人胎盘组织液HPLC指纹图分析

人胎盘组织液HPLC指纹图分析 ? 238中国生物制品学杂志2001年第14卷第4期ChinJd汕2001,Vol14.No.4 人胎盘组织液HPLC指纹图分析 程雅琴杨鹏云(中国药品生物制品检定所,北京1(11)50) 【摘要】目的建立人胎盘组织灌制品批间一致性的质量控制方法.方法采用}硼上 指纹图方法.观察 同一生产单位不同生产批之间.以及不同生产单位之问人胎盘组织液制品HPLC 主要色谱峰的变化.结果同一 生产单位不同批的人胎盘组织液指纹图谱基本一致;不同生产单位的人胎盘组织 灌的指纹图谱有差异.结论 用于控制胎盘组织液制品批问—}硼上指纹图方法可以作为常规质量控制指标, 致性. 【关键词】人胎盘组织液}酮上指纹图质量控制 HPLCfingerprintofHumanPlacentaTissueHydrolysate CHENGYaq.m,"fANGPengyun(Nat~last/tuze如rtheControtPn础cel'eandB地以 Products, &100050) 【Abstract】ObjectiveToestablishamethodfor日玎a蜘 thequalityoortsisterlLe~ofhumanplacenta tissuehydrolysateofdifferentlots.MethodsTheHPLCfingerprintsofhumanplacentatissue hydrolysateof differentlotspaxlucedbythesamemanufacturer,aswellasthoseproducedbydifferentraonuf acmrers.fe observed.ResultsTheHPLCfagerpri~tsofthehumanp/ae.entatissuehyd~Lysateofdifferen ttsproduced bythesmmanufacturerwefeessentiallyinagreement.HOWeVeF.thoseproducedbydifferen tnmnufacmrers weresignifieant/ydifferent.ConclusionHPLCfingerprintcaIlbeuseda8aroutinequalityind exofhuman placentatissuehydrolysate. 【Keywords】HumanplacentatissuehydidysateHPLCfingerprintQu~Utycontro1 人胎盘组织液是用健康产妇胎盘组织提取并且 经114~C30min灭菌制成的液体制剂.主要用于治 疗妇科,皮肤科的一些慢性炎症,手术后粘连,疤痕 挛缩以及气管炎等某些慢性病.该制剂在临床上虽 已使用多年,但因其质量 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 不完善,仍未列人正式 《中国生物制品规程》之中. 材料与方法 1.仪器 1.1高压液相色谱系统 1.2高压液相色谱柱 cm,H1260o ZORBAX300SB—G18,4.6nan×25 2.实验方法 参考扬鹏云等应用反相HPLC分析rHuEPO肽 图的方法,对色谱柱,流速,检测波长,洗脱梯度等 条件做了修改,主要实验条件如下: 2.1流动相:A为0.1%三氟醋酸水;B为0. 1%三氟醋酸乙腈. 2.2流速:1.00ml/min. 2.3柱温45?. 2.4上样~":20rd. 2.5检测波长:254ILrla. 2.6洗脱梯度 表 关于同志近三年现实表现材料材料类招标技术评分表图表与交易pdf视力表打印pdf用图表说话 pdf 衰1洗脱梯度表 Tab1.口ltI?t~aieat TLmeHowN0()()%A (%) 100.0 90.0 0.0 0.0 l00.0 100.0 %B (%)Cta've 0.001.00 5.001.00 l5.001.00 20.001.00 25.001.00 30.001.00 0.O 10.0 100.0 l00.O 0.0 0.0 3.样品 A,B,C3个生产单位的人胎盘组织液. 结果 总共检测A单位11批,B单位l2批,c单位3 批人胎盘组织液,检测结果表明,相对峰面积在2% 中国生物制品学杂志2001年第14卷第4期O,inJd汕2001.Vol14.No.4?239? 以上A单位有9个峰(见表2,图1,图2),B单位有6 个峰(见表3,图1,图2).A和B单位的胎盘组织液 在第1…345,6及第9峰的保留时间及相对峰面积 相同,见表5.B单位在9.6min左右还有峰.相对峰 面积几何均数为5.35%(n=12),见图2.C单位的 胎盘组织液HPLC指纹图谱与A和B两单位相比,c 单位的1号制品有5个峰,2,3号仅能检出3个峰. 3批制品共同能检出3个峰.另外在10.6min左右 有一个大的馒头峰,相对峰面积几何均数为74. 67%(n:3),见表4,图3. 围1A单位胎盘组织液卸吼C指纹圈 g,g1.卸血砌0fhmlaaoematissuehydroly- sate~ctutredby?目日q白IchIrerA 1.0o 0.80 0.60 吧oJ40 0.20 0.0o 0.0o置0010.00 Minute~ 围2B单位胎盘组织液I玎指纹图 g,g2.HPLc山er】岬m茁衄?印Iatissuehydroly- sateDuredbyn岫u丘?d?rB 图3C单位胎盘组织液I玎指纹围 ng3?血群r缸eth,~岫tissuehydroly? salen?mufhdredbymmnffactua~C 表2A单位人胎盘组织液I玎PIc指纹围谱比较 Tab2一HPLCfmgem~0fhlI?laa~ntatissuehydro0sa~ manufaam~byn?n?鼬lreA l23456789 】+++++++++ 2+++++++++ 3+++++++++ 4+++++++++ 5+++++++++ 6+++++++++ 7+++++++++ 8+++++++++ 9+++++一一一+ l0++++++一++ l1++++++一++ Note:+tthePeakarearea8.bov~2% 一 tpeak~eerved. 寰3B单位人胎盘组织液I玎PIc指纹围谱比较 Tab3.HPLC而田,fim茁衄啪tatissue血d 皿目m?hdu哪byn'mmlfactm'eB N0le:+,thePeakareaob2%; 一 ,nop?d~rved. ? 240?中国生物制品学杂志2001年第l4卷第4期cIIi|lJBido2001,Vo1.14No.4 表4c单位人胎盘组织液加指纹图谱 Tab4.卸眦ralgena'~ofhmmn?哪tatissuehydro~aem龃岫bym蛐岫咖rerc Lot1Lot2Lot3 型型型竺) 3.1673.843.1671.凹3.1672.01 3.53321.133.5332.563.5333.95 3.7174.38一一一一 4.30.2.O0一一一一 6.3172.546.3172.086.3172.68 3.833,3.867 4.167,4l83 5.2175.3 5.442—5.567 16.46?1.09 28.60?1.83 3.29?0.54. 2.33?0.43 6.500—6.5332.90?0.79 3.472,3.617 3.767—3.蝴 4.10o一4.233 5.192—5.242 5.400—5.557 5.750,5.878 6.184—6.3oo 6.400—6.533 3.02?2.01 21.嘴?3.80 35.16?761 3.74?1.50 3.13?0.50 4.28?0.99 4.10?0.90 3.61?1.16 讨论 本文试图在胎盘组织液经临床应用有效的基础 上,采用HPLC指纹图来控制胎盘组织液的批间一 致性.从试验结果来看,采用本实验条件可以达到 此目的.检测A和B单位生产的l0多批胎盘组织 液HPLC指纹图的结果表明,相对峰面积在2%以上 的有6个色谱峰相一致(包括保留时间和相对峰面 积).不一致处在于A单位比B单位多出3个峰,B 单位比A单位在9.6和10.6min处多出2个峰(见 图1,图2,图中在10min出现的一个高峰是酚峰). 造成差异原因可能是由于B单位的胎盘组织液水 解得不够完全,从图2看到的8min以后还有未被水 解峰.此点在c单位的胎盘组织液HPI~指纹图中 更为明显.该单位在9r~fin后有一个相对面积75% 的未水解峰,9rain前仅有几个峰,并且各峰的保留 时间与A,B两单位均不一致.说明c单位的胎盘 组织液生产工艺与前两个单位有很大不同,是否影 响疗效还有待于探讨.另外从表2,表3看出,B单 位12批制品m结果完全一致.A单位大多数制 品}玎PLc色谱图一致,但还有个别批在个别峰上不 一 致.这说明还需要进一步确立各步骤生产参数, 细化本单位生产标准操作规程,使生产工艺稳定,制 品质量一致.总之,本文所采用的HPLC指纹图方 法可以作为胎盘组织液制品常规检定方法,用于控 制其批间一致性(包括同一个生产单位生产的和不 同生产单位生产的制品).但是在此之前,还需要在 临床再 评价 LEC评价法下载LEC评价法下载评价量规免费下载学院评价表文档下载学院评价表文档下载 表明该制品有效后,研制一批对照品,用 于胎盘组织液制品HPLC指纹图的常规质量控制. 参考文献 [1]中国生物制品规程20OO,31—32. [2]杨鹛云,程雅军,袁设成.应用胰蛋白酶裂解反相}?法分析 rHuEP0肚图.中国生物制品学杂志,1997,lo(4):214—217. (收稿日期:2(101—04一?)