蛇床子素对肺腺癌、肺鳞癌生长抑制作用的实验研究

蛇床子素对肺腺癌、肺鳞癌生长抑制作用的实验研究 蛇床子素对肺腺癌、肺鳞癌生长抑制作用的 实验研究 癌变?畸变?突变2002年1O月第14卷第4期 Carcinogenesis,TeratogeneslsandMutagenesisVol14No4Oct.,2002 文章编号:1004—616X(2002}04—0231—03 蛇床子素对肺腺癌,肺鳞癌生长抑制作用的实验研究? 周俊,程维兴,许永华,张东辉,王冬梅 (兰州军区乌鲁木齐总医院,新疆乌鲁木齐830000) ? 论着? 【摘要】目的:观察蛇床子素对人肺鳞癌和肺腺癌的抑制作用. 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 :建立BALB/C 裸鼠的人肺腺癌和肺鳞癌模型,给予蛇床子 素,剂量为1.5g/(g?d),观察瘤体的大小,重量和动物血清中肺癌标志物DR一70的 水平,以此评价蛇床子素的抑癌作用.结 果:蛇床子素对肺鳞癌的抑瘤率为69.5%,对肺腺癌的抑瘤率为50.0%,对DR一70 也有显着降低作用.结论:蛇床子素对肺鳞 癌和肺腺癌的瘤体生长有一定的抑制作用,尤其是肺鳞癌. 【关键词】蛇床子素;肺癌;裸鼠 中图分类号}R979.13文献标识码:A INHIBITIONOFOSTHOLONADENOCARCINOMAANDSQUAMACARCINOMAOFLUNG ZHOUJun,CHENGWei-xing,XUYong—hua,etal (UrumqiGeneralHospitalofLanzhouCornmand.PLA.Urumqi830000,China) 【Abstract】 Purpose:Toobservedtheinhibitioneffectofostholonhumanlungadenocarcinomaandsqua macarci— noma.Methods:Setupmodelsofhumanlungadenocarcinomaandsquamacarcinomaonthe bodiesofBALB/C, onekindofnudemice,thenostholwasgiventothemiceinthedoseof1.5g/(g?d).Antitumoreff ectofOS— tholwerevaluedbyweighingthetumoranddetermingDR一70,themarkoflungcancerinBALB/Cserum. 中,但某些肿瘤外组织如肺,外周血淋巴细胞,肌肉, 肾,脑,肝脏等组织中均发现有mdr-1基因的 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 达l4】. 用RT-PCR方法检测mdr-1基因表达国内外已有大 量研究,然而正常组织如外周血淋巴细胞中mdr-1基 因与癌组织细胞中的表达是否有相关性,则未见报 到.由于此方法常规需采用癌组织标本检测,有很大 一 部分晚期癌症患者首诊时已失去手术机会不能提 供癌组织标本,因此只能凭经验判定化疗方法.由此 可见,寻找一种较易获得的替代标本是非常必要的. 外周血淋巴细胞易于获取,从理论上讲外周血淋巴细 胞替代癌组织细胞进行此项检测是可行的.我们的 研究结果表明,同一抗肿瘤药物体外诱导癌组织细胞 和相应外周血淋巴细胞的mdr1基因表达存在高度 的正相关关系.由此可见,外周血淋巴细胞可以替代 癌组织细胞进行此项检测.本研究为临床肿瘤患者 个体化用药提供了又一个新的途径. 参考文献: [1]司徒填强.吴军正.细胞培养[M].第二版.西安:兴界图书出版 公司,1999.134,135. [2】殷丽明,陈克能,李殿发,等.常见恶性肿瘤新鲜组织中原发性多 药耐药基因表达的初步研究[J].中华肿瘤杂志,1997,19(6): 420,422. [3]刘晓晴.宋三泰.石成华,等.RT-PCR方法检测乳癌组织mdr.1 基因表达标准的建立[J].中华肿瘤杂志,1997.19(1):38--41. [4]ZalalanGJR,VersantvoortCHM,SmitJJM,eta1.Analysisofthe expressionofMRP,thegeneforanewputativetransrnembrane drugtransporter,inhumanmulfidrugresistantlungcarlcercelllines [J].CancRes,1993,53(8):1747,1750. ?收穑日期:2002—01.24;修订日期:2002—06.10 作者简介:周俊(1967一),女,四川省人,主治医师,硕士,研究方向:肿瘤与免疫. ?-—— 231?-—— 癌变?畸变?突变2002年1O月第14卷第4期 Carcinogenesis,TeratogenesisandMutagenesisVol14No4Oct.,2002 Results:Theinhibitoryrateswere69.5%onlungsquamacarcinoma,and50%onlungadenoc arcinoma,re— spectivelyalsoobviouslydecreasedthelevelofserumDR一 70.Conclusion:Ostholcaninhibitethegrowingof lungadenocarcinomaandlungsquamacarcinoma,especiallythesquamacarcinoma. 【Keywords】osthol;lungcancer;nudemice 经过实验研究,我们发现蛇床子(cnidiummon— nieril.Cuss)提取液有较强的抑瘤作用ll】.目前已知 蛇床子中有8种单体:棕榈酸(palmiticacid),蛇床子 素(ostho1),f}-谷甾醇(~-sitostero1),佛手柑内酯 (bergapten),异虎耳草素(isopimpinellin),花椒毒酚 (xanthotoxo1),欧芹属素乙(imperatorin)和花椒毒素 (xanthotoxin),其中蛇床子素收得率最高[.蛇床子 素为香豆素类化合物,无色柱状结晶,蛇床子中含量 0.8%,分子式C15H16O3[引.已知蛇床子素具有较强 的抑制表皮藓菌的活性,并有一定的抗诱变作用[3】, 所以我们进一步对单体蛇床子素进行了抗肿瘤作用 的研究. 1材料 1.1蛇床子素购自中国药品生物制品检定所,批 号:822—200002. 1.2实验动物6,7周龄雄性BALB/C裸鼠.由兰 州生物制品研究所提供,在本院动物中心SPF级条 件饲养.合格证:医动字第14—007号. 1.3肿瘤细胞肺腺癌(spc—A-1)细胞株由上海肿 瘤研究所提供,本室传代保存.肺鳞癌组织来源于本 院胸外科一中心性肺鳞癌患者(男,58岁),切除的标 本病理 报告 软件系统测试报告下载sgs报告如何下载关于路面塌陷情况报告535n,sgs报告怎么下载竣工报告下载 为支气管鳞癌. 1.4DR一70试剂盒即肺癌酶联定量试剂盒,购自 北京美迪克公司(AMDL,INC.公司产品,编号Bp- 86). 2方法 2.1肺腺癌(spc—A-1)荷瘤小鼠的建立spc—A-1细 胞常规培养于含12%新生小牛血清,0.25mmol/L Hepes,100u/ml青霉素和100u/ml链霉素的RP— MI1640培养基中.于指数生长期胰酶消化后收集细 胞于1640培养基中,调整细胞数为5×10/ml.经 台盼兰染色,细胞存活力大于95%.取细胞悬液 一 232— 0.2ml/只接种于裸鼠背部皮下. 2.2肺鳞癌荷瘤小鼠的建立选择生长良好肉眼观 察无坏死或液化的鳞癌组织,置无菌平皿内剪成1 mm3左右的小块,保存于1640培养基中,在无菌条 件下,用套管针接种于裸鼠背部皮下. 2.3剂量选择根据预实验结果,0.11rag/(g?d) -- 0.21rag/(g?d)为蛇床子抑制肺腺癌和肺鳞癌生 长的最佳剂量,由此推算出本实验中蛇床子素剂量应 在0.88ffg/(g?d),1.68fig/(g?d)范围内.故选择 1.5/~g/(g?d)作为实验剂量. 2.4实验分组及处理皮下接种spc—A一1细咆的12 只裸鼠,随机分为2组:受试组和对照组.受试组给 予蛇床子素腹腔注射,连续10d,对照组只注射同体 积的生理盐水.停止给药后处死动物,称体重及瘤 重.皮下接种肺鳞癌组织的12只裸鼠处理同前.实 验中观察以下指标:?瘤重,体重,并计算抑瘤率[ 和瘤/体比值: 肿瘤生长抑制率:(1一蔫案藿)xl00% ?测定DR一70.用小鼠血清10l按 说明书 房屋状态说明书下载罗氏说明书下载焊机说明书下载罗氏说明书下载GGD说明书下载 在波长 =450nm时测OD值,所有操作均由一人完成.在 实验中,采10只健康裸鼠的血清测定了DR一70的 ,以其平均值作为裸鼠的正常值.健康人的 OD值 DR一70<8/~g/m1). 2.5统计学处理用versionSpss9.0软件进行方 差 分析 定性数据统计分析pdf销售业绩分析模板建筑结构震害分析销售进度分析表京东商城竞争战略分析 和检验. 3结果 蛇床子素能不同程度地抑制肺腺癌和肺鳞癌瘤 体的生长,与对照组比较,均具有统计学差异(P< 0.01).肺鳞癌对蛇床子素的作用更为敏感,抑瘤率 达69.5%(表1). 肺腺癌,肺鳞癌实验组小鼠血清中的肺癌标志物 DR一70水平均低于各自对照组,经统计学分析有显着 性差异.测定结果见表2. 癌变.畸变.突变2002年10月第14卷第4期 Carcinogenesis,TeratogenesisandMutagenesisVol14No4Oct?,2002 *P<0.01,comparedwiththecontrolgroups 表2.蛇床子素对DR-70的影响 TIble2.InflmnceofostbolonDR-70 *P<0.01,comparedwiththecontrolgroups 4讨论 从实验结果可以看出,蛇床子素对肺鳞癌瘤体生 长的抑制作用(抑瘤率69.5%)强于对肺腺癌瘤体的 抑制作用(50%),这表明蛇床子素抑瘤作用可能存在 一 定的选择性. DR一70是肺癌标志物.在一定程度上反映癌症的 转归,治疗效果及肿瘤的恶性程度.被接种肺鳞癌的 裸鼠血清中的DR-70水平(0D=1.335)高于被接种 肺腺癌的裸鼠(0D=1.117),也说明了鳞癌恶性度大 于腺癌.给予蛇床子素的受试组与对照组相比,血清 DR.70水平有明显降低,说明蛇床子素对癌组织浸润 机体有一定抑制作用,在一定程度上也反映出蛇床子 素可能有抑瘤作用. 本实验室曾作过蛇床子水提取液对肺癌的抑制 作用(未发表资料),经过比较发现蛇床子素的抑制作 用弱于蛇床子水提取液(cMc)的抑制作用,见表3. 蛇床子中还含有棕榈酸,一谷淄醇和一些香豆素类化 合物,这些化合物中可能有一种或多种物质与蛇床子 素一同起作用,相互协同或增强对肺癌的抑制作用. 这需要进一步去实验证实. 在实验中发现,接种后的肺鳞癌瘤体明显大于肺 腺癌瘤体,这可能由于肺鳞癌恶性度高于肺腺癌,也 可能由于两种癌细胞的来源不同:肺鳞癌直接取自人 体,而肺腺癌是体外培养的癌细胞株. 表3.蛇床子素与蛇床子水提液对肺癌生长抑制率的比较 Table3.CompariaonofinhibitoryratebetweenOstbolandCIVIC 参考文献: [1]周俊,殷学军,王瑞,等.蛇床子水提液对小鼠S180肉瘤的 抑制作用[J].癌变?畸变?突变,2001,13(3):160163. [2]向仁德,傅晓红.蛇床子化学成分的研究(I)[J].中草药,1984, 15(9):14,15. [3]殷学军,向仁德,刘德祥,等.中药蛇床子水溶性提取物中化学成 分的抗诱变性的研究[J].癌变?畸变?突变,1999,11(?):65, 71. [4]向仁德,王丹,傅晓红.蛇床子化学成分的研究(11)[J].中草 药,1986,17(2):6,7. [5]钟进义,孙丰运,张燕滨.A—CM海洋生物制剂对小鼠S180肉 瘤抑制作用研究[J].癌变?畸变?突变,1998.10(6):365368. [6]潘峻,黄强,兰青,等.SarCNU在MGMT耐药基因高表 达荷瘤鼠中抗肿瘤作用分析[J].实用肿瘤杂志.2000,15(3): 173,175. ?--—— 233?--——