护肤品的功效性评价方法综述

>>>>>>现代科学技术!尤其是生物技术和计算机技术的飞速发展和广泛应用!给化妆品行业带来了全新的发展机遇!赋予化妆品以一定的功效性是新世纪化妆品发展的重要趋势"近!"年来!人们对化妆品的要求已从洁肤#润肤为目的的基础护肤品向美白#祛皱为目的的功效性化妆品方向发展"一种功能性化妆品是否确实具有它所宣称的功效$怎样评价护肤类化妆品的有效性$这一直是护肤类化妆品研究的重要课题"本文就美白#抗衰#保湿及防晒护肤品的主要功效性评价方法一一评述"美白护肤品的功效性评价#$黑色素形成机理和美白剂抑制机理概述目前公认的黑色素合成途径是%酪氨酸!多巴酸!多巴醌!多巴色素&或二羟基吲哚酸’!黑色素低聚体!黑色素!此合成途径合成的黑色素叫优黑色素或真黑色素&%&’()*+,+’!皮肤的色素主要由它组成"在黑色素合成中!多巴醌还可通过另一途径经谷胱甘肽或半胱氨酸催化生成褐黑色素&-.(/’()*+,+’"据此!美白化妆品通过干扰黑色素的形成和转移过程!达到美白皮肤的目的"主要包括%抑制酪氨酸的生物合成#选择性破坏黑色素细胞#抑制黑色素颗粒的形成和改变其结构#抑制黑色素的生成和干扰黑色素颗粒的转移等等"!$生物化学方法测定酪氨酸酶活性酪氨酸酶是黑色素合成途径中的限速酶!它主要通过影响&#’酪氨酸转化成多巴酸(&!’多巴酸氧化为多巴醌来影响黑色素的生成"一些美白剂!如曲酸及其衍生物#熊果苷等!通过抑制酪氨酸酶的活性来抑制黑色素细胞的生成"因此!可以通过测定该美白剂对酪氨酸酶的抑制结果!来评价其功效"生物化学方法测定酪氨酸酶活性抑制的原理是%护肤品的功效性评价方法综述文/薛虹宇,Dr.EvelynG.Su(南京中狮化学品有限公司0公司专栏&收稿日期%!""12"3456’43>>>>>>酪氨酸或多巴酸在酪氨酸酶的作用下转化为多巴醌!该反应是呈色反应"通过比色法测定!判断不同美白剂对于酪氨酸酶活性的抑制率"该方法中较多使用蘑菇酪氨酸酶"用酪氨酸酶法来判定美白剂的效果!虽然简单快捷!但是仍具有一定的局限性"它不能反映出美白剂是否能到达有效作用点!也无法反映出美白剂的其他作用机理"!"细胞生物学培养法评价美白化妆品的美白功效早期采用黑色素瘤细胞进行培养!由于黑素瘤细胞具有能够多次传代#生长快#培养条件相对较低等优点!成为筛选美白剂时的首选细胞"#$世纪%$年代初!&’(’)*+,成功培养出正常黑素瘤细胞!越来越多采用人体正常黑色素细胞的体外培养技术"在单细胞基础上建立不同细胞的共培养系统-./0.1231,+45(3+67!以便在体外重新构建类似于体内细胞间的反应"8+*)’+,等构建的表皮模型用来研究黑色素生成机理!该模型由可以生长并分化的人体角朊细胞组成!暴露在空气中一定时间后可形成致密的角质层!与人体的表皮非常接近"以该表皮模型为基础!接种入黑素瘤细胞和朗氏-9:)*+,;:)(<细胞"该模型中可以清楚地观测到黑色素的产生及其向临近角朊细胞的转移"使用了曲酸后可观测到色素的降低而且黑色素的合成受到了抑制"利用细胞生物学方法我们可以从多个途径分析黑色素的形成机理$%=&通过光镜#电镜观察黑素瘤细胞的存活状况#外部形态及黑素合成量’%>&通过四唑盐比色法%?@@&!测定观察组和对照组吸光度值!根据吸光度值计算细胞增殖指数!观察美白剂对黑素瘤细胞生长情况的抑制作用’%!&通过化学分析法或免疫学方法对酪氨酸酶活性或含量进行测定!观察美白剂对酪氨酸酶的抑制作用’%A&通过分子生物学方法对黑色素合成过程中相关酶%酪氨酸酶!BCD.E氧化酶和多巴色素互变酶&的68FE%信使核糖核酸&#BFEG脱氧核糖核酸<的表达水平及酪氨酸酶合成量进行测定!以评价美白剂对这些酶的影响"A"人体试用法结合仪器测定人体试用法一般以人体前臂皮肤为受试部位!以避免光照对于皮肤色度的影响"将美白剂涂于人体皮肤上!采用皮肤颜色测定仪!观察涂敷美白剂前后肤色的变化!以评价美白效果"皮肤肤色的测定可使用?&HE?&@&8?H=I黑色素测定仪进行"该种图像分析技术是基于光谱吸收的原理!通过特定波长的光照在人体皮肤上的反射量来确定皮肤中黑色素含量"由于发射光的量一定!就可以计算出皮肤吸收光的量"祛皱护肤品的功效性评价方法="皮肤皱纹产生的原因皮肤的纹理和皱纹是人体皮肤表面所能观察到的主要结构"皮肤纹理是人皮肤表面微小的#呈多角形的皮丘皮沟!它使得皮肤柔韧#富有弹性!并使皮脂腺#汗腺中的分泌物能沿其纹路扩展到整个皮肤表面"随着年龄的增加!皮肤衰老!其纹理的深度下降!各多角形之间融合!皱纹逐渐形成!并逐渐增多!加深"而从分子生物学角度看!皮肤衰老则表现为皮肤细胞增殖能力下降!表皮更新速度减慢!表皮重建能力减弱!真皮胶原合成减慢!皮肤色素分布不均等">"体外皮肤组织#器官培养法在抗衰老护肤品功效评价中的应用在寻找或筛选具有抗衰老活性物质时!常以皮肤角朊细胞GJ+,:3’)/K53+<和成纤维细胞GL’M,/M:2(3<为受试对象!确定该物质基本毒性情况!着重观察对两种细胞增殖能力及活性的影响!以及皮肤中胶原蛋白#弹性蛋白和黏多糖等延缓皮肤衰老的物质的新陈代谢情况!从而在分子生物学角度为寻求其作用机理进行探讨"E)N+,0L,+’等评估抗衰老化妆品的活性成分时!采用了相当真皮和皮肤的模型来考察该产品对成纤维细胞和角朊细胞的激活程度"其中!相当真皮模型是将正常的人体成纤维细胞接种到含有真皮基质的#A公司专栏44>>>>>>公司专栏孔板培养而得!相当皮肤模型则是将成年人体的角朊细胞接种到相当真皮模型上继续培养而成"!"人体试用结合仪器分析技术皮肤纹理与皱纹的测定一直是皮肤抗衰研究的一个重要手段!也是目前抗衰防皱类护肤品效能评估方法之一"在已建立的皮肤纹理和皱纹测定方法中!非创伤性检测技术深受生物医学与化妆品科学家的青睐"早期应用机械探测方法!用具有一定强度的探针对皮肤复膜表面进行探测!其精度与灵敏度都不高"目前国际上广泛采用皮肤显微镜摄像技术!结合采用计算机图像分析技术进行皮肤表面结构研究!通过检测皱纹在斜射光下形成的阴影面积!得到皮纹与皱纹的深度!并可直接得到皮肤皱纹参数等直接反映皮肤衰老程度的指标"对皮肤表面结构进行精细分析!重现皮肤的三维结构!使得测定的重复性#灵敏度以及精确度都得以提高"保湿护肤品的功效性评价方法#"皮肤保湿机理保湿护肤品主要通过保水和吸湿两大机理对皮肤起保湿作用$一方面!护肤品在皮肤表面形成一层封闭的润滑膜!阻止皮肤表面的水分向环境散失%另一方面!护肤膜中含有的保湿剂可以与水强力结合!使皮肤的角质层保持湿润"$%理化评价方法护肤品保湿性能理化评价方法的测定原理$不同的保湿剂分子对水分子的作用力不同!吸收水分和保持水分的能力也不同"作用力大的!对水分子结合力强!吸收和保持水的量也较大"通过测定保湿化妆品的保湿率!推断产品的保湿效果"该方法为体外实验!实验条件简便#易行!但不足之处是其忽略了皮肤的吸收功能!且测定环境要保持恒温恒湿"!"人体试用法皮肤含水量的大小能够通过其电容大小来反映"&’()*’+*,*(&-.$/就是基于这个原理通过检测皮肤角质层的电容来计算其含水量"利用仪器!测定使用护肤品前后皮肤角质水合情况的变化!来评价护肤品的保湿性能"评价保湿护肤品的保湿效果强度!采用一次涂敷实验"而判定保湿化妆品的综合效果时!需观察重复涂敷的效果!就要采用长期试用实验"防晒护肤品的功效性评价方法#%防晒机理简述很多文献报道过太阳光中紫外线对于人体的伤害!它是引起皮肤光老化和皮肤肿瘤的主要原因"我们知道012能引起即时的皮肤损害&&&红斑反应!而013则引起长期#慢性的损伤"防晒系数456748)5(’,*9,:’)6;9,’(<定义为使用防晒化妆品后的最小红斑剂量-=>7-:):+;?=(@,A*+;>’B*<与未用防晒化妆品的-=>的比值"456作为因紫外线引起皮肤红斑的指标!代表的是012的防御效果"防晒化妆品中的有效成分是防晒剂!包括物理阻挡剂和化学吸收剂"物理性遮光剂通常是一些不透光的物质!能反射和散射所有的紫外线及可见光!而化学吸收剂的作用是选择性地吸收紫外线"因此!添加有防晒剂的化妆品涂抹在皮肤上形成一层保护膜!通过吸收和反射阳光中的紫外线来避免或延迟皮肤受到紫外线的伤害"$%体外仪器测量法456体外测定方法!利用相关的测定仪器可快速#准确地进行防晒产品的456测定"该方法使用人工光源覆盖012和013段!配备有计算机处理程序!/+:)内可计算出结果!其结果重复性好"大量的数据表明!其与人体法测定的456值具有良好的相关性!尤其适用于研发新配方456值评估和生产过程的质量控制!可以有效地节省研发过程中的人力#物力和时间"!%人体测试法用人体法进行456值的测定所得到的结果是皮肤在一定波长紫外线作用下的综合红斑效果!它同时包含着受紫外线照射的紫外线吸收剂降解后!在皮肤表面以及渗入皮肤后所产生的刺激效应"人体法测定456值!前不久制定的国际统一的防晒指数测定方法’国际化妆品防晒指数456值检测方45>>>>>>公司专栏结论!"各种评价方法比较!"!一般理化方法的局限性!!!不能全面地反映体系的作用机理化妆品功效的发挥与两方面的因素有关"一是活性成分自身具有功效#二是该活性成分须有效地以一定浓度被传送至作用位点$传统的理化分析方法%实验条件相对简便%速度快捷%对于研发人员快速筛选新型功效性原料具有实际作用意义$但是%由于条件的局限性%它不能全面地反应评估体系的作用机理%从而在应用中受到限制$!"#细胞培养技术的特点及其对培养条件的限制目前主要有五种细胞用于体外培养"角朊细胞$%&’()*+,-.)&/&黑素细胞$0&1(+,-.)&2&朗氏细胞$3(+4&’5(+67-&112&成纤维细胞$8*9’,9(16)2及皮脂细胞$:&9,-.)&2$根据评估的不同目的可选用不同的细胞模型和评估指标$如前所述%器官型培养及器官培养更能反映体内的实际情况$可将活性物质配成霜等剂型%直接涂于重建表皮$器官型培养2或离体皮肤$器官培养2%由于它们具有正常表皮的分化特征%可观察化妆品对表皮增殖分化能力&表真皮组织及功能的影响%使得体外研究更具意义$在欧美等国都鼓励采用动物替代方法%根据欧共体对化妆品有关规定$;<=<>=!"2的第六次修订%当有恰当的可用替代物时%动物实验将被禁止$同时%人体皮肤细胞的体外培养技术评估产品可消除不同种属之间的差异%也可确定某一物质引起的生物学反应以及该物质的剂量反应$随着三维细胞培养技术的发展%表皮和真皮模拟技术的研究%我们将来可以在体外培养中模拟人体皮肤构造以及皮肤不同细胞间&细胞与细胞基质间的各种反应%使它更有效地应用于化妆品工业$!"<人体试用结合现代仪器分析技术!!!客观&全面地考察样品的综合作用效果在体外评价的基础上%利用人体实验结合现代仪器分析技术对化妆品进行评价%是一种非损害性的客观评价方法%它有别于传统主观评价方法’如评价者主观分析&志愿者使用感觉评价等($一方面%测试样品直接作用于人%观察结果较少受环境差别的影响)另一方面%确定客观指标%有利于试用前后的功效对比$如何正确采用人体试用结合仪器分析技术来准确评判护肤品的功效%实验方法的合理制定是关键$主要包括"(#合适的实验原则"根据所评价护肤品的功效%选择分组对照&自身对照&组间对照或者双盲对照$9#选用符合条件的观察对象$-#测试环境的相对稳定%一般保持室温##$&环境湿度?@ABC@A$D#取样的重复性好"在人体合适的试用部位%划定样品使用区域%多次重复测量%取平均值$&#数据处理方法选择"计算机图像处理和应用软件分析技术及医学统计分析方法的综合应用$#"将体外法和人体法结合使用%全面评价护肤品的功效性对于护肤品的功效评价%除防晒产品外%目前仍没有一个统一的评价 标准 excel标准偏差excel标准偏差函数exl标准差函数国标检验抽样标准表免费下载红头文件格式标准下载 %这给我们如何正确评价产品带来一定的困难$但从上面的阐述中我们可以看到%将生物技术和现代仪器分析手段相结合来评价护肤品的综合功效%是今后化妆品功效性评价的趋势$这将使得化妆品行业在向生物技术&计算机技术等高科技领域渗透的基础上%沿着科学的方向发展$!法’E+)&’+()*,+(1:F+G’,)&-)*,+8(-),’’:G8(H&6)0&)5,D(*%IH8JK:J&IL3EGJ和MIEJ都已认可%用于 规范 编程规范下载gsp规范下载钢格栅规范下载警徽规范下载建设厅规范下载 防晒化妆品防晒指数的标识$但这仅仅是限于NOP的防护%对于NOJ防护的测定%目前还未形成共识$人体测试法的关键问题是"各种NOJ&NOP光源所产生的紫外线放射量对人的健康损害后果未知%从而具有极大的伦理道德方面的顾忌$46