上方,其前部形成盲端,外 观呈囊状,但不形成真正的囊,后部构成肛道背外侧 壁,背面通过直肠尾骨肌与直肠相连,并被直肠尾骨 肌压迫成左右两部,中间有明显的压迹(图1C,D), 腹侧通过粪道与泻殖道间的孔与粪道相通(图lE). 腔上囊由若干皱襞形成,大小不一,皱襞表面有密集 分布的乳头,侧面观皱襞呈叶瓣状,从后上方向前逐 层交叠紧密排列,后部皱襞仅为一层,再向后形成团 状结构(位于泄殖腔后部盲端内)(图lF). 2.2雏鸵鸟中枢淋巴器官的组织学特点胸腺表 面被覆有结缔组织构成的被膜,被膜深入实质内将 其分成许多不完整的小叶.胸腺小叶大小不等,可 分为皮质和髓质,周围染色较深的为皮质,由上皮性 网状细胞构成支架,网状细胞体积较大,胞质淡染, 核呈圆形或卵圆形,网眼内充满中等大小的淋巴细 胞和巨噬细胞,淋巴细胞数量多,故皮质着色深;皮 质部小叶间隔明显,间隔内仅见小的毛细血管(图 1G).中央为髓质部,髓质内上皮网状细胞较多,淋 巴细胞相对减少,故着色浅,小叶间隔缺乏,髓质融 合,髓质内有含有均匀嗜酸性物质的球形结构,称为 HassaJl氏小体;髓质内血管丰富,巨噬细胞数量较多 (图1H). 腔上囊囊壁由黏膜,黏膜下层,肌层和纤维膜组 成.黏膜层包括黏膜上皮和固有层,固有层较薄,无 黏膜肌层,黏膜上皮为复层柱状上皮.固有层的腔 上囊小结不是密集分布于其黏膜皱襞内,而是单个 分布并凸出于黏膜上皮,但其基部附着于黏膜下层, 其上皮由黏膜上皮的复层柱状上皮移行而成的单层 柱状上皮细胞组成(图1J).腔上囊小结由3个区构 成:外区即皮质,比较薄,有密集分布的小淋巴细胞 和少量上皮网状细胞,巨噬细胞,故浓染,血管不多; 内区即髓质,髓质发达,较厚,淋巴细胞数量多,其间 分布有少量网状细胞和巨噬细胞,染色也较深,髓质 内有细小的毛细血管;皮质和髓质之间为中间区,较 厚,由未分化的上皮细胞组成,细胞排列较疏松,淡 染(图1I).黏膜下层由疏松结缔组织构成,较薄,富 含血管.肌层发达,可分为内环,中斜和外纵行3 层,肌层间有血管分布.腔上囊最外层是较薄的纤 维层. 2.3雏鸵鸟中枢淋巴器官内肥大细胞IMC)的形态 及分布TB阳性肥大细胞呈蓝色,颗粒紫红色,细 胞核多位于细胞的中央,常被胞质颗粒覆盖而呈深 紫红色.胸腺内肥大细胞分布广泛,皮.髓交界处和 髓质部均有大量肥大细胞密集分布于胸腺小体周 围,血管壁及淋巴细胞之间,颗粒染色较浅,呈弥散 性分布(图1K,L).皮质部肥大细胞位于边缘处,数 量也较多,颗粒染色较深,聚集分布.胸腺被膜,小 叶间结缔组织内也有零星分布的肥大细胞(图1M). 腔上囊肥大细胞主要分布在黏膜上皮(图1N),腔上 囊小结皮质部也有极少量肥大细胞分布(图IO). 具体分布规律见表1. 3讨论 3.1雏鸵鸟胸腺与其他禽类胸腺的比较胸腺是 初级淋巴器官,是产生和培育与细胞免疫活动有关 的各种特异性T淋巴细胞的场所,在细胞免疫中起 中枢作用.本研究发现,雏鸵鸟胸腺的数量,分布位 置及其组织结构特点与其他禽类相比存在一定差 异.雏鸵鸟胸腺仅分布在颈后部两侧,聚积在一起. 而一般家禽胸腺从颈前部到胸前部分别沿着颈静脉 延伸,似一长链.胸腺分叶与其他禽类相比数量较 中国兽医2008年3月第28卷第3期Chin.『SciMar.2008Vo1.28No.3293 图1雏鸵鸟中枢淋巴器官的形态学A.胸腺(T);B.胸腺(T)与甲状腺(TG);C.腔上囊背面观(CB)被直肠尾骨肌 (RM)覆盖;D.腔上囊背面观(CB);E.腔上囊腹面观(CB),示腔上囊与粪道连接处(Ji);F.腔上囊正中矢状面, 示腔上囊与粪道连接处(Ji)及腔上囊皱褶(FCB);G.胸腺横切面,示皮质(Co),髓质(M)及被膜(Ca)(10×10, HE染色);H.胸腺髓质,示胸腺小体(HC)(10×40,HE染色);I.腔上囊小结,示皮质(Co),髓质(M)和中间层 (MZ)(10×10,HE染色);J.腔上囊小结,示黏膜上皮(ME)(10×40,HE染色);K.胸腺皮 质(1)和被膜(2)处肥大 细胞(MC)(10×40,TB染色);L.胸腺皮一髓交界处肥大细胞(MC)(10×40,TB染 色);M.胸腺髓质处肥大细胞 (MC)(10×40,TB染色);N.腔上囊黏膜上皮处肥大细胞(MC)(10×40,TB染色);O. 腔上囊皮质处肥大细胞 (MC)(10×40,TB染色) 294中国兽医2008年3月第28卷第3期Chin'『SciMar.2008Vo1.28No.3 注:"一"表示TB反应为阴性 少,且分叶不明显,如鸡胸腺分叶明显,约有l4叶, 鸭约有10叶.胸腺内T细胞的分化和发育是在从 皮质向髓质的移动过程中完成的,T淋巴细胞的前 体——原淋巴细胞进人胸腺,在分化过程中经历胸 腺选择,凡能与机体自身抗原相结合或与自身MHC 抗原不相容的胸腺细胞(约占95%)均被灭活或淘 汰,仅少数选定的细胞能继续分化为成熟的T细 胞[13;从组织学结构来看,此阶段雏鸵鸟胸腺皮质 部较髓质部比例大,可能使其保证有较多T淋巴细 胞供胸腺选择有关.目前,胸腺小体的功能虽尚不 清楚,但已研究证实,胸腺小体在培育选择胸腺细胞 的过程中是不可缺少的,缺乏胸腺小体的胸腺不能 完成正常的生理功能.雏鸵鸟胸腺髓质部具有大量 像哺乳动物那样典型的Hassall氏小体,虽然鸡等家 禽有发达的胸腺,但其中却很难见到Hassall氏小 体.雏鸵鸟抗病能力较其他家禽强,从上述结构特 点分析,是否是由于鸵鸟胸腺培育T淋巴细胞的功 能较强,还是其胸腺发育的比较完善,或是其他原因 还有待于进一步研究. 3.2雏鸵鸟腔上囊与其他禽类腔上囊的比较腔 上囊是鸟类特有的中枢淋巴器官,为B淋巴细胞分 化发育提供必要的微环境,如果在胚胎时期切除腔 上囊,刚孵出的幼雏体内缺少B细胞,则影响体液 免疫应答,感染疾病时,常因抗病力低下而导致死 亡.本研究发现雏鸵鸟腔上囊外观呈囊状,但不形 成真正的囊,其内壁有若干大小不一的皱襞,皱襞表 面有密集分布的乳头,而鸡的腔上囊为椭圆形盲囊 状,鸭的腔上囊呈筒状,鸡和鸭的腔上囊内表面有许 多纵形皱襞,但皱襞表面光滑,无乳头分布.显微镜 下观察雏鸵鸟腔上囊小结不同于鸡的聚集分布于黏 膜皱襞内,而是单个分布凸出于黏膜上皮;黏膜上皮 为复层柱状上皮,移行至腔上囊小结处变为单层柱 状上皮.而鸡的黏膜上皮一般为假复层柱状上皮, 局部位置也可能衬以单层柱状上皮或单层立方上 皮,有少量杯状细胞_1.与其他禽类肌层相比较, 鸵鸟除内环,外纵两层平滑肌构成外,其中间还有斜 行肌.禽类腔上囊产生的淋巴细胞同样经历由髓质 向皮质部移行时B淋巴细胞的成熟过程_1,此阶段 雏鸵鸟髓质染色较深说明其髓质内含有较多的幼淋 巴细胞,这可能也与腔上囊对淋巴细胞的选择有关. 3.3雏鸵鸟中枢淋巴器官内肥大细胞的分布特点 肥大细胞内含有酶,蛋白质,神经肽及一些免疫 因子等生物活性物质.研究证明,肥大细胞不仅是 构成淋巴器官的组成成分,而且参与淋巴器官中T 淋巴细胞的发生,分化_1.肥大细胞在不同动物淋 巴器官内的分布位置不同,据报道,大鼠胸腺内肥大 细胞主要分布在皮.髓交界处_5J,绵羊,鸡和鸭胸腺 内肥大细胞主要分布在髓质_6{j.本试验结果表明, 雏鸵鸟胸腺内肥大细胞数量较多且分布较广,髓质 部胸腺小体,血管壁,淋巴细胞之间及皮.髓交界处 均有较多的肥大细胞,而胸腺被膜和小叶间结缔组 织内肥大细胞的数量较少.胸腺是产生和培育T淋 巴细胞的场所,T淋巴细胞对肥大细胞分化和发育 有调节作用,胸腺中肥大细胞主要位于髓质中或皮. 髓交界处,而髓质部主要是成熟的T细胞,提示肥大 细胞与T细胞可能存在位置上的密切关系.肥大细 胞作为免疫细胞因子之一,参与机体免疫功能的调 节.贾雪梅等_9J报道,小鼠颌下腺肥大细胞覆盖在 腺实质的表面;而Wasseran等lJ在分析肥大细胞主 要分布于呼吸系统浅表时,均认为肥大细胞的这一 分布规律起防御作用.雏鸵鸟腔上囊肥大细胞主要 分布在黏膜上皮,推测这可能也与机体的免疫防御 中国兽医2008年3月第28卷第3期Ch/n_,SciMar.2OO8Vo1.28No.3295 有关.此外,还发现在胸腺或腔上囊不同部位肥大 细胞的大小不一,形态各异及染色特性也不同,这可 能与肥大细胞的组成和细胞亚型有关.由于肥大细 胞的异质性致使其对固定液和染料有明显的差异 性,所以雏鸵鸟中肥大细胞具体数量,染色特性及其 细胞成分还有待于进一步研究. 参考文献: [1JKendallMD.Functionalanatomyofthymicmicroenvironment lJJ.JAnat,1991,177:1-29. 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