香水百合花瓣组织培养.doc

香水百合花瓣组织培养.doc 香水百合的组织培养 一 香水百合花瓣的组织培养 1 参考文献: [1] 潘佑找～陈香丽～胡琼～等.香水百合的组织培养技术研究[J].安徽农 15,17,:46，95. 学通报～2009～ [2] 李冰华～金晓玲～刘雪梅.香水百合鳞片组织培养再生体系的建立[J]. 江苏农业科学～2008,4,:83，85. [3] 高敏.香水百合的组培快繁[J].广西农业科学～2002,3,:120，121. [4] 阮少宁～杨华～梁一池～等.香水百合组织培养的试验研究[J].福建林 学院学报～2001～21,2,:142，145. 2 概述: 香水百合(L ilium spp. ) 香水百合为东方百合杂交种系～是百合科百合属多年生草本植物～是一种广泛应用的切花材料。本实验以香水百合花瓣作为外植体～在MS+1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA 培养基中～诱导出小鳞茎的外植体数最多～诱导速度较快～诱导率为86.67%。在1/2 MS+0.05 mg/L NAA 生根培养基中诱导生根快～生根数量多～诱导效果好。与目前香水百合鳞茎组织培养相比较～培养周期较长～尤其在前期采用不同浓度的6-BA 与NAA 对以未开放香水百合花瓣为外植体诱导小鳞茎的启动时间长。选用根部健壮、苗长2 cm 左右的试管苗～可以提高其移栽成活率。 3 结论 3(1 再生途径 花瓣?对诱导愈伤组织和不定芽的影响?脱分化,筛选出诱导愈伤组织的最佳脱分化培养基为MS+ 6BA1.0mg/L+ NAA0.2mg/L,?产生芽丛～生根。 3. 2 灭菌 方法 快递客服问题件处理详细方法山木方法pdf计算方法pdf华与华方法下载八字理论方法下载 75%酒精和0.1%升汞分别消毒,75%酒精消毒3 min～0.1%升汞消毒10 min,～无菌水漂洗4，5 次。分瓣～切割成0.5 cm×0.5 cm 的小块进行试验。 3. 3 培养基 以MS 为基本培养基～添加1.0 mg/L 6-BA+0.3 mg/L NAA组合诱导培养基诱导小鳞茎、以1/2 MS+0.05 mg/L NAA 作为生根培养基～各加30 g/L 蔗糖、12 g/L 琼脂。 3. 4培养条件 pH 值5.8 左右、温度,25?2,?～光照强度1 500 lx～光照时间每天12 h[5-6]。 二 香水百合鳞片的组织培养 1 参考文献: [ 1] Robb SM. The cu lture of excised t issu e from bu lb scales of 3 L iliumsp ec iosum [ J] . J Exp Bot, 1957, 8( 3 ) : 348， 352. [ 2]谭文澄, 戴策刚. 观赏植物组织培养技术[M ] . 北京: 中国林业出版社, 1991: 290，297. [ 3]蒋细旺, 司怀军. 百合的组织培养技术综述[ J] . 湖北农业科学,2004 ( 1) : 78 ，82. [ 4]景艳莉, 周蕴薇, 张金玉, 等. 精粹百合的组织培养与快速繁殖技术[ J] . 东北林业大学学报, 2006, 34( 6 ) : 46， 47. 2 概述: 香水百合鳞片组织培养过程中, 从鳞片启动、愈伤组织增殖、继代培养到生根培养都可以用1 /2MS+ 2. 0 mg /L 2, 4 - D + 0. 5 mg /L NAA + 0. 5 mg /LKT 和1 /2MS+ 3. 0 mg /L 2, 4- D + 1. 0 mg /L KT 2种配方的培养基进行培养。在1 /2MS + 2. 0 mg /L2, 4- D + 0. 5 mg /L NAA + 0. 5 mg /L KT 培养基中起初鳞茎生长速度不如在1 /2MS + 3. 0 mg /L2, 4- D + 1. 0 mg /L KT 培养基中长得快, 但接种2周后前者的生长速度加快, 并在接种30 d之内赶上后者的生长量。考虑到经济因素, 用1 /2MS + 2. 0mg /L 2, 4- D+ 0. 5mg /L NAA+ 0. 5mg /L KT成本更低, 更适用于工厂化生产。 鳞茎的外、中、内层鳞片均能分化出小鳞茎, 但内层鳞片的分化能力最强, 而且分化最早, 中层鳞片的分化能力次之, 外层鳞片分化能力最弱, 且分化时间较晚。说明不同的百合品种鳞片在分化能力上存在差异。 在上述2种配方的培养基中, 幼嫩的组织如嫩绿色愈伤组织和直径不超过0. 4 cm 的小鳞茎的愈伤组织生长较快, 并且持续保持分化小鳞茎的能力。直径达0. 4 cm 以上的小鳞茎则只增高长大而基本上不再生长愈伤组织。这说明香水百合的分化途径与组织的幼嫩程度有关。 3 结论 3. 1 再生途径 根据鳞片生长部位, 分外、中、内层3个部分剥离鳞片, 均取其下部, 凸面 朝下分别接种于分化培养基上。将萌发的小鳞茎切下转入继代培养基, 进行增殖培养。将直径约1 cm 的鳞茎接种到生根培养基上, 生根苗移栽到珍珠岩与草炭土1 :1混合的基质中。 3. 2 灭菌方法 从鳞茎上剥取内部清洁、完整的鳞片用流动水冲洗2 h, 在无菌条件下用70% 的酒精浸泡30 s, 蒸馏水冲洗3次, 然后用0. 1% 升汞浸泡8 m in, 再用无菌水冲洗8次。在超净工作台上把它们分别接种于不同的分化培养基上。 3. 3 培养基 基本培养基均用1 /2MS固体培养基, 用1 /2MS+ 3. 0 mg /L 2, 4- D+ 1. 0 mg /L KT和1 /2MS+ 2. 0mg /L 2, 4- D+ 0. 5mg /LNAA + 0. 5 mg /L KT 作为培养基。培养基内加蔗糖30 g /L, 琼脂6. 5g /L。 3. 4 培养条件 pH值为5. 8 左右, 培养温度( 24 ? 1),光照强度1 500 lx, 光照时长为14 h /d。 三 香水百合子房的组织培养 1 参考文献: [ 1]李守丽, 石 雷, 张金政, 等. 大百合子房的离体培养[ J]. 园艺学报, 2007, 34( 1): 197,200. [ 2]周艳萍, 王 惠, 贾桂霞. 大百合组织培养与快速繁殖[ J]. 亚热带植物科学, 2007, 36( 1): 66,67. [ 3]路 艳, 卞贵建, 王永清. 大百合鳞片诱导不定芽的影响因素研究[ J]. 现代农业科技, 2007, ( 16) : 8,10. 2 概述: 以子房为外植体, 在适当浓度的KT和NAA 组合的MS培养基上可诱导出愈伤组织和不定芽并实现芽的增殖, 不定芽在添加0.5mg/L- 1的NAA 和0.3%活性炭的1 /2MS培养基上可诱导生根。将生根的试管苗移栽到由珍珠岩、草炭土、园土混合而成的基质上培养, 成活率可达90%以上, 从而实现百合的试管繁殖。 在本项研究所作的实验中, 发现百合的组织培养过程中其培养物会产生严重的褐变, 这可能是由于培养物中含有丰富的多酚类化合物, 这些物质在多酚氧化酶的作用下氧化即形成褐变。褐变会使培养物死亡, 导致组织培养的失败。在培养基中加入抗氧化剂和吸附物质对防止某些植物的培养物的褐变有一定作 用。我们在培养基中加入了0.3%的活性炭和0.5mg/L- 1的聚乙烯吡咯烷酮( PVP), 并在PVP液中切取外植体, 此举对防止培养物的褐变起到了一定的作用。另外, 及时地将培养物转接入新鲜培养基中(每3 周转1次)、适当降低培养基中琼脂的含量也是减轻培养物褐变的简便有效办法。百合培养物的褐变是造成其分化率低的原因之一, 在组织培养中应重视对其褐变的克服。 百合属植物具有极高观赏价值, 亦具食用价值, 是开发潜力较大的花卉, 其引种栽培已取得初步成功, 但规模化繁殖仍是一大难 题 快递公司问题件快递公司问题件货款处理关于圆的周长面积重点题型关于解方程组的题及答案关于南海问题 。有必要加大对其进行组培快繁技术研究的力度。但有关百合属植物组织培养技术的研究多集中在以百合鳞茎的鳞片作为外植体上。外植体的消毒是建立百合离体培养体系的重要环节。本项目组研究发现, 以百合鳞茎的鳞片作外植体灭菌十分困难, 污染率极高, 且容易被消毒剂伤害,即使留下部分未污染的鳞片, 不久后也易褐化死亡。而以其未开放的花器官作为外植体, 不仅材料本身带菌较少, 且由于有花序苞片包裹, 可使花器官组织在灭菌过程中受到保护, 灭菌效果较好, 分化也较快, 且花器官数量多, 取材容易, 是百合组织培养的较好材料。 经过本项研究, 初步建立了百合的离体培养和植株再生体系, 可为其种质保存、快速繁殖和育种提供科学依据, 但要真正达到其组培快繁的目的, 该项技术体系还需进一步完善。 3 结论 3. 1再生途径 花蕾?对诱导愈伤组织和不定芽的影响?继代培养,愈伤组织培养基:MS+6BA 1mg/L+NAA0.2 mg/L+ 琼脂7g/L,?生根培养 3. 2灭菌方法 将取回的百合植株未展开花序用75%的酒精擦洗一遍, 然后用0?1% 的升汞溶液或漂白粉溶液浸泡不同时间, 之后用无菌水泡洗4次。剥出其花蕾, 子房 切成0?5 cm长的小段, 接种于MS 培养基上。 3. 3培养基 2.0- 3.0mg/ L- 1KT+ 1.0 mg/L- 1NAA 组合以及2.0mg/L- 1KT+ 1.0mg/L- 1 2、4- D组合的MS培养基或KT为2.0- 3.0mg/ L-1时,添加1.0mg/ L- 1的NAA的MS培养基。 3. 4培养条件 温度24-26 , 光照强度2 000 lx, 日光灯光源, 光照时间12 h /d。