NB-UVB治疗前后银屑病皮损中VEGF与CD106的表达

主垦鏖丛廛丛遗壅查垫!Q生2旦箜堑鲞箜竺塑 NB—UVB治疗前后银屑病皮损中VEGF与CDl06的表达 梁俊琴刘玉琴普雄明 [摘要】用免疫组化的方法检测VEGF与CDl06在26例紫外线治疗前后银屑病患者皮损中的表达， 20例正常人作对照，探讨它们在银屑病发病机制中的作用。NB—UVB治疗前患者皮损中VEGF与 CDl06的阳性表达率高于治疗后组，(均P<0．01)。治疗前组阳性表达率高于正常对照组(均P< O．01)，治疗后两者的阳性表达率与正常对照组差异无统计学意义(均P>0．05)。治疗前后患者皮损 VEGF和CDl06的表达呈正相关(P=0．015)。VEGF和CDl06在银屑病患者皮损中过表达，在促进银 屑病患者皮损中血管生成中发挥作用并互相影响。紫外线照射治疗银屑病有效，可能是通过降低角 质形成细胞促血管生成新生因子的表达而间接发挥抗血管生成作用。 【关键词】银屑病；窄谱中波紫外线；血管内皮生长因子；血管内皮黏附因子一1 银屑病的三大组织病理学特征是细胞过度增生、 炎细胞浸润及新生血管生成。我们选用VEGF，CDl06 作为指标，采用免疫组化的方法来观察窄谱中波紫外 线(NB—UVB)治疗银屑病前后皮损中VEGF、CDl06 的表达，以探讨银屑病的发病机制，为银屑病的治疗 提供理论依据。 1资料与方法 1．1研究对象收集2007年新疆维吾尔自治区人 民医院皮肤科临床资料完整的寻常型银屑病患者26 例，经过临床及病理确诊。其中男15例，女11例，年 龄2l～70岁，平均(39．46±12．88)岁，病程1～368个 月，平均(70．42±91．43)个月。入选 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 1：①年龄> 18岁的男女患者在近1个月未使用糖皮质激素、免疫 抑制剂、维A酸类药物或其他系统治疗药物，近1周 未局部治疗。②血常规、肝肾功能正常且无系统性疾 病或肿瘤。③患者知情且签署皮肤活检同意 书 关于书的成语关于读书的排比句社区图书漂流公约怎么写关于读书的小报汉书pdf 。上 述患者在典型皮损区取约1．5cm×1．0erll全层皮肤 固定，包埋，切片3～4pan。NB—UVB治疗1个疗程 (约10—12次)后在皮损处再取全层皮肤(处理同 上)。20例正常对照取自整形外科手术切除正常皮 肤，其中男11例，女9例，年龄21—65岁，平均(38．6 ±10．72)岁。银屑病患者和正常对照组年龄(t= 0．542，P=0．931)和性别(x2=0．033，P=0．810)的差 异均无统计学意义。 1．2研究方法评分：采用PASI评分法来评定患者 皮损严重程度以及疗效。2即PASI积分下降>90％为 治愈，60％。90％为显效，25％一59％为有效，<25％ 为无效。有效率=(治愈例数+显效例数)，总例数× 100％。治疗方法：NB—UVB采用spectra31l光谱治 疗系统的全身紫外线光疗仪，避免正常皮肤受损，测 定患者最小红斑量(Med)，初始照射剂量为Med的 作者单位：新疆维吾尔自治区人民医院皮肤科，乌鲁木齐市，830002 63l 50％，患者隔l一2天照射1次。根据个体皮损反应 情况不同选择照射时间及下次照射剂量。3所有患者 共照射10—12次。 免疫组化方法：一抗二抗均购自福州迈新生物技 术有限公司。切片经脱蜡，水化及PBS清洗。用兔血 清封闭非特异抗原，然后分别加入VEGF，CDl06抗 体，其他步骤按照ABC法试剂盒说明书，镜下观察 DAB显色。观察VEGF、CDl06在治疗前后组织中的 表达。以PBS液代替一抗，作为空白对照。 结果判断：采取双盲法，由两位临床专家独立完 成。阳性染色为胞质出现棕褐色或棕黄色、淡黄色颗 粒。VEGF染色结果半定量根据细胞染色强度和细胞 染色面积两者积分之和来判断。4染色强度积分：不染 色为0分，轻度染色1分，中度染色2分，强染色3分。 染色面积积分采用表皮细胞阳性染色的百分数分0— 4级：无细胞染色为O分，细胞染色<25％为1分， 25％～50％为2分，51％一75％为3分，>75％为4 分。若两者积分之和>2为表达阳性，≤2为表达阴 性。CDl06染色结果半定量根据细胞染色强度和血 管内皮细胞染色阳性的血管条数积分之和来判断。5 染色强度积分：不染色0分，轻度染色1分，中度染色 2分，强染色3分。血管内皮细胞染色阳性的血管条 数积分：无血管内皮细胞染色阳性0分；每张切片中 血管内皮细胞染色阳性有4条以下1分；4～8条2 分；9～12条3分；12条以上4分。若两者积分之和> 2为表达阳性，≤2为表达阴性。 1．3统计学方法采用SPSS13．0统计软件进行统 计分析。t检验，x2检验，Wileoxon秩和检验， Spearman秩相关检验。检验水准a=0．05。 2结果 2．1银屑病患者经过NB—UVB1个疗程照射后。患 者皮损面积，红斑、浸润、脱屑明显改善。26例患者治 疗后PASI评分均明显下降，治疗有效率84．62％，与 万方数据 632 国内外近年来报道的的80％一85％近似。6 2．2 VEGF主要在银屑病患者皮损中表皮角质形成 细胞及血管内皮细胞胞浆或胞膜处有棕黄色或棕红 色颗粒状物质沉积(图1)，正常皮肤中几乎不表达。 NB—UVB治疗前银屑病患者皮损阳性表达率高于正’ 常对照组(z2=17．42，P=0．002)和治疗后组(Y2= 22．264，P=0．001，图2)。NB—UVB治疗后银屑病患 者皮损阳性表达率与对照组相比差异无统计学意义 (Z2=O．289，P=0．621)。 2．3 CDl06主要在正常皮肤中有极少量表达，在银 屑病患者皮损中血管内皮上有棕黄色或棕红色颗粒 状物质沉积(图3)。NB—UVB治疗前银屑病患者皮 损阳性表达率高于正常对照组(Y2=27．867，P= 0．0012)和治疗后组(Y2=14．040，P=0．002图4，表 1)。NB—UVB治疗后银屑病患者皮损阳性表达率与 图1 NB—UVB治疗前银屑病患者皮损中 VEGF阳性表达(免疫组化。×200) ChinaJLeprSkinDis．Sep2010,V01．26,No．9 对照组相比差异无统计学意义(z2=0．011，P= 0．935)。 2．4 VEGF和CDl06表达的相关性治疗前银屑病 患者皮损中VEGF和CDl06共同阳性表达19例(r= 0．473，P=0．015)，治疗后VEGF和CDl06共同阴性 表达17例(r=0．484，P=0．013)，二者呈正相关。 2．5治疗前银屑病患者组皮损中VEGF和CDl06的 表达与患者年龄、病程、PASI评分的相关性经过 Spemwmn秩相关分析，VEGF在银屑病患者组皮损中 表达与患者年龄、病程长短无关(r=0．084，P= 0．685；r=0．054，P=0．731)，与PASI评分存在正相 关(r=0．668，P=0．001)。CDl06与患者年龄、病程 长短无关(r=0．106，尸=0．310；r=0．308，P= 0．126)，与PASI评分存在正相关(r=0．472，P= 0．015)。 图2 NB—UVB治疗后银屑病患者皮损中 VEGF表达(免疫组化，×200) 图3 Nil—UVB治疗前银屑病患者皮损中 图4 NB—UVB治疗后银屑病患者皮损中 CDl06阳性表达(免疫组化，×200) CDl06表达(免疫组化，×200) 表1 NB—UVB治疗前后银屑病患者VEGF、CDl06表达强度积分比较 万方数据 主国壁丛廛丛壅壅查垫!鱼生竺旦箜堑鲞箜!塑 3讨论 银屑病患者皮损中真皮乳头毛细血管丛静脉枝 过度迂曲、扩张、通透性增加、内皮细胞增殖并有新的 血管生成是其主要病理特征之一。7新形成的真皮毛 细血管持续存在银屑病皮损及其周围外观正常的皮 肤。8血管生成因子可能通过调节局部皮肤微循环的 舒缩及血流，改变局部血管的通透性，参与新生血管 的形成，调节角质形成细胞和内皮细胞的增殖与分 化，参与局部炎症反应，调节免疫细胞的功能而参与 银屑病的发病过程。9 VEGF是目前最强的促血管生成因子，也是高度 特异性的血管内皮细胞有效分裂素，既增加微血管通 透性，又通过与内皮细胞上特殊受体作用直接刺激内 皮细胞增殖，有利于血管生成。10有研究表明银屑病最 早发生的病理改变是血管分布和形成的改变，银屑病 复发则与皮损内真皮乳头的微血管内皮细胞过度表 达VEGF有关。Detmar等”认为基底层和基底上层分 化的角质形成细胞过度表达VEGF诱导真皮血管增 多，以适应银屑病增生的表皮对更多营养的需求。同 时VEGF的过度表达使真皮乳头毛细血管通透性增 加，中性粒细胞从血管中渗出进入表皮，通过棘层后， 在颗粒层、角质层下或角质层内聚集，形成Ko倒海绵 状脓肿和Munro微脓肿。在本研究中我们发现VEGF 主要在银屑病的表皮角质形成细胞￡有表达。而且 治疗前银屑病皮损中VEGF的表达明显高于治疗后 银屑病组和正常对照组。 CDl06是细胞表面糖蛋白脱落后形成的溶解状 态的黏附分子，其主要存在于血管内皮细胞膜上，受 炎症因子刺激时表达增加，12并促进单核细胞黏附于 内皮细胞，介导白细胞与血管内皮细胞紧密结合，在 炎症过程中及白细胞跨膜迁移中起关键作用。本文 发现银屑病皮损部位血管内皮细胞上黏附分子过度 表达，提示处于活化状态，这可能是促使炎症性细胞 局部浸润并导致疾病反复发作的潜在阑素之一。 最近的研究表明，T细胞局部浸润和血管内皮黏 附分子的互相作用是炎症性白细胞在皮肤中聚集的 关键。13本文发现NB—UVB治疗前后银屑病患者皮损 VEGF和CDl06的表达呈正相关，提示二者在银屑病 发病过程中互相影响。VEGF可上调血管内皮细胞和 白细胞表达黏附分子，黏附分子影响生物活性物质产 生及参与信号转导等作用，也可能影响VEGF产生和 发挥作用。14紫外线治疗后皮损中VEGF和CDl06的 表达都明显减少，可能提示NB—UVB照射，降低了皮 损中角质形成细胞VEGF的表达，诱使皮损中VEGF 下降，从而导致银屑病皮损中新生血管减少达到治疗 目的。b因此，通过降低角质形成细胞促血管新生因子 表达来I．日j接发挥抗血管新生作用也可能是NB—UVl3 633 治疗银屑病的机制之一。 参考文；献 1王爱民，杨斌，刘巧．复方甘草酸苷联合窄谱中波紫外线照射 治疗银屑病疗效观察．临床皮肤科杂志2007；36(7)：332— 333． 2冯舸，张美华，毕志刚．窄谱中波紫外线治疗寻常型银屑病疗 效观察及血清细胞因子变化．临床皮肤科杂志2004；33(12)： 735． 3KampitakT，AsawanondaP．Theefficacyofcombinationtreatment withnarrowbandUVB(TL一01)andacitretinV8narwwbandUvB aloneinplaque—typepsoriasis：aretrospectivestudy．JMedAssoc ，nlai2006；9(3)：20—24． 4肖李李，黄进化．寻常型银屑病皮损中血管内皮生长因子和 血管细胞黏附分子一1的表达．中华皮肤科杂志2007；40(6)： 376—377． 5蔡绥；c|)，郑敏，孙国均，等．银屑病患者血清和皮损中血管内 皮黏附分子的对比研究．中华皮肤科杂志2002；35(2)：99— 101． 6HerzingerT，DesitzK，HewigG．Treatmentofs／Ballplaqueparap- sofia．siswithna／TOW—band(311nm)ultravioletB：aretrospective study．ClinExpDermatol2005；30(4)：379—381． 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14Kuryliszyn—MoskalA，KlimiukPA，SierakowskiS．Solubleadhe- sionmohcules(sVCAM一1)，vascularendothelialgrowthfactor (VEGF)andendothelin一1inpatientswithsystemicsclerosis：re- latiomhiptoorgaiisystemicinvolvement．ClinRheumatol2005；24 (2)：1ll—116． 15陆星显，岑岭，郭盛华，等．窄谱UVB治疗寻常型银屑病及 其对血管内皮生长因子的影响．中国麻风皮肤病杂志2007； 23(1)：73—74． (收稿：20138—07—25) 万方数据 NB-UVB治疗前后银屑病皮损中VEGF与CD106的表达 作者： 梁俊琴， 刘玉琴， 普雄明 作者单位： 新疆维吾尔自治区人民医院皮肤科,乌鲁木齐市,830002 刊名： 中国麻风皮肤病杂志 英文刊名： CHINA JOURNAL OF LEPROSY AND SKIN DISEASES 年，卷(期)： 2010,26(9) 参考文献(15条) 1.Barile S;Medda E;Nisticò L Vascular endothelial growth factor gene polymorphisms increase the risk to develop psoriasis[外文期刊] 2006(05) 2.Herzinger T;Degitz K;Plewig G Treatment of small plaque parapsoriasis with narrow-band (311 nm) ultraviolet B:a retrospective study[外文期刊] 2005(04) 3.蔡绥*7;郑敏;孙国均 银屑病患者血清和皮损中血管内皮黏附分子的对比研究[期刊论文]-中华皮肤科杂志 2002(02) 4.肖李李;黄进化 寻常型银屑病皮损中血管内皮生长因子和血管细胞黏附分子-1的表达[期刊论文]-中华皮肤科杂 志 2007(06) 5.王爱民;杨斌;刘巧 复方甘草酸苷联合窄谱中波紫外线照射治疗银屑病疗效观察[期刊论文]-临床皮肤科杂志 2007(07) 6.Simonetti 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