胡枝子属牧草种子同工酶的分析

胡枝子属牧草种子同工酶的 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 第19卷 Vo1.19 第1期 No.1 内羹古袁牧学院 Inur~lofInneTMongoliaInstitute ofAgriculture&Anlm*lHusbandry 1~98年3月 M8r.1998 胡枝子属牧草种子同工酶的分析.l ?@@ L,/ 皇墓按亳仁j雅.陈海云贾光宏 (内蒙古农牧学院农学系.010018,呼和浩特1内蒙古伊盟鄂托克前旗膏牧局草原工作站) 摘要本文采用聚丙靛胺凝腔电泳法测定两种胡枝子种子的醣酶和过氧化物酶同工酶酶的 谱.分析了种I可和种内异形种子间同工酶酶谱的差异,并且对种子硬实率与酶活性的关系进行 了分析.结果 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 明.两种胡枝子种子的醇酶同工酶酶谱和过氧化物同 工酶酶谱及酶活性存在明 显种问差异.而二色胡枝子两种颜色种子同工酶酶谱盈酶活性差异 不明显,过氧化暂酶同工酶 虽有差异.但差异不如醇酶明显.因此认为,醇酶可以作为胡枝子属亲 缘关系及基因多样化研 究重要标准. 关键词焦壬弛虹蓬 中国资料分类号$541.5 ANALYSIS0FISoZYMES F0RSEEDS0FLespedezaMichx wurenqimugeBurenJ|ya_chenHa|yunJiaGuanghong (Dept.ofA~ronomy,InnerMongoliaInstituteofAgricultureandAnlmalHusbandry) AbstractIsozymezymogramsofperoxidaseandesterasefromseedsoftwospecies ofLespe~zaMiahxweretestedbyadoptingPAGE(polyacrylamidegel electrophoresis).Thedifferencesontheisosymesymogramsoftheheterochosisseedsof theintraspeciesandinterspecies.ereanalysedandrelationsbetweenhard8eededness ratesandenzymeactivitieswereanalysed,too.Theresultsshowedthattherew eresig? nificantdifferencesbetweentheesterases,theperoxidasezymogramsandtheenayl:o.eac? tivitiesinthetwospeciesof 三.Michx.Buttherewasnosignificantdifferencebetween isozymezymogramsandtheenzymeactivitiesoftheseedswithdifferentcoloursin工.hi- colorTurcz.Thedifferencebetweentheesterasesismoresignificantthanthatbetween theperoxidases.ItcanbeconcludedthatitisanimportantstandardtoUSeesterase isozymeforstudyingthegenevariationandthegeneticrelationshipofL.Michx. KeywordsLespedezaMichx.,seeds,isozyme ?收稿日期l1997--04--30 零蠢瓣甍嘉毒龋勰牧草种子生理的研究 14内蒙古农牧学院1998 引言 胡枝子属(LespedezaMichx.)植物是广泛分布于内蒙古草原的优良豆 科牧草.它具 有营养价值高,适应性和抗逆性强,生长快,利用年限长,是各种牲畜 的良好饲料,也是理 想的水土保持植物. 同工酶是基因表达的直接产物,因而利用同工酶的分析能较直接地判断基因的存在 及其表达规律,现已广泛应用于植物的起源及分布,亲缘关系及基因的多样性研究.因此, 本研实以胡枝子属两种牧草二包胡枝子(LespedezaTurez)和绒毛胡枝子(L.D_ mentosa)作为实验材料,探讨其同工酶谱间的基因多态性,供胡枝子遗传资源研究的参 考. 1材料和 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 1.1材料 供试二色胡枝子和绒毛胡枝子种子于1995年10月采于内蒙古农牧学院试验地,种 子收集后于室内常温下保存.同年11,12月问进行试验. 1.2方法 1.2.1样品制备取两种胡枝子种子,用砂纸磨擦种皮后,放入25.C的温箱中发芽3d. 从每份材料中精选萌发种子,用清水冲洗后.用滤纸吸去水分.称取1g,加入40蔗糖溶 液,在冰浴中研成匀浆,离心,取上清液贮于冰箱中备用. 1.2.2电泳分离采用垂直板凝胶电泳分析法.同工酶以7.5聚丙烯酰胺凝胶配制分 离胶,所使用的缓冲液的pH值为8.9. 1.2.3染色保存同工酶的染色方法.用醋酸联苯胺染色法染过氧化物酶同工酶,用醋 酸萘醋,坚牢兰染色法染醋酶同工酶’.将胶片照相后,制成干板保存. 1.2.4数据分析根据染色的酶谱带位置进行Rf值计算绘制酶带模式图,标定酶带位 置及相对音量. Rf==酶带迁移距离/前沿距离 2结果分析 2.1两种胡枝子种子醋酶同工酶酶谱分析结鬃 见图1和表1. 根据图1和表1的结果看,两种胡枝子种子的醋酶同工酶酶谱存在明显的种间差异, 而二色胡枝子两种颜色的种子同工酶酶谱差异不明显.二色胡枝子两种颜色种子的醋酶 同工酶带均为7条,酶带相对迁移率(Rf值)和酶活性无差异,绒毛胡枝子种子的醋酶同 工酶酶带少10条,较二色胡枝子多3条.酶带相对迁移率(Rf值)也不一样,绒毛胡枝子 酶带颜色较深,酶带相对活性较强.种间共有的酶带有4条,即 Rf=0.09,Rf=0.39—0.4, 第1期乌仁其术格等胡枝子屠牧草种子同工酶的分析l5 及Rf=0.72,可以作为该属植物的鉴定标准.这就说明酯酶同工酶可以作为胡枝子属种 间鉴定依据. 见图2和表2. 2.2两种胡枝子种子过氧化物酶同工酶酶谱分析结果 见图2和表2. 两种胡枝子种子过氧化物酶同工酶有明显的种间差异,并且二色胡枝子两种颜色种 子之间也存在少量差异.二色胡枝子褐色种子过氧化物酶同工酶酶谱有7条带,黑色种子 有6条带,其中褐色种子中2条特有酶带,酶带相对活性较弱,酶带迁移率(RI值)与黑色 种子酶带不一样.,黑色种子中也有1条特有酶带,酶带相对活性较弱,其余5条酶带为两 种颜色种子共有,其酶谱,酶活性和酶带相对迁移率(Rd值)完全一样(图2和表2).绒毛 胡枝子种子过氧化物酶同工酶有5条酶带,与二色胡枝子存在明显的差异,其酶带颜色较 浅,酶带相对活性较弱,酶带相对迁移率(RI值)也与二色胡枝子完全 不一样(见表2).从 总体看,过氧化物同工酶酶谱差异不如酯酶同工酶酶谱差异明显(见 图2),酶谱图象也不 十分清晰,这可能固种子材料的酶含量不同所致.(一) 昌 (一) [ 5 7 (+) 图1胡枝子屠二种牧草种子 醇酶谱描述图 注:1二色胡枝子褐色种皮种子 2二色胡枝子黑色种皮种子 3缄毛胡枝子种子 旨 0 3 5 (+) 图2胡枝子属二种牧草种子 过氧化物酶谱描述图 注:1二色胡枝子褐色种皮种子 2二色胡枝子黑色种皮种子 a绒毛胡枝子种子 16内蒙古农牧学院1998 第1期乌仁其术格等t胡柱子属牧草种子同工酶的分析17 l0 l1 l2 13 奠带 总秉致 0.49 — 0.58 O.6l 0.55 — 0.61 5 3讨论 醋酶和过氧化物酶在植物组织中广泛分布,并参与多种生理活动,从一些研究看,该 酶是分析种属亲缘关系及品种鉴定较为可靠的生化指标 两种胡枝子种子的醋酶同工酶酶谱存在明显的差异,酶带分离得较好,酶带清晰,是 十别酶带为属内种问共有(见图1和表1),这说明醋酶同工酶可以作为胡枝子属种问鉴 定依据.过氧化物酶同工酶酶谱也存在种问及种内差异,但效果不如醋酶同工酶,酶带相 对活性较高,酶带分离不清晰二色胡枝子两种颜色种子的过氧化物酶酶谱存在差异,各 自有特殊酶带.根据本次试验结果认为,虽然过氧化物酶同工酶也可以作为胡枝子属种间 鉴定依据,但效果不如酵酶,过氧化物酶同工酶仅可能作为二色胡枝子种内异形种子鉴定 依据之一. 从两种胡枝子同工酶酶谱及酶活性与萌发特性(硬实率和发芽率)分析,结果看出,绒 毛胡枝子种子醋酶同工酶带相对活性高于二色胡枝子,硬实率(76.O)也高于二色胡枝 子(46.0),而二色胡枝子两种颜色种子的醋酶同工酶酶谱无差异,但过氧化物酶同工酶 酶谱存在着差异.我们曾经研究过二色胡枝手种子形态与硬实的关系,研究结果表明同株 成熟种子中,两种颜色(黑色和褐色)的种子问存在明显的形态学和萌发特性方面的差异, 尤其硬实性差异极为显着因此,胡枝子属植物种子同工酶特性差异与种子硬实差异间是 否有一致关系及与种内异形种子的发育规律等问 题 快递公司问题件快递公司问题件货款处理关于圆的周长面积重点题型关于解方程组的题及答案关于南海问题 有待进一步研究. 参考文献 周关宇.有关同工奠分析的几十问题.植物生理学通讯,1983,(1),1,4 翁红宪,陈栾君,廖天.结搂草酯酶同工奠的研究.中国草地,1999,l?56,60 方宏筠,王光林.三种聚合草过氧化物奠同工酶分析.中国草地,1988,(2) 乌仁其术格.二色胡柱子种子碗实特性的研究.内蒙古农牧学院,1999,(1)